摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-12页 |
缩略词表 | 第12-13页 |
第一章 绪论 | 第13-31页 |
1 植物先天免疫系统 | 第13-17页 |
·微生物/病原相关分子模式 | 第15页 |
·R基因介导的抗性反应 | 第15-17页 |
2 植物R基因的克隆策略 | 第17-19页 |
·图位克隆 | 第18页 |
·转座子标签技术 | 第18页 |
·T-DNA标签技术 | 第18-19页 |
·RNA水平上的差别表达基因克隆法 | 第19页 |
3 RecA蛋白介导的野生稻R基因富集文库的构建 | 第19-21页 |
·常用R基因克隆策略在野生稻基因克隆方面的局限性 | 第19-20页 |
·RecA蛋白介导的富集文库的构建和应用 | 第20-21页 |
4 hpRNA介导的基因沉默突变体库的构建 | 第21-24页 |
·基因沉默技术的研究进展 | 第21-23页 |
·hpRNA文库的构建 | 第23-24页 |
5 水稻驯化基因的研究进展 | 第24-25页 |
6 水稻白叶枯、稻瘟病和细菌性条斑病的研究 | 第25-29页 |
·水稻白叶枯病的症状 | 第25-26页 |
·水稻白叶枯病的病原菌及R基因鉴定 | 第26-27页 |
·水稻稻瘟病的症状及发生 | 第27-28页 |
·水稻稻瘟病病原菌的生理小种及R基因鉴定 | 第28页 |
·水稻细菌性条斑病的症状及发生 | 第28-29页 |
·水稻细菌性条斑病病原菌的生理小种及R基因鉴定 | 第29页 |
7 研究目的和意义 | 第29-31页 |
第二章 候选R基因富集文库克隆野生稻新R基因 | 第31-81页 |
1 实验材料 | 第32-37页 |
2 方法 | 第37-52页 |
·富集内参文库的制备 | 第37页 |
·探针模板的制备 | 第37-41页 |
·富集探针的制备 | 第41-42页 |
·富集文库的构建及富集效率的检测 | 第42-44页 |
·菌落原位杂交筛选富集文库 | 第44-46页 |
·阳性克隆指纹图谱分析 | 第46页 |
·生物信息学分析 | 第46-47页 |
·转基因植株的获得 | 第47-48页 |
·田间白叶枯病抗性鉴定 | 第48-49页 |
·转基因植株的田间稻瘟病自然发病鉴定 | 第49-50页 |
·转基因植株的稻瘟病人工接种鉴定 | 第50-52页 |
·转基因植株的细菌性条斑病接种鉴定 | 第52页 |
3 实验结果 | 第52-77页 |
·富集探针模板的制备及分析 | 第52-57页 |
·富集探针的制备 | 第57-58页 |
·富集文库的构建 | 第58-60页 |
·富集文库的杂交筛选 | 第60-61页 |
·阳性克隆指纹图谱分析 | 第61-62页 |
·阳性克隆的稳定性检测 | 第62-63页 |
·阳性克隆鉴定及生物信息学分析 | 第63-69页 |
·转基因植株的获得和转基因纯系的获得 | 第69-71页 |
·转基因植株田间白叶枯抗性鉴定 | 第71-72页 |
·转基因植株田间稻瘟病自然发病鉴定 | 第72-74页 |
·转基因植株稻瘟病人工接种鉴定 | 第74-76页 |
·转基因植株细菌性条斑病人工接种鉴定 | 第76-77页 |
4 讨论 | 第77-80页 |
·RecA蛋白介导的富集文库构建技术和RGAs技术相结合提供R基因克降的新策略 | 第77-79页 |
·候选阳性克隆的功能鉴定 | 第79-80页 |
5 下一步研究计划 | 第80-81页 |
第三章 hpRNA介导的基因沉默突变体库克隆R基因 | 第81-90页 |
1 材料和试剂 | 第81-83页 |
2 方法 | 第83-84页 |
·RNAi突变体库的创制 | 第83页 |
·转基因植株的GUS检测 | 第83页 |
·转基因植株的PCR检测及测序产物分析 | 第83页 |
·转基因植株的白叶枯和细菌性条斑病接种鉴定 | 第83页 |
·类病斑突变体的筛选 | 第83页 |
·类病斑突变体的序列分析 | 第83-84页 |
3 实验结果 | 第84-87页 |
·RNAi突变体库的创制 | 第84页 |
·转基因植株的GUS检测 | 第84页 |
·PCR产物测序分析 | 第84页 |
·转基因植株的白叶枯和细菌性条斑病接种鉴定 | 第84-85页 |
·类病斑突变体的初步鉴定 | 第85-86页 |
·类病斑突变体的序列分析 | 第86-87页 |
4 讨论 | 第87-89页 |
·RNAi突变体库优点 | 第87页 |
·RNAi突变体库的筛选 | 第87-88页 |
·类病斑突变体的研究 | 第88-89页 |
5 下一步研究计划 | 第89-90页 |
第四章 利用野生稻驯化基因克隆R基因 | 第90-94页 |
1 材料 | 第90页 |
2 方法 | 第90-91页 |
·驯化基因的序列分析 | 第90页 |
·驯化基因的组培转化 | 第90页 |
·转基因296、358的白叶枯接种鉴定 | 第90-91页 |
·转基因材料296、358的稻瘟病自然接种鉴定 | 第91页 |
3 实验结果 | 第91页 |
·驯化基因的序列分析 | 第91页 |
·驯化基因的组培转化 | 第91页 |
·转基因296、358的白叶枯接种鉴定 | 第91页 |
·转基因材料296、358的稻瘟病自然接种鉴定 | 第91页 |
4 讨论 | 第91-93页 |
5 下一步研究计划 | 第93-94页 |
全文总结、创新点 | 第94-95页 |
参考文献 | 第95-108页 |
附录 | 第108-119页 |
致谢 | 第119-120页 |
作者在学期间取得的学术成果 | 第120页 |