RepSox诱导牛成纤维细胞向脂肪细胞分化的研究
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-10页 |
| 1 引言 | 第10-21页 |
| ·脂肪细胞的功能 | 第10-11页 |
| ·脂肪细胞与疾病的关系 | 第10页 |
| ·脂肪细胞在种子工程及能量代谢中的作用 | 第10-11页 |
| ·脂肪细胞的发育分化 | 第11-13页 |
| ·脂肪细胞的起源 | 第11-12页 |
| ·脂肪细胞的生物学特点 | 第12页 |
| ·脂肪细胞分化的转录因子 | 第12-13页 |
| ·成纤维细胞的生物学特性 | 第13-14页 |
| ·成纤维细胞的编程潜能 | 第13-14页 |
| ·成纤维细胞的编程 | 第14页 |
| ·组蛋白修饰与细胞编程 | 第14-16页 |
| ·组蛋白乙酰化 | 第14-15页 |
| ·组蛋白甲基化 | 第15-16页 |
| ·组蛋白磷酸化 | 第16页 |
| ·提高体细胞全能性的方法与手段 | 第16-18页 |
| ·化合物丙戊酸的添加 | 第17页 |
| ·化合物Reversin的添加 | 第17页 |
| ·小分子化合物RepSox的添加 | 第17-18页 |
| ·BMP通路与脂肪细胞形成 | 第18-21页 |
| 2 探讨RepSox处理荷斯坦牛成纤维细胞条件 | 第21-32页 |
| ·实验材料 | 第21-23页 |
| ·实验对象 | 第21页 |
| ·仪器设备和耗材 | 第21-22页 |
| ·主要实验试剂 | 第22页 |
| ·主要实验试剂配置方法 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-26页 |
| ·荷斯坦牛成纤维细胞的复苏与传代 | 第23-24页 |
| ·不同浓度RepSox处理细胞 | 第24页 |
| ·RT-PCR检测 | 第24-26页 |
| ·流式细胞仪定量检测细胞smadl水平 | 第26页 |
| ·检测细胞微丝骨架 | 第26页 |
| ·结果 | 第26-30页 |
| ·不同浓度RepSox对细胞形态的影响 | 第26-28页 |
| ·RT-PCR检测BMP通路主要基因表达情况 | 第28-29页 |
| ·流式细胞仪定量检测smadl表达情况 | 第29-30页 |
| ·RepSox对细胞骨架—微丝的影响 | 第30页 |
| ·讨论 | 第30-31页 |
| ·不同条件RepSox对细胞形态的影响 | 第30-31页 |
| ·不同条件RepSox对细胞BMP通路的启动作用 | 第31页 |
| ·小结 | 第31-32页 |
| 3 RepSox处理后细胞生物学特性的变化 | 第32-43页 |
| ·实验材料 | 第32-33页 |
| ·实验对象 | 第32页 |
| ·仪器设备和耗材 | 第32页 |
| ·主要实验试剂 | 第32页 |
| ·主要实验试剂配置方法 | 第32-33页 |
| ·实验方法 | 第33-35页 |
| ·核型分析 | 第33-34页 |
| ·细胞周期检测 | 第34页 |
| ·细胞凋亡检测 | 第34页 |
| ·间接免疫荧光检测 | 第34-35页 |
| ·流式细胞仪定量检测细胞抗体水平 | 第35页 |
| ·结果 | 第35-41页 |
| ·核型分析 | 第35页 |
| ·细胞周期检测 | 第35-36页 |
| ·RepSox对细胞增殖能力的影响 | 第36-37页 |
| ·细胞凋亡检测 | 第37页 |
| ·细胞组蛋白修饰水平变化 | 第37-41页 |
| ·讨论 | 第41-42页 |
| ·RepSox对细胞活力的影响 | 第41-42页 |
| ·表观遗传修饰水平对细胞重编程能力的影响 | 第42页 |
| ·小结 | 第42-43页 |
| 4 RepSox诱导成纤维细胞向脂肪细胞分化 | 第43-54页 |
| ·实验材料 | 第43-44页 |
| ·实验对象 | 第43页 |
| ·仪器设备和耗材 | 第43页 |
| ·主要实验试剂 | 第43页 |
| ·主要实验试剂配置方法 | 第43-44页 |
| ·实验方法 | 第44-46页 |
| ·脂肪细胞诱导分化及油红0染色鉴定 | 第44页 |
| ·细胞计数 | 第44页 |
| ·RT-PCR检测 | 第44-45页 |
| ·间接免疫荧光检测 | 第45-46页 |
| ·流式细胞仪定量检测细胞抗体水平 | 第46页 |
| ·结果 | 第46-53页 |
| ·成脂诱导 | 第46-48页 |
| ·RT-PCR检测 | 第48-50页 |
| ·RepSox对细胞P-Smad3水平的影响 | 第50-53页 |
| ·讨论 | 第53-54页 |
| ·成脂诱导分化 | 第53页 |
| ·RepSox对细胞BMP通路水平的影响 | 第53-54页 |
| ·小结 | 第54页 |
| 5 全文总结 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-63页 |
| 作者简介 | 第63页 |
