| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 缩略词 | 第8-11页 |
| 1 绪论 | 第11-17页 |
| ·引言 | 第11页 |
| ·研究背景 | 第11-14页 |
| ·绿僵菌参与体壁穿透阶段基因的研究进展 | 第11-13页 |
| ·真核生物四次跨膜蛋白研究进展 | 第13-14页 |
| ·课题立题依据与研究目的 | 第14-15页 |
| ·课题立题依据 | 第14-15页 |
| ·研究目的 | 第15页 |
| ·本课题研究内容 | 第15-16页 |
| ·生物信息学分析 | 第15页 |
| ·表达模式及亚细胞定位 | 第15页 |
| ·MaPls1 的功能分析 | 第15页 |
| ·MaPls1 调控的下游基因及信号途径分析 | 第15-16页 |
| ·技术路线 | 第16页 |
| ·本课题的创新之处 | 第16-17页 |
| 2 绿僵菌 MaPls1 的克隆与基因功能研究 | 第17-62页 |
| ·实验材料 | 第17-20页 |
| ·供试菌株 | 第17页 |
| ·主要培养基 | 第17-18页 |
| ·主要试剂 | 第18页 |
| ·主要实验溶液的配置 | 第18-19页 |
| ·主要设备与器材 | 第19-20页 |
| ·主要研究方法 | 第20-39页 |
| ·大肠杆菌感受态的转化 | 第20-21页 |
| ·农杆菌感受态的制备、转化 | 第21-22页 |
| ·农杆菌介导的绿僵菌的转化 | 第22页 |
| ·MaPls1 的克隆及生物信息学的分析 | 第22页 |
| ·MaPls1 敲除突变载体和回复突变载体的构建 | 第22-25页 |
| ·少量真菌基因组的快速提取 | 第25-26页 |
| ·MaPls1 的敲除转化子的筛选和初步验证 | 第26-27页 |
| ·大量真菌基因组的提取 | 第27页 |
| ·Southern blot 验证敲除转化子 | 第27-29页 |
| ·MaPls1 的回复转化子的筛选 | 第29-31页 |
| ·表达谱检测 | 第31-33页 |
| ·MaPls1 的亚细胞定位 | 第33-34页 |
| ·表型分析 | 第34-36页 |
| ·毒力测定 | 第36页 |
| ·体内生长和体外培养 | 第36-37页 |
| ·差异表达基因分析 | 第37-39页 |
| ·数据统计分析 | 第39页 |
| ·结果与分析 | 第39-58页 |
| ·MaPls1 的生物信息学分析 | 第39-41页 |
| ·MaPls1 敲除和回复载体的构建及验证 | 第41-42页 |
| ·MaPls1 的表达 | 第42-44页 |
| ·MaPls1 对生长和抗逆能力的影响 | 第44-46页 |
| ·MaPls1 对侵染结构的影响 | 第46-48页 |
| ·毒力测定 | 第48-49页 |
| ·虫菌体的体内和体外培养 | 第49-50页 |
| ·受 MaPls1 调节的差异表达基因和信号通路分析 | 第50-58页 |
| ·讨论 | 第58-62页 |
| 3 主要结论与后续工作建议 | 第62-63页 |
| ·主要结论 | 第62页 |
| ·后续工作 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-71页 |
| 附录 | 第71-81页 |
| A. 序列 | 第71-72页 |
| B. 附表 | 第72-81页 |
| C. 作者在攻读硕士学位期间发表的论文目录 | 第81页 |