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海南黄灯笼辣椒病毒病病原学及RNAi防控策略研究

摘要第1-7页
Abstract第7-10页
目录第10-13页
1 序言第13-31页
   ·海南黄灯笼辣椒生产现状及存在的主要问题第13-14页
   ·国内外辣椒病毒病研究概况第14-17页
   ·植物病毒复合侵染及其病原病毒的相互作用方式第17-19页
     ·植物病毒的复合侵染第17页
     ·复合侵染中病毒的相互作用方式第17-19页
   ·植物病毒检测及鉴定技术评述第19-21页
   ·Potyvirus病毒及其变异进化第21-25页
     ·Potyvirus病毒基因组及基因功能研究进展第21-22页
     ·Potyvirus病毒的变异和分类第22-23页
     ·辣椒脉斑驳病毒第23-25页
   ·黄瓜花叶病毒的危害及其变异进化第25-27页
   ·植物病毒病防治研究现状与进展第27-31页
2 研究内容和技术路线第31-33页
   ·研究内容第31-32页
   ·技术路线第32-33页
3 材料与方法第33-55页
   ·材料第33-35页
     ·毒源样品第33-34页
     ·试剂第34-35页
     ·仪器设备第35页
   ·方法第35-55页
     ·田间调查第35-37页
     ·海南黄灯笼辣椒病毒病的病原鉴定第37-45页
       ·样品第37页
       ·病毒粒子电镜观察第37-38页
       ·病毒外壳蛋白的SDS-PAGE分析第38-39页
       ·病毒外壳蛋白的质谱分析鉴定第39页
       ·基于病毒核酸测序的分子鉴定第39-45页
     ·ChiRSV检测方法的建立及应用第45-49页
       ·ChiRSV多克隆抗体的制备及ID-ELISA检测方法的建立第45-47页
       ·ChiRSV RT-PCR检测方法的建立第47-49页
     ·海南黄灯笼辣椒田间样品病毒种类的随机检测第49页
     ·基于RNAi沉默技术的dsRNA防控ChiRSV的探索第49-55页
       ·dsRNA细菌表达载体的构建第49-53页
       ·dsRNA细菌表达载体的诱导表达第53页
       ·dsRNA的提取第53-54页
       ·dsRNA重组细菌的超声波破碎第54页
       ·dsRNA及重组细菌碎液干扰ChiRSV侵染的初步试验第54-55页
4 结果与分析第55-86页
   ·黄灯笼辣椒病毒病的田间调查第55-58页
     ·海南黄灯笼辣椒病毒病的症状类型第55-56页
     ·海南黄灯笼辣椒病毒病的发病条件第56-58页
   ·病原病毒鉴定结果第58-74页
     ·叶脉绿带症状黄灯笼辣椒(YZ样品)的鉴定第58-65页
       ·YZ样品病毒形态学鉴定第58页
       ·YZ样品病毒分离物外壳蛋白SDS-PAGE的分离第58-59页
       ·YZ样品质谱分析鉴定第59-62页
       ·YZ样品基于病毒核酸测序的分子鉴定第62页
       ·YZ样品病毒分离物的鉴定结论第62-65页
     ·畸形扭曲症状黄灯笼辣椒(WC样品)的鉴定第65-71页
       ·WC样品形态学鉴定第65页
       ·WC样品病毒分离物外壳蛋白SDS-PAGE的分离第65-66页
       ·WC样品质谱分析鉴定第66-69页
       ·WC样品基于病毒核酸测序的分子鉴定第69页
       ·WC样品的鉴定结论第69-71页
     ·蚀纹症状黄灯笼辣椒(CS样品)的鉴定第71-74页
       ·CS样品病毒形态学鉴定第71页
       ·CS样品基于病毒核酸测序的分子鉴定第71-74页
       ·CS样品的鉴定结论第74页
   ·黄灯笼辣椒病原病毒检测方法的建立及应用第74-80页
     ·ChiRSV多克隆抗体的制备和ID-ELISA检测方法的建立第74-76页
     ·ChiRSV RT-PCR检测方法的建立第76-79页
       ·引物筛选和PCR反应体系和程序第76-77页
       ·ChiRSV的RT-PCR检测灵敏度测定第77-78页
       ·ChiRSV的RT-PCR检测方法的应用第78-79页
     ·海南黄灯笼辣椒田间样品的抽样检测结果及分析第79-80页
   ·基于RNAi沉默的dsRNA防控ChiRSV探索第80-85页
     ·dsRNA细菌表达载体的构建第80-83页
     ·重组菌的诱导培养和dsRNA的提取第83-84页
     ·dsRNA及其细菌破碎液阻止ChiRSV侵染的初步效果第84-85页
   ·综合防治技术要点第85-86页
5 讨论第86-93页
   ·黄灯笼辣椒病毒病的病毒种类十分复杂第86-90页
   ·利用dsRNA阻止病毒侵染的实际作用及讨论第90-91页
   ·质谱辅助分析在植物病毒鉴定中的作用第91-93页
6 结论第93-94页
参考文献第94-104页
攻读博士期间发表的相关论文第104-105页
攻读博士期间承担的科研任务及获得的成果第105-106页
致谢第106页

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