| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-14页 |
| 缩略词表 | 第14-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-36页 |
| ·环糊精概述 | 第16-19页 |
| ·环糊精的发展历史 | 第16-17页 |
| ·环糊精的应用 | 第17-19页 |
| ·食品工业中的应用 | 第17页 |
| ·医药工业中的应用 | 第17-18页 |
| ·化学工业中的应用 | 第18页 |
| ·分析化学中的应用 | 第18页 |
| ·农业中的应用 | 第18页 |
| ·环境保护中的应用 | 第18-19页 |
| ·分支环糊精 | 第19-23页 |
| ·分支环糊精概述 | 第19-21页 |
| ·葡萄糖基-环糊精(Glucosyl-cyclodextrin, G_1-CD) | 第19-20页 |
| ·麦芽糖基-环糊精(Maltosyl-cyclodextrin, G_2-CD) | 第20页 |
| ·麦芽三糖基-环糊精(Maltotriosyl-cyclodextrin, G_3-CD) | 第20页 |
| ·α-半乳糖基-环糊精(α-Galactosyl-cyclodextrin, Gal-CD) | 第20页 |
| ·β-半乳糖基-葡萄糖基-环糊精(β-Galactosyl-glucosyl-cyclodextrins,β-Gal-G_1-CDs) | 第20-21页 |
| ·α-半乳糖基-葡萄糖基-环糊精(α-Galactosyl-glucosyl-cyclodextrins,α-Gal-G_1-CDs) | 第21页 |
| ·α-半乳糖基-麦芽糖基-环糊精(α-Galactosyl-maltosyl-cyclodextrin，Gal-G_2-CD) | 第21页 |
| ·甘露糖基环糊精 | 第21页 |
| ·葡萄醛酸基-葡萄糖基-β-环糊精(GUG-β-CD) | 第21页 |
| ·分支环糊精的分离鉴定 | 第21页 |
| ·分支环糊精的性质及应用 | 第21-23页 |
| ·溶解度 | 第21-22页 |
| ·包合能力 | 第22页 |
| ·酸水解 | 第22页 |
| ·酶水解 | 第22-23页 |
| ·生物学性质 | 第23页 |
| ·增溶和稳定作用 | 第23页 |
| ·溶血活性更低 | 第23页 |
| ·Α-半乳糖基环糊精 | 第23-25页 |
| ·α-半乳糖基环糊精的制备 | 第23-24页 |
| ·α-半乳糖基环糊精的应用 | 第24-25页 |
| ·α-半乳糖基环糊精的现状及问题 | 第25页 |
| ·Α-半乳糖苷酶 | 第25-29页 |
| ·α-半乳糖苷酶的概述 | 第25-27页 |
| ·咖啡豆α-半乳糖苷酶 | 第27-28页 |
| ·咖啡豆α-半乳糖苷酶的现状及问题 | 第28-29页 |
| ·课题的立题背景与意义 | 第29页 |
| ·主要研究内容 | 第29页 |
| 参考文献 | 第29-36页 |
| 第二章 发芽咖啡豆 α-半乳糖苷酶的粗提 | 第36-55页 |
| ·引言 | 第36页 |
| ·材料与方法 | 第36-39页 |
| ·实验材料 | 第36-37页 |
| ·咖啡豆(绿咖啡豆) | 第36页 |
| ·发芽咖啡豆 | 第36页 |
| ·主要试剂 | 第36-37页 |
| ·实验设备 | 第37页 |
| ·方法 | 第37-39页 |
| ·发芽咖啡豆的培养 | 第37页 |
| ·α-Gal 的粗提 | 第37-38页 |
| ·酶活及蛋白测定 | 第38页 |
| ·粗提条件的选择 | 第38页 |
| ·粗提参数对α-Gal 得率的影响 | 第38-39页 |
| ·聚乙烯基聚吡咯烷酮(Polyvinylpolypyrrolidone, PVPP)去除植物多酚 | 第39页 |
| ·有机试剂去除植物多酚 | 第39页 |
| ·植物多酚的测定 | 第39页 |
| ·试验设计与统计分析 | 第39页 |
| ·结果与讨论 | 第39-52页 |
| ·α-Gal 植物酶源的确定 | 第39-41页 |
| ·发芽咖啡豆的发芽方式 | 第39页 |
| ·粗提液的选择 | 第39-40页 |
