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水禽细小病毒VP3蛋白表位鉴定及重组腺病毒载体构建

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
1 前言第11-17页
   ·水禽细小病毒概述第11页
   ·水禽细小病毒的特性第11-13页
     ·水禽细小病毒的理化性质第11页
     ·水禽细小病毒结构蛋白及其功能第11-12页
     ·水禽细小病的流行病学及临床症状第12页
     ·水禽细小病 VP3 基因疫苗的研究进展第12-13页
     ·GPV 抗原表位的研究进展第13页
   ·抗原表位的研究进展第13-14页
   ·应用噬菌体展示技术鉴定抗原表位第14页
   ·腺病毒载体研究进展第14-16页
     ·腺病毒载体的结构和功能第14-15页
     ·腺病毒载体的优势和缺陷第15页
     ·腺病毒载体的发展第15-16页
     ·腺病毒载体在疫苗研究中的应用第16页
   ·研究的目的与意义第16-17页
2 材料和方法第17-31页
   ·材料第17-19页
     ·载体、菌种及细胞第17页
     ·病毒第17页
     ·工具酶第17页
     ·主要试剂第17-18页
     ·抗体和主要耗材第18页
     ·引物设计软件第18页
     ·序列分析软件第18页
     ·主要仪器第18-19页
   ·GPV 结构蛋白 VP3 抗原表位的筛选鉴定第19-21页
     ·单抗的纯化第19页
     ·噬菌体表面展示肽库的生物淘选第19-20页
     ·噬菌斑的扩增和快速纯化第20-21页
     ·噬菌体 DNA 的序列测定第21页
     ·噬菌体 ELISA 检测第21页
   ·水禽细小病毒 VP3 蛋白重组腺病毒载体的构建第21-31页
     ·病毒 DNA 的提取第21页
     ·VP3 基因扩增引物的设计第21-22页
     ·VP3 基因的 PCR 扩增第22页
     ·PCR 产物的胶回收纯化第22-23页
     ·pMD18-T 载体克隆质粒的构建及鉴定第23-24页
     ·重组腺病毒穿梭转移载体构建以及鉴定第24-27页
     ·重组腺病毒质粒的构建及鉴定第27-29页
     ·转染 HEK-293 细胞包装重组腺病毒第29-30页
     ·重组腺病毒的鉴定第30-31页
3 结果第31-37页
   ·GPV 结构蛋白 VP3 抗原表位的筛选鉴定第31-32页
     ·单抗的纯化结果第31-32页
     ·噬菌体测序展示出的一致序列第32页
     ·65DYRFHH88为构象表位第32页
   ·水禽细小病毒 VP3 蛋白重组腺病毒载体的构建第32-37页
     ·GPV 和 MDPV VP3 基因的扩增第32-33页
     ·穿梭转移载体 ps-GPV-VP3 和 ps-MDPV-VP3 的鉴定第33-34页
     ·同源重组腺病毒 pAd-GPV-VP3 和 pAd-MDPV-VP3 的酶切鉴定第34页
     ·重组腺病毒转染 HEK-293 细胞第34-35页
     ·重组腺病毒表达鉴定第35-37页
4 讨论第37-41页
   ·鹅细小病毒 VP3 蛋白表位的鉴定第37-38页
     ·表位鉴定实验方法的分析第37页
     ·蛋白表位鉴定结果分析第37-38页
   ·水禽细小病毒 VP3 蛋白重组腺病毒载体的构建第38-41页
     ·构建方法的分析第38-39页
     ·构建结果的分析第39-41页
5 结论第41-42页
致谢第42-43页
参考文献第43-46页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第46页

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