摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
主要符号表 | 第5-6页 |
目录 | 第6-8页 |
文献综述 | 第8-17页 |
1 Ii 的分子结构 | 第8-9页 |
2 Ii 的功能 | 第9-11页 |
·作为 MHC-II 类分子的分子伴侣 | 第9-10页 |
·促进 B 细胞成熟 | 第10-11页 |
3 Ii 与疾病的关系 | 第11-13页 |
·Ii 与肿瘤疾病的关系 | 第11-12页 |
·Ii 与炎症的关系 | 第12-13页 |
·Ii 与自身免疫病的关系 | 第13页 |
·Ii 与其他疾病的关系 | 第13页 |
4 Ii 的应用 | 第13-15页 |
·作为一种新型的免疫载体 | 第14页 |
·免疫调节 | 第14-15页 |
·作为多种疾病的药物靶分子 | 第15页 |
5 国内外研究概况 | 第15页 |
6 研究目的与意义 | 第15-17页 |
引言 | 第17-18页 |
1 材料与方法 | 第18-29页 |
·质粒、工程菌和细胞株 | 第18页 |
·主要工具酶与试剂 | 第18页 |
·主要试剂的配制 | 第18-20页 |
·培养细菌所用试剂 | 第18-19页 |
·细胞培养所用试剂 | 第19-20页 |
·制备感受态细胞所用试剂 | 第20页 |
·琼脂糖凝胶电泳所用溶液 | 第20页 |
·主要仪器 | 第20页 |
·真核荧光表达载体 pEGFP-C1/Ii, pDsRed2-N1/Ii 的构建 | 第20-25页 |
·引物设计 | 第20-21页 |
·Ii 基因全长的 PCR 扩增 | 第21页 |
·PCR 产物的回收和纯化 | 第21-22页 |
·鸡 Ii 基因真核荧光表达质粒的构建 | 第22-25页 |
·稳定表达 Ii P815 细胞株的建立 | 第25-29页 |
·真核转染超纯质粒 DNA 的提取 | 第25-26页 |
·P815 细胞的复苏、传代及转染准备 | 第26页 |
·G418 工作浓度的确定 | 第26-27页 |
·脂质体介导的转染 | 第27页 |
·稳定表达 Ii P815 细胞株的 G418 筛选 | 第27页 |
·稳定表达 Ii P815 细胞株的 RT-PCR 鉴定 | 第27-29页 |
2 结果与分析 | 第29-38页 |
·鸡 Ii 基因 PCR 产物检测 | 第29页 |
·重组质粒 pEGFP-C1/Ii 的双酶切与 PCR 鉴定 | 第29页 |
·pEGFP-C1,pEGFP-C1/Ii 真核超纯质粒的检测 | 第29-30页 |
·不同物种 Ii 蛋白质序列同源性比较和进化树制作 | 第30-32页 |
·折叠识别方法预测不同物种 Ii 蛋白质结构 | 第32-33页 |
·WoLF PSORT Prediction 预测 Ii 细胞内定位特性 | 第33-34页 |
·瞬时转染 COS7 细胞荧光观察 | 第34-35页 |
·G418 筛选工作浓度确定 | 第35页 |
·稳定阳性克隆株 P815-GFP-Ii RT-PCR 结果 | 第35-36页 |
·荧光显微镜下 P815-GFP-Ii 的 Ii 表达与定位情况 | 第36页 |
·P815-GFP-Ii 细胞株稳定性的鉴定结果 | 第36-38页 |
3 讨论 | 第38-43页 |
·重组质粒的构建与鉴定 | 第38-39页 |
·Ii 基因片段的获取 | 第38-39页 |
·阳性重组质粒的鉴定 | 第39页 |
·P815 细胞的冻存与复苏 | 第39-40页 |
·真核重组质粒稳定转染 | 第40-41页 |
·P815-GFP-Ii 细胞株的 RT-PCR 检测 | 第41页 |
·鸡 Ii 基因生物信息学分析 | 第41-42页 |
·应用 P815-GFP-Ii 的展望 | 第42-43页 |
4 结论 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
作者简介 | 第52页 |