| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-32页 |
| 1 CASPASE研究进展 | 第14-25页 |
| ·细胞凋亡概念 | 第14页 |
| ·caspase的特征与分类 | 第14-16页 |
| ·caspases的激活机制 | 第16-17页 |
| ·caspases的级联反应途径 | 第17-19页 |
| ·caspase的调控 | 第19-20页 |
| ·caspase家族成员研究进展 | 第20-23页 |
| ·昆虫caspase研究概况 | 第23-25页 |
| ·昆虫caspase特征与分类 | 第23-24页 |
| ·昆虫caspase的调控 | 第24-25页 |
| ·昆虫与哺乳动物细胞凋亡途径比较 | 第25页 |
| 2 温度对细胞凋亡的影响 | 第25-26页 |
| 3 热休克蛋白(HSP)研究概况 | 第26-29页 |
| ·HSP70基因特征与分类 | 第27页 |
| ·HSP70基因调控 | 第27-28页 |
| ·HSP70的生物学功能 | 第28页 |
| ·昆虫HSP70概况 | 第28-29页 |
| 4 小菜蛾抗药性研究进展 | 第29-30页 |
| ·小菜蛾抗药性研究现状 | 第29-30页 |
| ·温度对小菜蛾抗药性的影响 | 第30页 |
| 5 本研究的目的意义 | 第30-32页 |
| 第二章 小菜蛾PX-CASPASE-1基因克隆及热激表达研究 | 第32-71页 |
| 1 材料与方法 | 第32-47页 |
| ·实验材料 | 第32-34页 |
| ·供试虫源 | 第32页 |
| ·高温对成虫的预处理 | 第32-33页 |
| ·生化试剂 | 第33页 |
| ·主要仪器设备 | 第33-34页 |
| ·药品配制 | 第34页 |
| ·Px-caspase-1基因中间片段克隆 | 第34-39页 |
| ·引物设计 | 第34-35页 |
| ·提取总RNA | 第35-36页 |
| ·中间片段克隆 | 第36-39页 |
| ·RACE | 第39-42页 |
| ·设计RACE引物 | 第39-40页 |
| ·cDNA第一链合成 | 第40-41页 |
| ·巢式PCR | 第41-42页 |
| ·扩增Px-caspase-1基因ORF及序列分析 | 第42页 |
| ·Px-caspase-1 m RNA表达量测定 | 第42-45页 |
| ·荧光定量引物设计 | 第43-44页 |
| ·制作内参基因与目的基因标准曲线 | 第44-45页 |
| ·不同温度处理抗性小菜蛾Px-caspase-1mRNA表达量差异的测定 | 第45页 |
| ·抗、感小菜蛾Px-caspase-1mRNA表达量差异的测定 | 第45页 |
| ·起始caspase-9和效应caspase-3蛋白酶活力测定 | 第45-47页 |
| ·制作蛋白质标准曲线 | 第45-46页 |
| ·制作pNA标准曲线 | 第46页 |
| ·不同高温处理时caspase-9和caspase-3酶活力测定 | 第46-47页 |
| ·数据处理 | 第47页 |
| 2 结果与分析 | 第47-66页 |
| ·高温对成虫的预处理 | 第47-48页 |
| ·Px-caspase-1基因克隆及序列分析 | 第48-56页 |
| ·Px-caspase-1中间片段的克隆 | 第48-49页 |
| ·Px-caspase-1基因RACE | 第49-51页 |
| ·Px-caspase-1ORF的克隆 | 第51-53页 |
| ·Px-caspase-1基因序列分析 | 第53-56页 |
| ·小菜蛾Px-caspase-1基因表达 | 第56-60页 |
| ·制作内参基因与目的基因标准曲线 | 第56-57页 |
| ·不同温度处理抗性小菜蛾Px-caspase-1mRNA表达量差异的测定 | 第57-59页 |
| ·抗、感小菜蛾Px-caspase-1 mRNA表达量差异测定 | 第59-60页 |
| ·起始caspase-9和效应caspase-3酶活力测定 | 第60-66页 |
| ·蛋白质浓度标准曲线 | 第60-61页 |
| ·pNA标准曲线 | 第61页 |
| ·不同高温处理时caspase-9和caspase-3酶活力测定 | 第61-66页 |
| 3 讨论 | 第66-70页 |
| ·Px-caspase-1基因克隆 | 第66-67页 |
| ·高温的选择 | 第67页 |
| ·不同高温对Px-caspase-1 mRNA表达的影响 | 第67-69页 |
| ·不同高温对caspase-9和caspase-3酶活力的影响 | 第69-70页 |
| 4 结论 | 第70-71页 |
| 第三章 小菜蛾PX-HSP70基因克隆及热激表达研究 | 第71-83页 |
| 1 材料与方法 | 第71-73页 |
| ·虫源及温度预处理方法 | 第71页 |
| ·药品试剂仪器 | 第71页 |
| ·克隆Px-hsp70基因 | 第71-73页 |
| ·设计RACE引物 | 第71-72页 |
| ·RACE | 第72页 |
| ·Px-hsp70全长序列分析 | 第72-73页 |
| ·Px-hsp70 mRNA表达量测定 | 第73页 |
| ·设计qPCR引物 | 第73页 |
| ·抗、感小菜蛾幼虫及成虫的Px-hsp70表达量比较 | 第73页 |
| ·数据处理 | 第73页 |
| 2 结果与分析 | 第73-81页 |
| ·Px-hsp70 RACE | 第73-75页 |
| ·Px-hsp70全长序列分析 | 第75-79页 |
| ·抗、感小菜蛾幼虫及成虫的Px-hsp70 mRNA表达量比较 | 第79-81页 |
| ·内参基因与目的基因标准曲线 | 第79页 |
| ·抗、感小菜蛾幼虫及成虫的Px-hsp70 mRNA表达 | 第79-81页 |
| 3 讨论 | 第81页 |
| ·Px-hsp70基因克隆 | 第81页 |
| ·抗、感小菜蛾Px-hsp70 mRNA的热激表达差异 | 第81页 |
| 4 结论 | 第81-83页 |
| 第四章 温度对小菜蛾抗药性水平的影响 | 第83-88页 |
| 1 材料与方法 | 第83-84页 |
| ·供试虫源 | 第83页 |
| ·生物测定 | 第83-84页 |
| ·温度对小菜蛾后代抗性水平变化的影响 | 第84页 |
| ·数据处理 | 第84页 |
| 2 结果与分析 | 第84-85页 |
| ·小菜蛾抗药性临测 | 第84页 |
| ·温度对小菜蛾后代抗性水平变化的影响 | 第84-85页 |
| 3 讨论 | 第85-86页 |
| 4 结论 | 第86-88页 |
| 存在问题与展望 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-100页 |
| 致谢 | 第100-101页 |
| 在读期间发表的文章及参与的课题 | 第101页 |
