| 符号说明 | 第1-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-14页 |
| 1 前言 | 第14-33页 |
| ·猪链球菌的研究进展 | 第15-22页 |
| ·历史 | 第15页 |
| ·病原学 | 第15-16页 |
| ·流行病学 | 第16-19页 |
| ·致病机理 | 第19-21页 |
| ·预防与治疗 | 第21-22页 |
| ·猪链球菌毒力因子和检测方法的研究进展 | 第22-31页 |
| ·S.suis 的基本特征 | 第22页 |
| ·S.suis 的毒力因子 | 第22-26页 |
| ·S.suis 的检测方法 | 第26-31页 |
| ·本研究的目的意义 | 第31-33页 |
| 2 材料与方法 | 第33-55页 |
| ·猪链球菌重组谷氨酸脱氢酶的原核表达及其抗原性初步研究 | 第33-47页 |
| ·菌株、质粒和血清 | 第33页 |
| ·试剂 | 第33页 |
| ·主要仪器 | 第33-34页 |
| ·实验动物 | 第34页 |
| ·主要溶液的配制 | 第34-37页 |
| ·细菌的培养 | 第37页 |
| ·细菌基因组 DNA 的提取 | 第37-38页 |
| ·引物的设计与合成 | 第38-39页 |
| ·目的基因的克隆 | 第39-42页 |
| ·重组质粒 pET-30a-GDH 的构建 | 第42-43页 |
| ·rGDH 的初步诱导表达 | 第43页 |
| ·诱导表达产物的鉴定 | 第43-45页 |
| ·rGDH 的纯化与定量 | 第45-46页 |
| ·抗 GDH 兔抗体的制备 | 第46页 |
| ·Western blot 分析 | 第46-47页 |
| ·rGDH 亚单位疫苗的动物免疫保护试验 | 第47页 |
| ·猪链球菌 rGDH PPA-ELISA 抗体检测方法的建立与应用 | 第47-51页 |
| ·菌株和血清 | 第47页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第47-48页 |
| ·ELISA 所用溶液 | 第48页 |
| ·PPA-ELISA 条件的优化 | 第48-49页 |
| ·PPA-ELISA 的操作程序和结果的判定 | 第49-50页 |
| ·特异性试验 | 第50页 |
| ·重复试验 | 第50-51页 |
| ·稳定性试验 | 第51页 |
| ·敏感性试验 | 第51页 |
| ·符合性试验 | 第51页 |
| ·PPA-ELISA 方法的应用试验 | 第51页 |
| ·统计分析 | 第51页 |
| ·猪链球菌 rGDH Dot-PPA-ELISA 抗体检测方法的建立与应用 | 第51-55页 |
| ·菌株和血清 | 第51页 |
| ·试剂 | 第51-52页 |
| ·包被液、封闭液、稀释液、洗涤液 | 第52页 |
| ·诊断膜片的制备 | 第52页 |
| ·Dot-PPA-ELISA 操作程序 | 第52页 |
| ·Dot-PPA-ELISA 反应条件的优化 | 第52-53页 |
| ·特异性试验 | 第53页 |
| ·敏感性试验 | 第53页 |
| ·重复试验 | 第53页 |
| ·保存期试验 | 第53页 |
| ·符合性试验 | 第53-54页 |
| ·Dot-PPA-ELISA 方法的应用 | 第54-55页 |
| 3 结果与分析 | 第55-69页 |
| ·猪链球菌重组谷氨酸脱氢酶的原核表达及其抗原性初步研究 | 第55-60页 |
| ·S.suis gdh 基因的 PCR 扩增结果 | 第55-56页 |
| ·pMD18T-gdh 重组质粒的筛选和酶切鉴定 | 第56页 |
| ·原核表达载体 pET-30a-GDH 的鉴定 | 第56页 |
| ·GDH 蛋白的诱导表达 | 第56-58页 |
| ·纯化 GDH 蛋白的获得 | 第58-59页 |
| ·重组 GDH 蛋白兔多抗血清制备及抗体效价检测 | 第59页 |
| ·Western blot 分析结果 | 第59-60页 |
| ·rGDH 重组蛋白的免疫保护性 | 第60页 |
| ·猪链球菌 rGDH PPA-ELISA 抗体检测方法的建立与应用 | 第60-64页 |
| ·PPA-ELISA 条件的优化 | 第60-61页 |
| ·结果的判定 | 第61页 |
| ·特异性试验 | 第61-62页 |
| ·重复试验 | 第62-63页 |
| ·稳定性试验 | 第63页 |
| ·敏感性试验 | 第63页 |
| ·符合性试验 | 第63-64页 |
| ·PPA-ELISA 方法的应用试验 | 第64页 |
| ·猪链球菌 rGDH Dot-PPA-ELISA 抗体检测方法的建立与应用 | 第64-69页 |
| ·Dot-PPA-ELISA 反应条件的优化 | 第64-65页 |
| ·特异性试验 | 第65页 |
| ·敏感性试验 | 第65-66页 |
| ·重复试验 | 第66页 |
| ·保存期试验 | 第66-67页 |
| ·符合性试验 | 第67-68页 |
| ·Dot-PPA-ELISA 方法的初步应用 | 第68-69页 |
| 4 讨论 | 第69-73页 |
| ·猪链球菌重组谷氨酸脱氢酶的原核表达及其抗原性初步研究 | 第69-70页 |
| ·猪链球菌 rGDH PPA-ELISA 抗体检测方法的建立与应用 | 第70-71页 |
| ·猪链球菌 rGDH Dot-PPA-ELISA 抗体检测方法的建立与应用 | 第71-73页 |
| 5 结论 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
| 攻读硕士期间发表论文情况 | 第83页 |
