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重组人白介素-29在毕赤酵母中的表达及抗肿瘤活性分析

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
目录第8-11页
第一章 绪论第11-20页
   ·IL-29 的发现第11页
   ·IL-29 的基因结构第11页
   ·IL-29 的蛋白质结构第11-12页
   ·IL-29 的表达第12-13页
   ·IL-29 的细胞受体第13-14页
   ·IL-29 的靶细胞第14页
   ·IL-29 的信号传导第14-15页
   ·IL-29 的生物学活性第15-17页
     ·IL-29 的抗病毒活性第15-16页
     ·IL-29 抗增殖活性第16页
     ·IL-29 体内抗肿瘤活性第16页
     ·IL-29 免疫调节活性第16-17页
   ·立题意义和主要内容第17-20页
     ·立题意义第17页
     ·主要内容第17-20页
第二章 材料与方法第20-41页
   ·实验材料第20-25页
     ·基因序列第20页
     ·质粒、菌株及细胞系第20页
     ·主要试剂第20页
     ·主要仪器第20-21页
     ·常用试剂的配制第21-24页
     ·培养基第24-25页
   ·实验方法第25-41页
     ·hIL-29 的生物信息学分析第25-26页
     ·hIL-29 成熟肽克隆载体的构建第26-29页
     ·rhIL-29 在毕赤酵母 GS115 中的表达第29-34页
     ·rhIL-29 的高效表达第34-35页
     ·高密度发酵第35-37页
     ·分离纯化第37-38页
     ·rhIL-29 抗肿瘤活性的分析第38-41页
第三章 结果与讨论第41-57页
   ·hIL-29 的生物信息学分析第41-45页
     ·hIl-29 的 ORF 及其编码蛋白的理化性质与一级结构特征的分析第41页
     ·hIL-29 的疏水区域及跨膜区域的分析第41页
     ·hIL-29 的信号肽及亚细胞定位的分析第41-42页
     ·hIL-29 的二级结构及蛋白功能的分析第42页
     ·hIL-29 的三级结构分析第42-44页
     ·IL-29 分子系统进化树的分析第44-45页
   ·重组克隆质粒 pUCm-rhIL-29 的构建第45-46页
     ·hIL-29 成熟肽基因的扩增第45页
     ·转化子 pUCm-rhIL-29/JM109 的菌液 PCR 筛选第45-46页
     ·pUCm-rhIL-29 双酶切鉴定第46页
   ·rhIL-29 在毕赤酵母 GS115 中的表达第46-49页
     ·重组质粒 pPIC9K~M-rhIL-29 的构建第46-47页
     ·SDS-PAGE 筛选高产菌株第47-48页
     ·酵母基因组 PCR 验证第48页
     ·发酵产物 rhIL-29 的 Western-Blotting 鉴定第48-49页
   ·发酵条件优化第49-51页
     ·甲醇添加量对产蛋白的影响第49页
     ·诱导时间对产蛋白的影响第49-50页
     ·起始 pH 对产蛋白的影响第50页
     ·发酵温度对产蛋白的影响第50-51页
     ·正交试验结果第51页
   ·高密度发酵结果第51-52页
   ·rhIL-29 分离纯化第52-54页
     ·rhIL-29 发酵液的超滤浓缩第52-53页
     ·SP Sepharose Fast Flow 离子交换层析第53页
     ·纯化后 rhIL-29 的纯度鉴定第53-54页
   ·rhIL-29 抗肿瘤活性分析第54-57页
主要结论与展望第57-59页
 主要结论第57页
 展望第57-59页
致谢第59-60页
参考文献第60-64页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第64页

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