| ·发芽期间α-Gal 的酶活变化 | 第40-41页 |
| ·发芽咖啡豆的粉碎方式 | 第41页 |
| ·粗提工艺参数对α-Gal 的影响 | 第41-48页 |
| ·pH 对α-Gal 的影响 | 第41-42页 |
| ·时间对α-Gal 的影响 | 第42页 |
| ·料液比对α-Gal 的影响 | 第42-43页 |
| ·搅拌速度对α-Gal 的影响 | 第43页 |
| ·响应面优化试验 | 第43-48页 |
| ·植物多酚对α-Gal 的影响 | 第48-52页 |
| ·竞争法去除植物多酚 | 第49-50页 |
| ·解析法去除植物多酚 | 第50-51页 |
| ·植物多酚的含量 | 第51-52页 |
| ·本章小结 | 第52页 |
| 参考文献 | 第52-55页 |
| 第三章 发芽咖啡豆α-半乳糖苷酶的分离纯化 | 第55-68页 |
| ·引言 | 第55页 |
| ·材料与方法 | 第55-59页 |
| ·实验材料 | 第55-57页 |
| ·粗酶液 | 第55页 |
| ·主要试剂 | 第55-56页 |
| ·实验设备 | 第56-57页 |
| ·方法 | 第57-59页 |
| ·α-Gal 分离纯化程序[3, 15, 16] | 第57页 |
| ·(NH_4)_2SO_4 分级沉淀 | 第57页 |
| ·上柱前处理 | 第57页 |
| ·DEAE-Sepharose Fast Flow 阴离子交换柱色谱(预备试验) | 第57-58页 |
| ·DEAE-Sepharose Fast Flow 阴离子交换色谱(分离实验) | 第58页 |
| ·凝胶过滤色谱 | 第58页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第58页 |
| ·α-Gal 分子量的测定 | 第58-59页 |
| ·酶活及蛋白测定 | 第59页 |
| ·结果与讨论 | 第59-66页 |
| ·(NH_4)_2SO_4 分级沉淀 | 第59-60页 |
| ·DEAE-Sepharose Fast Flow 阴离子交换柱色谱 | 第60-62页 |
| ·预备试验 | 第60-61页 |
| ·分离实验 | 第61-62页 |
| ·凝胶过滤色谱 | 第62-64页 |
| ·纯化结果 | 第64-66页 |
| ·各步分离纯化结果 | 第64页 |
| ·酶组分的纯度鉴定与分子量测定 | 第64-66页 |
| ·本章小结 | 第66页 |
| 参考文献 | 第66-68页 |
| 第四章 发芽咖啡豆α-半乳糖苷酶的酶学性质研究 | 第68-82页 |
| ·引言 | 第68页 |
| ·材料与方法 | 第68-70页 |
| ·实验材料 | 第68-69页 |
| ·发芽咖啡豆α-Gal | 第68页 |
| ·主要试剂 | 第68页 |
| ·实验设备 | 第68-69页 |
| ·方法 | 第69-70页 |
| ·α-Gal 酶活和蛋白测定 | 第69页 |
| ·α-Gal 的最适温度及热稳定性 | 第69页 |
| ·α-Gal 最适pH 及pH 稳定性 | 第69页 |
| ·金属离子对α-Gal 的影响 | 第69页 |
| ·离子强度对α-Gal 的影响 | 第69页 |
| ·底物浓度对α-Gal 的影响及动力学常数的测定 | 第69页 |
| ·α-Gal 的化学修饰 | 第69-70页 |
| ·色氨酸残基数的测定 | 第70页 |
| ·结果与讨论 | 第70-80页 |
| ·α-Gal 最适温度及热稳定性 | 第70-71页 |
| ·α-Gal 最适pH 及pH 稳定性 | 第71-72页 |
| ·金属离子对α-Gal 的影响 | 第72页 |
| ·离子强度对α-Gal 的影响 | 第72-73页 |
| ·底物浓度对α-Gal 的影响及动力学常数的测定 | 第73-75页 |
| ·α-Gal 的化学修饰 | 第75-80页 |
| ·修饰剂的反应条件 | 第75页 |
| ·α-Gal 的化学修饰结果 | 第75-76页 |
| ·组氨酸残基的化学修饰 | 第76-77页 |
| ·羧基氨基酸残基的化学修饰 | 第77页 |
| ·巯基的化学修饰 | 第77-78页 |
