摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
1 前言 | 第11-17页 |
·水禽细小病毒概述 | 第11页 |
·水禽细小病毒的特性 | 第11-13页 |
·水禽细小病毒的理化性质 | 第11页 |
·水禽细小病毒结构蛋白及其功能 | 第11-12页 |
·水禽细小病的流行病学及临床症状 | 第12页 |
·水禽细小病 VP3 基因疫苗的研究进展 | 第12-13页 |
·GPV 抗原表位的研究进展 | 第13页 |
·抗原表位的研究进展 | 第13-14页 |
·应用噬菌体展示技术鉴定抗原表位 | 第14页 |
·腺病毒载体研究进展 | 第14-16页 |
·腺病毒载体的结构和功能 | 第14-15页 |
·腺病毒载体的优势和缺陷 | 第15页 |
·腺病毒载体的发展 | 第15-16页 |
·腺病毒载体在疫苗研究中的应用 | 第16页 |
·研究的目的与意义 | 第16-17页 |
2 材料和方法 | 第17-31页 |
·材料 | 第17-19页 |
·载体、菌种及细胞 | 第17页 |
·病毒 | 第17页 |
·工具酶 | 第17页 |
·主要试剂 | 第17-18页 |
·抗体和主要耗材 | 第18页 |
·引物设计软件 | 第18页 |
·序列分析软件 | 第18页 |
·主要仪器 | 第18-19页 |
·GPV 结构蛋白 VP3 抗原表位的筛选鉴定 | 第19-21页 |
·单抗的纯化 | 第19页 |
·噬菌体表面展示肽库的生物淘选 | 第19-20页 |
·噬菌斑的扩增和快速纯化 | 第20-21页 |
·噬菌体 DNA 的序列测定 | 第21页 |
·噬菌体 ELISA 检测 | 第21页 |
·水禽细小病毒 VP3 蛋白重组腺病毒载体的构建 | 第21-31页 |
·病毒 DNA 的提取 | 第21页 |
·VP3 基因扩增引物的设计 | 第21-22页 |
·VP3 基因的 PCR 扩增 | 第22页 |
·PCR 产物的胶回收纯化 | 第22-23页 |
·pMD18-T 载体克隆质粒的构建及鉴定 | 第23-24页 |
·重组腺病毒穿梭转移载体构建以及鉴定 | 第24-27页 |
·重组腺病毒质粒的构建及鉴定 | 第27-29页 |
·转染 HEK-293 细胞包装重组腺病毒 | 第29-30页 |
·重组腺病毒的鉴定 | 第30-31页 |
3 结果 | 第31-37页 |
·GPV 结构蛋白 VP3 抗原表位的筛选鉴定 | 第31-32页 |
·单抗的纯化结果 | 第31-32页 |
·噬菌体测序展示出的一致序列 | 第32页 |
·65DYRFHH88为构象表位 | 第32页 |
·水禽细小病毒 VP3 蛋白重组腺病毒载体的构建 | 第32-37页 |
·GPV 和 MDPV VP3 基因的扩增 | 第32-33页 |
·穿梭转移载体 ps-GPV-VP3 和 ps-MDPV-VP3 的鉴定 | 第33-34页 |
·同源重组腺病毒 pAd-GPV-VP3 和 pAd-MDPV-VP3 的酶切鉴定 | 第34页 |
·重组腺病毒转染 HEK-293 细胞 | 第34-35页 |
·重组腺病毒表达鉴定 | 第35-37页 |
4 讨论 | 第37-41页 |
·鹅细小病毒 VP3 蛋白表位的鉴定 | 第37-38页 |
·表位鉴定实验方法的分析 | 第37页 |
·蛋白表位鉴定结果分析 | 第37-38页 |
·水禽细小病毒 VP3 蛋白重组腺病毒载体的构建 | 第38-41页 |
·构建方法的分析 | 第38-39页 |
·构建结果的分析 | 第39-41页 |
5 结论 | 第41-42页 |
致谢 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-46页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第46页 |