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猪H1foo基因的克隆及其在卵母细胞成熟中作用的初步研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-11页
文献综述第11-21页
 第一章 卵母细胞减数分裂调控第11-18页
   ·卵母细胞第一次减数分裂前期的调控第12-14页
   ·卵母细胞第一次减数分裂中、后期的调控第14-15页
   ·卵母细胞第二次减数分裂的调控第15-18页
 第二章 H1FOO 的分子结构与功能第18-21页
   ·H1foo 的分子结构第18-19页
   ·H1foo 的表达特点第19页
   ·H1foo 的功能第19-21页
试验研究第21-49页
 第三章 猪 H1FOO 基因的克隆与真核表达载体的构建第21-38页
   ·仪器和试剂第21-22页
     ·主要仪器第21-22页
     ·主要试剂及溶液配制第22页
   ·方法第22-28页
     ·猪卵巢的收集与运输第22页
     ·卵母细胞的采集、培养第22-23页
     ·GV 期 COCs 卵丘颗粒细胞的去除第23页
     ·Trizol 法提取猪卵母细胞的总 RNA第23页
     ·H1foo 基因 5′端的克隆第23-25页
     ·猪 H1foo 基因全长 CDS 区的克隆第25-26页
     ·序列分析第26页
     ·真核表达载体 pVenus-H1foo 的构建第26页
     ·重组质粒 pVenus-H1foo 与空载体 pVenus 转染 Hela 细胞第26页
     ·利用 RT-PCR 鉴定 H1foo 在 Hela 细胞内的表达第26-27页
     ·体外转录第27-28页
     ·观察克隆的 H1foo 在卵内的表达第28页
   ·结果与分析第28-36页
     ·猪 H1foo 基因 5′端克隆第28-29页
     ·猪 H1foo 基因 CDS 区克隆第29页
     ·序列分析第29-31页
     ·双酶切鉴定 pVenus-H1foo 真核表达载体第31-32页
     ·重组质粒 pVenus-H1foo 在 Hela 细胞中的表达与定位第32-33页
     ·RT-PCR 方法分析鉴定 pVenus-H1foo 重组质粒的表达情况第33-34页
     ·观察 H1foo 在猪卵母细胞内的表达、定位第34-36页
   ·讨论第36-37页
   ·小结第37-38页
 第四章 H1FOO 在卵母细胞成熟过程中的作用第38-49页
   ·材料和方法第39-41页
     ·仪器设备第39页
     ·主要试剂第39页
     ·实验方法第39-41页
   ·结果与分析第41-47页
     ·体外发育不同阶段猪卵与胚胎中 H1foo mRNA 的表达情况第41页
     ·超表达 H1foo 对卵母细胞第一极体排出的影响第41-42页
     ·干扰 H1foo 对卵母细胞第一极体排出的影响第42-47页
   ·讨论第47-48页
   ·小结第48-49页
结论第49-50页
本研究的创新点与进一步研究的课题第50-51页
参考文献第51-58页
致谢第58-59页
作者简介第59页

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