| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 本文所用英文缩略词表 | 第11-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-26页 |
| ·核酸适体和 SELEX 技术 | 第12-13页 |
| ·核酸适体的特点 | 第12页 |
| ·SELEX 技术概述及原理 | 第12-13页 |
| ·SELEX 技术的发展 | 第13-22页 |
| ·目标选取及文库设计 | 第14-15页 |
| ·文库与核酸-目标复合物分离方法 | 第15-19页 |
| ·单链文库制备方法 | 第19-21页 |
| ·获取目标序列的方法 | 第21-22页 |
| ·基于微珠的微流控芯片在分离中的应用 | 第22-25页 |
| ·借助磁场-磁珠的分离 | 第22-23页 |
| ·借助介电泳的分离 | 第23页 |
| ·借助光镊效应的分离 | 第23-24页 |
| ·借助超声交互作用力的分离 | 第24页 |
| ·障碍物引起的分离 | 第24-25页 |
| ·本论文拟开展的工作 | 第25-26页 |
| 第2章 基于微珠固定的微流控芯片的肌红蛋白特异性核酸适体的筛选 | 第26-41页 |
| ·前言 | 第26页 |
| ·实验部分 | 第26-33页 |
| ·试剂与仪器 | 第26-29页 |
| ·溶液的配制 | 第29页 |
| ·微流控芯片的设计和制作 | 第29-30页 |
| ·聚苯乙烯微珠的修饰 | 第30页 |
| ·筛选装置的构建 | 第30-31页 |
| ·肌红蛋白核酸适体的筛选 | 第31-32页 |
| ·克隆和测序 | 第32页 |
| ·富集文库及序列亲和力的考察 | 第32-33页 |
| ·序列特异性考察 | 第33页 |
| ·结果与讨论 | 第33-40页 |
| ·筛选流程 | 第33-34页 |
| ·微珠上蛋白修饰密度的测定 | 第34页 |
| ·微珠捕获序列可行性考察 | 第34-35页 |
| ·PCR 条件的优化 | 第35-36页 |
| ·筛选富集情况及富集文库亲和力的测定 | 第36-37页 |
| ·序列比对分析 | 第37-39页 |
| ·序列特异性考察 | 第39-40页 |
| ·小结 | 第40-41页 |
| 第3章 正反筛单元集成的微流控芯片用于肌红蛋白特异性核酸适体的筛选 | 第41-55页 |
| ·前言 | 第41页 |
| ·实验部分 | 第41-46页 |
| ·试剂与仪器 | 第41-42页 |
| ·微流控芯片的设计和制作 | 第42-43页 |
| ·聚苯乙烯微珠的修饰 | 第43页 |
| ·筛选装置的构建 | 第43-44页 |
| ·肌红蛋白核酸适体的筛选 | 第44页 |
| ·克隆和测序 | 第44-45页 |
| ·富集文库亲和力的考察 | 第45页 |
| ·序列亲和力测定 | 第45页 |
| ·序列特异性考察 | 第45-46页 |
| ·结果与讨论 | 第46-54页 |
| ·筛选流程 | 第46页 |
| ·PCR 条件的优化 | 第46-48页 |
| ·筛选富集情况及富集文库亲和力测定 | 第48-49页 |
| ·序列比对分析及亲和力测定 | 第49-51页 |
| ·序列二级结构分析及序列优化 | 第51-52页 |
| ·固定序列法考察序列的亲和力 | 第52-53页 |
| ·序列特异性考察 | 第53页 |
| ·不同序列与肌红蛋白结合位点的初步考察 | 第53-54页 |
| ·小结 | 第54-55页 |
| 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-65页 |
| 附录 A 攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |