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棉纤维优势表达GhRACK1基因及其启动子的克隆与分析

摘要第1-7页
Abstract第7-11页
第一章 文献综述第11-21页
   ·棉花纤维的分子发育过程第11-12页
     ·棉花纤维原始细胞的分化起始期第11-12页
     ·棉花纤维的伸长期第12页
     ·棉花纤维的次生壁增厚期第12页
     ·棉花纤维的成熟期第12页
   ·棉花纤维特异基因研究现状第12-14页
   ·植物 RACK1 基因的研究背景第14页
   ·启动子概述第14-16页
     ·启动子的一般结构第14-16页
   ·分离植物特异表达启动子的方法第16-18页
     ·基因组文库第16-17页
     ·I-PCR第17页
     ·YADE 法第17页
     ·随机引物的 PCR第17-18页
     ·接头连接 PCR第18页
   ·棉纤维优势表达的启动子研究进展第18-19页
   ·研究目的和意义第19-21页
第二章 材料与方法第21-42页
   ·实验材料第21-25页
     ·植物材料第21页
     ·实验菌株和质粒载体第21页
     ·实验所用酶和实验试剂盒及生化试剂第21-22页
     ·实验所用培养基和常规试剂第22-23页
     ·实验仪器第23页
     ·实验所用引物第23-25页
   ·实验方法第25-42页
     ·苏棉 1210 天左右的纤维和叶片的 RNA 的提取与检测第25-26页
     ·棉纤维差异 cDNA 序列片段特异性的检测第26-27页
     ·苏棉 12 纤维特异基因 GhRACK1 全长的获得第27-31页
     ·克隆苏棉 12 纤维特异基因的上游启动子第31-36页
     ·对得到的上游序列进行缺失第36-37页
     ·对得到的启动子片段连接 T 载体第37-38页
     ·棉纤维优势启动子植物表达载体的构建第38-40页
     ·转化烟草第40页
     ·对转化烟草进行阳性检测第40-41页
     ·验证启动子的活性第41-42页
第三章 结果与分析第42-63页
   ·苏棉 12 纤维特异基因的克隆与分析第42-48页
     ·确定差减杂交得到的棉纤维差异 CDNA 片段的特异性第42-44页
     ·苏棉 12 纤维优势表达基因 GhRACK1 CDNA 全长的克隆第44-45页
     ·苏棉 12 纤维优势表达基因的序列分析第45-48页
   ·GhRACK1 基因上游启动子的克隆及序列分析第48-55页
     ·反向 PCR 克隆得到启动子序列第48-50页
     ·启动子序列的分析第50-55页
   ·含缺失启动子片段的植物表达载体的构建第55-59页
     ·缺失启动子驱动的 5 个植物表达载体框架图第57页
     ·植物表达载体的酶切检测第57-59页
   ·烟草的遗传转化第59-61页
   ·GUS 染色结果第61-63页
     ·转 Pr0 植物表达载体烟草的 GUS 染色第61-62页
     ·转 Pr1 植物表达载体烟草的 GUS 染色第62页
     ·转 Pr2 植物表达载体烟草的 GUS 染色第62-63页
第四章 全文结论第63-64页
参考文献第64-69页
致谢第69-70页
作者简介第70页

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