摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-11页 |
文献综述 | 第11-21页 |
第一章 卵母细胞减数分裂调控 | 第11-18页 |
·卵母细胞第一次减数分裂前期的调控 | 第12-14页 |
·卵母细胞第一次减数分裂中、后期的调控 | 第14-15页 |
·卵母细胞第二次减数分裂的调控 | 第15-18页 |
第二章 H1FOO 的分子结构与功能 | 第18-21页 |
·H1foo 的分子结构 | 第18-19页 |
·H1foo 的表达特点 | 第19页 |
·H1foo 的功能 | 第19-21页 |
试验研究 | 第21-49页 |
第三章 猪 H1FOO 基因的克隆与真核表达载体的构建 | 第21-38页 |
·仪器和试剂 | 第21-22页 |
·主要仪器 | 第21-22页 |
·主要试剂及溶液配制 | 第22页 |
·方法 | 第22-28页 |
·猪卵巢的收集与运输 | 第22页 |
·卵母细胞的采集、培养 | 第22-23页 |
·GV 期 COCs 卵丘颗粒细胞的去除 | 第23页 |
·Trizol 法提取猪卵母细胞的总 RNA | 第23页 |
·H1foo 基因 5′端的克隆 | 第23-25页 |
·猪 H1foo 基因全长 CDS 区的克隆 | 第25-26页 |
·序列分析 | 第26页 |
·真核表达载体 pVenus-H1foo 的构建 | 第26页 |
·重组质粒 pVenus-H1foo 与空载体 pVenus 转染 Hela 细胞 | 第26页 |
·利用 RT-PCR 鉴定 H1foo 在 Hela 细胞内的表达 | 第26-27页 |
·体外转录 | 第27-28页 |
·观察克隆的 H1foo 在卵内的表达 | 第28页 |
·结果与分析 | 第28-36页 |
·猪 H1foo 基因 5′端克隆 | 第28-29页 |
·猪 H1foo 基因 CDS 区克隆 | 第29页 |
·序列分析 | 第29-31页 |
·双酶切鉴定 pVenus-H1foo 真核表达载体 | 第31-32页 |
·重组质粒 pVenus-H1foo 在 Hela 细胞中的表达与定位 | 第32-33页 |
·RT-PCR 方法分析鉴定 pVenus-H1foo 重组质粒的表达情况 | 第33-34页 |
·观察 H1foo 在猪卵母细胞内的表达、定位 | 第34-36页 |
·讨论 | 第36-37页 |
·小结 | 第37-38页 |
第四章 H1FOO 在卵母细胞成熟过程中的作用 | 第38-49页 |
·材料和方法 | 第39-41页 |
·仪器设备 | 第39页 |
·主要试剂 | 第39页 |
·实验方法 | 第39-41页 |
·结果与分析 | 第41-47页 |
·体外发育不同阶段猪卵与胚胎中 H1foo mRNA 的表达情况 | 第41页 |
·超表达 H1foo 对卵母细胞第一极体排出的影响 | 第41-42页 |
·干扰 H1foo 对卵母细胞第一极体排出的影响 | 第42-47页 |
·讨论 | 第47-48页 |
·小结 | 第48-49页 |
结论 | 第49-50页 |
本研究的创新点与进一步研究的课题 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
作者简介 | 第59页 |