| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 符号说明 | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-28页 |
| 1 植物转录因子 | 第8-15页 |
| ·植物转录因子概述 | 第8页 |
| ·转录因子的结构 | 第8-12页 |
| ·DNA结合结构域 | 第8-11页 |
| ·核定位信号 | 第11页 |
| ·寡聚化位 | 第11-12页 |
| ·转录调控结构域 | 第12页 |
| ·转录因子的分类 | 第12-13页 |
| ·植物转录因子与非生物胁迫的关系 | 第13-15页 |
| 2 WRKY转录因子 | 第15-21页 |
| ·WRKY转录因子概述 | 第15页 |
| ·WRKY转录因子结构特征 | 第15-17页 |
| ·WRKY转录因子的分类 | 第17-18页 |
| ·WRKY转录因子的功能 | 第18-21页 |
| ·参与植物的生物逆境胁迫应答 | 第18-19页 |
| ·参与植物的非生物逆境胁迫应答 | 第19-20页 |
| ·参与植物的生长发育 | 第20-21页 |
| ·参与植物的物质代谢 | 第21页 |
| 3 电子克隆技术 | 第21-26页 |
| ·诞生背景 | 第21-23页 |
| ·电子克隆的实施策略 | 第23-24页 |
| ·利用EST数据库信息实施电子克隆 | 第23页 |
| ·利用基因组数据库信息实施电子克隆 | 第23-24页 |
| ·在植物新基因克隆中的应用 | 第24-25页 |
| ·存在问题及应用前景 | 第25-26页 |
| 4 本研究的目的意义及内容 | 第26-28页 |
| 第二章 ZmWRKY33的克隆和表达谱分析 | 第28-53页 |
| 1 前言 | 第28页 |
| 2 材料与方法 | 第28-39页 |
| ·材料 | 第28-29页 |
| ·植物材料 | 第28页 |
| ·化学试剂、酶制剂及试剂盒 | 第28-29页 |
| ·方法 | 第29-39页 |
| ·目的基因的电子克隆 | 第29-30页 |
| ·目的基因的生物信息学分析 | 第30页 |
| ·从基因组DNA中克隆目的基因 | 第30-34页 |
| ·玉米基因组DNA的提取 | 第30-31页 |
| ·目的基因的PCR扩增 | 第31-32页 |
| ·扩增产物的纯化 | 第32页 |
| ·连接反应 | 第32-33页 |
| ·感受态细胞的制备及转化 | 第33-34页 |
| ·从cDNA中克隆目的基因 | 第34-37页 |
| ·玉米植株总RNA的提取 | 第34-36页 |
| ·cDNA的合成 | 第36-37页 |
| ·目的基因的RT-PCR扩增 | 第37页 |
| ·植物材料处理 | 第37页 |
| ·实时荧光定量PCR分析表达谱 | 第37-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-50页 |
| ·玉米基因ZmWRKY33的克隆 | 第39-41页 |
| ·玉米基因ZmWRKY33的序列分析 | 第41-44页 |
| ·玉米基因ZmWRKY33的基因组结构 | 第44-45页 |
| ·玉米基因ZmWRKY33的表达模式分析 | 第45-50页 |
| ·在玉米不同组织中的表达模式 | 第45-46页 |
| ·ZmWRKY33在激素诱导下的表达模式 | 第46-47页 |
| ·ZmWRKY33在非生物胁迫诱导下的表达模式 | 第47-50页 |
| 4 讨论 | 第50-53页 |
| 第三章 ZmWRKY33在转基因拟南芥中的功能分析 | 第53-67页 |
| 1 前言 | 第53页 |
| 2 材料与方法 | 第53-56页 |
| ·植物材料 | 第53页 |
| ·细菌菌株和质粒 | 第53-54页 |
| ·化学试剂和酶制剂 | 第54页 |
| ·方法 | 第54-56页 |
| ·含ZmWRKY33的农杆菌双元载体的构建 | 第54页 |
| ·电击法转化农杆菌 | 第54页 |
| ·拟南芥转化 | 第54-56页 |
| ·拟南芥的培养 | 第54-55页 |
| ·农杆菌的准备 | 第55页 |
| ·蘸花法转化拟南芥 | 第55页 |
| ·拟南芥转化种子的筛选 | 第55-56页 |
| ·转基因阳性植株的检测 | 第56页 |
| ·拟南芥转基因植株的功能分析 | 第56页 |
| 3 结果与分析 | 第56-63页 |
| ·ZmWRKY33农杆菌转化双元载体的构建 | 第56-58页 |
| ·拟南芥转基因阳性植株的鉴定 | 第58-59页 |
| ·拟南芥转基因植株对盐胁迫的反应 | 第59-63页 |
| 4 讨论 | 第63-67页 |
| 参考文献 | 第67-73页 |
| 附录 各类试剂的配制 | 第73-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |