| 英文缩略词表 | 第1-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| 英文摘要 | 第11-13页 |
| 前言 | 第13-16页 |
| 五种虫媒病毒悬浮芯片检测方法的建立 | 第16-53页 |
| 1 材料 | 第16-17页 |
| ·病毒株及细胞株 | 第16页 |
| ·主要试剂及仪器设备 | 第16-17页 |
| ·病毒的增殖培养所需试剂和仪器设备 | 第16页 |
| ·特异RT-PCR所需试剂和仪器设备 | 第16-17页 |
| ·芯片检测所需试剂和仪器设备 | 第17页 |
| 2 方法 | 第17-26页 |
| ·通用引物的设计 | 第17页 |
| ·种特异检测探针的设计 | 第17-18页 |
| ·探针与色标微球的共价交联 | 第18-19页 |
| ·病毒的增殖培养 | 第19页 |
| ·病毒培养上清中RNA的提取 | 第19-20页 |
| ·病毒的通用RT-PCR扩增 | 第20-21页 |
| ·逆转录合成cDNA | 第20页 |
| ·PCR合成靶核酸，并引入生物素标记 | 第20-21页 |
| ·悬浮芯片杂交条件的摸索与优化 | 第21页 |
| ·杂交温度的优化 | 第21页 |
| ·杂交时间的优化 | 第21页 |
| ·悬浮芯片的杂交 | 第21-22页 |
| ·直接核酸杂交 | 第21-22页 |
| ·洗涤及显色 | 第22页 |
| ·结果判定 | 第22页 |
| ·悬浮芯片检测结果的特异PCR验证 | 第22-23页 |
| ·五种病毒特异PCR检测引物的设计 | 第22页 |
| ·特异RT-PCR检测 | 第22-23页 |
| ·悬浮芯片检测方法的评价 | 第23-25页 |
| ·检测方法的重复性验证 | 第23页 |
| ·检测方法的特异性验证 | 第23-24页 |
| ·检测方法的灵敏度确定 | 第24-25页 |
| ·检测方法的初步应用 | 第25-26页 |
| ·模拟混合标本的检测 | 第25-26页 |
| ·初步应用于多种标本的检测 | 第26页 |
| 3 结果 | 第26-42页 |
| ·引物和探针的设计 | 第26-27页 |
| ·病毒的增殖培养 | 第27-28页 |
| ·病毒的通用RT-PCR扩增结果 | 第28页 |
| ·悬浮芯片杂交条件的优化结果 | 第28-30页 |
| ·杂交温度的优化 | 第28-29页 |
| ·杂交时间的优化 | 第29-30页 |
| ·悬浮芯片的初步检测结果 | 第30-33页 |
| ·色标微球上交联探针的确证 | 第30-31页 |
| ·病毒RT-PCR产物的检测结果 | 第31-32页 |
| ·检测结果的特异PCR验证 | 第32-33页 |
| ·悬浮芯片检测方法的评价 | 第33-39页 |
| ·检测方法的重复性验证 | 第33-36页 |
| ·检测方法的特异性验证 | 第36-37页 |
| ·检测方法的灵敏度确定 | 第37-39页 |
| ·悬浮芯片检测方法的初步应用 | 第39-42页 |
| ·模拟混合病毒样本的检测 | 第39-40页 |
| ·应用于临床标本的检测 | 第40-42页 |
| 4 讨论 | 第42-47页 |
| ·引物和探针的设计是基因芯片的关键 | 第42-43页 |
| ·探针长度的选择 | 第42页 |
| ·引物和探针的设计 | 第42-43页 |
| ·引物和探针的生物信息学验证 | 第43页 |
| ·靶核酸的扩增 | 第43页 |
| ·探针和微球的有效交联是核酸杂交的前提 | 第43-44页 |
| ·芯片制备的质量控制是悬浮芯片技术的主要保证 | 第44页 |
| ·芯片杂交条件的摸索与优化 | 第44-45页 |
| ·芯片检测结果的判定 | 第45页 |
| ·悬浮芯片技术的重复性、特异性和灵敏度 | 第45-46页 |
| ·悬浮芯片检测技术的前景展望 | 第46-47页 |
| 5 总结 | 第47-48页 |
| ·成功设计了针对五种虫媒病毒的通用引物和特异性检测探针 | 第47页 |
| ·确立了悬浮芯片检测方法的最佳条件 | 第47页 |
| ·成功建立了能对五种虫媒病毒进行检测和分型的悬浮芯片方法 | 第47页 |
| ·成功应用本方法对模拟标本和临床标本进行检测 | 第47-48页 |
| 6 参考文献 | 第48-53页 |
| 文献综述 | 第53-60页 |
| 硕士期间发表的学术论文 | 第60-76页 |
| 悬浮芯片在核酸和蛋白质检测中的应用 | 第61-68页 |
| 五种虫媒病毒悬浮芯片检测方法的建立 | 第68-76页 |
| 个人简历 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77页 |