摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
目录 | 第8-11页 |
第一章 绪论 | 第11-20页 |
·IL-29 的发现 | 第11页 |
·IL-29 的基因结构 | 第11页 |
·IL-29 的蛋白质结构 | 第11-12页 |
·IL-29 的表达 | 第12-13页 |
·IL-29 的细胞受体 | 第13-14页 |
·IL-29 的靶细胞 | 第14页 |
·IL-29 的信号传导 | 第14-15页 |
·IL-29 的生物学活性 | 第15-17页 |
·IL-29 的抗病毒活性 | 第15-16页 |
·IL-29 抗增殖活性 | 第16页 |
·IL-29 体内抗肿瘤活性 | 第16页 |
·IL-29 免疫调节活性 | 第16-17页 |
·立题意义和主要内容 | 第17-20页 |
·立题意义 | 第17页 |
·主要内容 | 第17-20页 |
第二章 材料与方法 | 第20-41页 |
·实验材料 | 第20-25页 |
·基因序列 | 第20页 |
·质粒、菌株及细胞系 | 第20页 |
·主要试剂 | 第20页 |
·主要仪器 | 第20-21页 |
·常用试剂的配制 | 第21-24页 |
·培养基 | 第24-25页 |
·实验方法 | 第25-41页 |
·hIL-29 的生物信息学分析 | 第25-26页 |
·hIL-29 成熟肽克隆载体的构建 | 第26-29页 |
·rhIL-29 在毕赤酵母 GS115 中的表达 | 第29-34页 |
·rhIL-29 的高效表达 | 第34-35页 |
·高密度发酵 | 第35-37页 |
·分离纯化 | 第37-38页 |
·rhIL-29 抗肿瘤活性的分析 | 第38-41页 |
第三章 结果与讨论 | 第41-57页 |
·hIL-29 的生物信息学分析 | 第41-45页 |
·hIl-29 的 ORF 及其编码蛋白的理化性质与一级结构特征的分析 | 第41页 |
·hIL-29 的疏水区域及跨膜区域的分析 | 第41页 |
·hIL-29 的信号肽及亚细胞定位的分析 | 第41-42页 |
·hIL-29 的二级结构及蛋白功能的分析 | 第42页 |
·hIL-29 的三级结构分析 | 第42-44页 |
·IL-29 分子系统进化树的分析 | 第44-45页 |
·重组克隆质粒 pUCm-rhIL-29 的构建 | 第45-46页 |
·hIL-29 成熟肽基因的扩增 | 第45页 |
·转化子 pUCm-rhIL-29/JM109 的菌液 PCR 筛选 | 第45-46页 |
·pUCm-rhIL-29 双酶切鉴定 | 第46页 |
·rhIL-29 在毕赤酵母 GS115 中的表达 | 第46-49页 |
·重组质粒 pPIC9K~M-rhIL-29 的构建 | 第46-47页 |
·SDS-PAGE 筛选高产菌株 | 第47-48页 |
·酵母基因组 PCR 验证 | 第48页 |
·发酵产物 rhIL-29 的 Western-Blotting 鉴定 | 第48-49页 |
·发酵条件优化 | 第49-51页 |
·甲醇添加量对产蛋白的影响 | 第49页 |
·诱导时间对产蛋白的影响 | 第49-50页 |
·起始 pH 对产蛋白的影响 | 第50页 |
·发酵温度对产蛋白的影响 | 第50-51页 |
·正交试验结果 | 第51页 |
·高密度发酵结果 | 第51-52页 |
·rhIL-29 分离纯化 | 第52-54页 |
·rhIL-29 发酵液的超滤浓缩 | 第52-53页 |
·SP Sepharose Fast Flow 离子交换层析 | 第53页 |
·纯化后 rhIL-29 的纯度鉴定 | 第53-54页 |
·rhIL-29 抗肿瘤活性分析 | 第54-57页 |
主要结论与展望 | 第57-59页 |
主要结论 | 第57页 |
展望 | 第57-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-64页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第64页 |