| 目录 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略词英汉对照表 | 第10-12页 |
| 第一部分 FcαR的糖基化对其与IgA结合的影响 | 第12-43页 |
| 前言 | 第13-16页 |
| 实验结果 | 第16-31页 |
| 1. 糖基化程度降低的FcαR与IgA结合增强 | 第16-18页 |
| ·CHO-FcαR稳定细胞株的鉴定 | 第16-17页 |
| ·去糖基化的FcαR与IgA结合增强 | 第17-18页 |
| 2. N58位点的糖基化对FcαR与IgA结合的影响 | 第18-26页 |
| ·带myc标签的FcαR突变体的鉴定 | 第18-21页 |
| ·FcαR突变体与IgA的结合 | 第21-23页 |
| ·N58Q-FcαR(CHO细胞)与IgA的结合 | 第23-24页 |
| ·N58Q-FcαR(RBL2H3细胞)与IgA的结合 | 第24-25页 |
| ·去糖基化的FcαR突变体与IgA的结合 | 第25-26页 |
| 3. N58位点的唾液酸残基对FcαR与IgA结合的影响 | 第26-28页 |
| 4. N58位点的糖基化对可溶性FcαR与IgA结合的影响 | 第28-31页 |
| 讨论 | 第31-34页 |
| 材料和方法 | 第34-39页 |
| 1. 抗体和试剂 | 第34页 |
| 2. 突变实验 | 第34-35页 |
| 3. 细胞培养和转染 | 第35页 |
| 4. 衣霉素抑制实验 | 第35-36页 |
| 5. 神经氨酸酶实验及唾液酸的检测 | 第36页 |
| 6. 流式细胞术 | 第36页 |
| 7. 外周血中性粒细胞和单核细胞的分离 | 第36-37页 |
| 8. Western Blot | 第37页 |
| 9. 纯化可溶形式的FcαR | 第37页 |
| 10. ELISA方法检测IgA结合实验 | 第37-38页 |
| 11. 数据分析 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-43页 |
| 第二部分 FcαR异形体的表达及定位研究 | 第43-72页 |
| 前言 | 第44-46页 |
| 实验结果 | 第46-60页 |
| 1. 分离fcαr选择性剪接产物的cDNA | 第46页 |
| 2. FcαR异形体在CHO细胞的表达和定位 | 第46-49页 |
| 3. FcαR异形体在COS7细胞的表达和定位 | 第49-50页 |
| 4. FcαR异形体在RBL2H3细胞的表达和定位 | 第50-54页 |
| 5. FcαR异形体在U937细胞的定位 | 第54-55页 |
| 6. PMA刺激FcαR异形体的表达 | 第55-56页 |
| 7. FcαR多种缺失突变体的构建和表达 | 第56-58页 |
| 8. FcαR两种替换突变体的构建和表达 | 第58-60页 |
| 讨论 | 第60-63页 |
| 材料和方法 | 第63-68页 |
| 1. 抗体和试剂 | 第63页 |
| 2. 质粒 | 第63-64页 |
| 3. 突变实验 | 第64-65页 |
| 4. 细胞培养和转染 | 第65-66页 |
| 5. 流式细胞术 | 第66页 |
| 6. 共聚焦荧光显微镜 | 第66-67页 |
| 7. RT-PCR | 第67页 |
| 8. Western Blot | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-72页 |
| 常规实验材料和实验方法 | 第72-98页 |
| 实验材料 | 第72-75页 |
| 一、主要化学试剂 | 第72页 |
| 二、抗体 | 第72-73页 |
| 三、细胞系 | 第73页 |
| 四、工具酶、分子量标准及试剂盒 | 第73页 |
| 五、质粒载体 | 第73-74页 |
| 六、菌株 | 第74页 |
| 七、仪器设备 | 第74页 |
| 八、软件 | 第74-75页 |
| 实验方法 | 第75-98页 |
| [分子生物学相关实验] | 第75-82页 |
| 一、常规表达质粒构建 | 第75-78页 |
| 二、哺乳动物细胞转染 | 第78-79页 |
| 三、细胞稳定株筛选 | 第79-82页 |
| [免疫学相关实验] | 第82-91页 |
| 一、兔抗FcαR多克隆抗体的纯化和鉴定 | 第82-83页 |
| 二、用NIP抗原柱提纯抗体 | 第83页 |
| 三、抗体F(ab')_2片段的制备及纯化 | 第83页 |
| 四、荧光流式细胞分析技术 | 第83-84页 |
| 五、激光扫描共聚焦显微镜 | 第84-85页 |
| 六、酶联免疫吸附实验 | 第85-86页 |
| 七、蛋白质的SDS-PAGE梯度凝胶电泳 | 第86-88页 |
| 八、半干法Western Blot | 第88-89页 |
| 九、湿转法Western Blot | 第89-91页 |
| [生物化学相关实验] | 第91-95页 |
| 一、免疫沉淀 | 第91页 |
| 二、荧光标记方法 | 第91-92页 |
| 三、HPR标记抗体 | 第92-93页 |
| 四、生物素标记抗体 | 第93页 |
| 五、抗体亲和柱的制备 | 第93-94页 |
| 六、蛋白质浓度测定 | 第94-95页 |
| [细胞生物学相关实验] | 第95-98页 |
| 一、外周单核细胞分离 | 第95页 |
| 二、外周血中性粒细胞的分离 | 第95-98页 |
| 综述 | 第98-114页 |
| 参考文献 | 第108-114页 |
| 附录 | 第114-119页 |
| 附录Ⅰ 质粒载体图谱和多克隆位点 | 第114-118页 |
| 附录Ⅱ 攻读博士学位期间发表的文章 | 第118-119页 |
| 致谢 | 第119-120页 |
| 个人简历 | 第120-122页 |