| ·色氨酸残基的化学修饰 | 第78-80页 |
| ·本章小结 | 第80页 |
| 参考文献 | 第80-82页 |
| 第五章 酶法合成α-半乳糖基-β-环糊精 | 第82-99页 |
| ·引言 | 第82页 |
| ·材料与方法 | 第82-85页 |
| ·实验材料 | 第82-83页 |
| ·发芽咖啡豆α-Gal | 第82页 |
| ·主要试剂 | 第82-83页 |
| ·实验设备 | 第83页 |
| ·方法 | 第83-85页 |
| ·发芽咖啡豆α-Gal 酶法合成Gal-β-CD 路线图 | 第83页 |
| ·原料准备及酶法合成反应 | 第83-84页 |
| ·高效液相色谱(HPLC)分析及制备 | 第84页 |
| ·质谱分析 | 第84页 |
| ·产物的酶解分析 | 第84页 |
| ·傅里叶变换红外光谱分析 | 第84页 |
| ·核磁共振分析 | 第84-85页 |
| ·Gal-β-CD 的分子模拟图 | 第85页 |
| ·Gal-β-CD 产量计算 | 第85页 |
| ·结果与讨论 | 第85-96页 |
| ·产品的HPLC 分析 | 第85-87页 |
| ·制备型HPLC 分离产品 | 第87页 |
| ·产品组成分析 | 第87-88页 |
| ·产品的质谱图 | 第87-88页 |
| ·产品的酶解分析 | 第88页 |
| ·产品结构分析 | 第88-92页 |
| ·傅里叶变换红外光谱分析 | 第88-89页 |
| ·核磁共振分析 | 第89-90页 |
| ·Gal-β-CD 的结构示意图 | 第90-92页 |
| ·α-Gal 酶法合成Gal-β-CD 的动力学研究 | 第92-96页 |
| ·α-Gal 酶法合成Gal-β-CD 的评价指标 | 第92页 |
| ·时间对合成产物组成变化的影响 | 第92-94页 |
| ·pH 对酶法合成Gal-β-CD 的影响 | 第94-95页 |
| ·酶用量对酶法合成Gal-β-CD 的影响 | 第95-96页 |
| ·底物浓度对酶法合成Gal-β-CD 的影响 | 第96页 |
| ·本章小结 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-99页 |
| 第六章 酶法合成α-半乳糖基-β-环糊精的工艺研究 | 第99-112页 |
| ·引言 | 第99页 |
| ·材料与方法 | 第99-100页 |
| ·实验材料 | 第99-100页 |
| ·发芽咖啡豆α-Gal | 第99页 |
| ·主要试剂 | 第99页 |
| ·实验设备 | 第99-100页 |
| ·方法 | 第100页 |
| ·发芽咖啡豆α-Gal 酶法合成Gal-β-CD | 第100页 |
| ·产物的 HPLC 分析 | 第100页 |
| ·制备型 HPLC 的分离纯化 | 第100页 |
| ·Gal-β-CD 产量计算 | 第100页 |
| ·试验设计与统计分析 | 第100页 |
| ·结果与讨论 | 第100-109页 |
| ·酶法合成Gal-β-CD 的评价指标 | 第100页 |
| ·单因素对酶法合成Gal-β-CD 的影响 | 第100-102页 |
| ·温度对酶法合成 Gal-β-CD 的影响 | 第100-101页 |
| ·振荡速度对酶法合成Gal-β-CD 的影响 | 第101-102页 |
| ·时间对酶法合成Gal-β-CD 的影响 | 第102页 |
| ·酶法合成Gal-β-CD 的工艺优化 | 第102-109页 |
| ·Plackett-Burman 试验设计及分析 | 第103-105页 |
| ·最陡爬坡法试验设计及分析 | 第105-106页 |
| ·Box-Behnken 试验设计及分析 | 第106-108页 |
| ·模型验证实验及与未优化值的比较实验 | 第108-109页 |
| ·Gal-β-CD 的产量 | 第109页 |
| ·本章小结 | 第109-110页 |
| 参考文献 | 第110-112页 |
| 主要结论 | 第112-114页 |
| 创新点 | 第114-115页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第115-116页 |
| 致谢 | 第116页 |
