| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-10页 |
| 1 引言 | 第10-14页 |
| ·黄酮类化合物及其作用 | 第10页 |
| ·木质素途径及其作用 | 第10-11页 |
| ·肉桂酸-4-羟基化酶的研究进展 | 第11-13页 |
| ·研究目的和意义 | 第13-14页 |
| 2 柠条锦鸡儿肉桂酸-4-羟基化酶(CkC4H)基因全长克隆及生物信息学分析 | 第14-33页 |
| ·试验材料 | 第14-15页 |
| ·植物材料 | 第14页 |
| ·菌种 | 第14页 |
| ·试剂 | 第14页 |
| ·引物设计 | 第14-15页 |
| ·实验方法 | 第15-22页 |
| ·柠条锦鸡儿在营养土中的培养 | 第15页 |
| ·茎中RNA的提取及其DNA的去除 | 第15-16页 |
| ·提取叶片基因组DNA | 第16页 |
| ·克隆CkC4H基因的中间片段 | 第16-18页 |
| ·CkC4H基因的cDNA 3’RACE | 第18-19页 |
| ·CkC4H基因的cDNA 5’RACE | 第19页 |
| ·克隆CkC4H基因的cDNA全长 | 第19-20页 |
| ·克隆CkC4H基因的DNA全长 | 第20-21页 |
| ·柠条锦鸡儿CkC4H基因的生物信息学分析 | 第21-22页 |
| ·结果与分析 | 第22-33页 |
| ·RNA的电泳检测 | 第22页 |
| ·CkC4H中间片段的克隆结果 | 第22页 |
| ·CkC4H中间片段的测序结果分析 | 第22-23页 |
| ·CkC4H基因3’RACE结果 | 第23-24页 |
| ·CkC4H基因5’RACE结果 | 第24页 |
| ·CkC4H基因cDNA全长克隆结果 | 第24-25页 |
| ·CkC4H基因DNA全长克隆结果 | 第25页 |
| ·CkC4H核苷酸序列分析结果 | 第25-29页 |
| ·CkC4H氨基酸序列的分析结果 | 第29-33页 |
| 3 柠条锦鸡儿不同组织部位及创伤条件下CkC4H基因表达量的检测 | 第33-37页 |
| ·实验材料 | 第33-34页 |
| ·植物材料 | 第33-34页 |
| ·实验试剂 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-37页 |
| ·植物在营养土中的培养及样品处理 | 第34页 |
| ·柠条锦鸡儿RNA提取及其DNA的去除 | 第34-35页 |
| ·反转录反应 | 第35-36页 |
| ·qRT-PCR反应 | 第36-37页 |
| ·结果与分析 | 第37页 |
| ·柠条锦鸡儿不同组织部位CkC4H基因的表达量检测 | 第37页 |
| ·柠条锦鸡儿地上部分创伤后CkC4H基因的表达量变化 | 第37页 |
| 4 筛选CkC4H基因过表达转基因纯合体 | 第37-45页 |
| ·实验材料 | 第37-38页 |
| ·植物材料 | 第37-38页 |
| ·试剂 | 第38页 |
| ·菌种及载体 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-43页 |
| ·拟南芥在营养土中的培养 | 第38页 |
| ·拟南芥在植物培养基中的无菌培养 | 第38-39页 |
| ·构建CkC4H基因过表达双元载体 | 第39-40页 |
| ·植物过表达双元载体的农杆菌转化 | 第40页 |
| ·35S：：CkC4H过表达拟南芥的获得及纯合体株系的筛选 | 第40-41页 |
| ·转基因纯合体植株的分子鉴定 | 第41-43页 |
| ·结果与分析 | 第43-45页 |
| ·柠条锦鸡儿CkC4H基因过表达载体35S：：CkC4H的构建 | 第43页 |
| ·表达载体35S：：CkC4H转化农杆菌 | 第43-44页 |
| ·筛选35S：：CkC4H转基因植株 | 第44页 |
| ·转基因纯合体植株C4H基因转录水平的gRT-PCR检测 | 第44-45页 |
| 5 讨论与结论 | 第45-49页 |
| ·讨论 | 第45-48页 |
| ·柠条锦鸡儿CkC4H的基因克隆与生物信息学分析 | 第45-47页 |
| ·柠条锦鸡儿CkC4H基因不同组织部位表达量检测 | 第47页 |
| ·创伤条件下柠条锦鸡儿CkC4H基因不同组织部位表达量检测 | 第47页 |
| ·35S：：CkC4H过表达转基因纯合体的获得 | 第47-48页 |
| ·结论 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 作者简介 | 第55页 |
