| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-26页 |
| 1 异戊烯基转移酶基因ipt及其基因工程研究进展 | 第12-14页 |
| ·细胞分裂素研究进展 | 第12页 |
| ·ipt基因的发现 | 第12-13页 |
| ·ipt基因的研究进展 | 第13-14页 |
| ·ipt基因作为标记基因 | 第14页 |
| 2 植物基因工程研究进展 | 第14-16页 |
| ·植物遗传转化方法 | 第14-15页 |
| ·农杆菌Ti质粒或Ri质粒介导法 | 第15-16页 |
| ·基因枪法 | 第16页 |
| 3 植物抗寒基因工程研究进展 | 第16-19页 |
| ·概述 | 第16页 |
| ·冷诱导基因 | 第16-17页 |
| ·抗冻蛋白基因 | 第17-18页 |
| ·调控基因 | 第18页 |
| ·脂肪酸去饱和酶基因 | 第18-19页 |
| ·超氧化物歧化酶基因、脯氨酸基因 | 第19页 |
| ·LEA(late-embryogenesis abundant)蛋白基因 | 第19页 |
| 4 小油桐研究进展 | 第19-24页 |
| ·形态特征和生物学特性 | 第19-20页 |
| ·小油桐地理分布 | 第20页 |
| ·小油桐资源利用现状 | 第20-22页 |
| ·药用价值 | 第20-21页 |
| ·生物柴油 | 第21页 |
| ·生物农药 | 第21-22页 |
| ·小油桐组织培养研究进展 | 第22-23页 |
| ·小油桐无菌苗的萌发 | 第22页 |
| ·组织培养再生 | 第22页 |
| ·小油桐腋芽快速繁殖 | 第22-23页 |
| ·小油桐胚乳组织培养研究 | 第23页 |
| ·小油桐基因工程研究进展 | 第23-24页 |
| 5 结语 | 第24页 |
| 6 本论文研究的目的与意义 | 第24-26页 |
| 第二章 小油桐组织培养再生体系的建立 | 第26-40页 |
| 前言 | 第26页 |
| 1 材料与方法 | 第26-28页 |
| ·植物材料 | 第26页 |
| ·方法 | 第26-28页 |
| ·材料的预处理 | 第26-27页 |
| ·培养基 | 第27页 |
| ·培养条件 | 第27页 |
| ·培养过程 | 第27-28页 |
| 2 结果与分析 | 第28-38页 |
| ·小油桐无菌苗的萌发 | 第28-29页 |
| ·小油桐无菌苗萌发最佳消毒方式的确定 | 第28页 |
| ·不同培养基对小油桐无菌苗萌发的影响 | 第28-29页 |
| ·小油桐子叶愈伤组织和不定芽诱导最佳激素组合的筛选 | 第29-30页 |
| ·小油桐子叶最佳激素配比浓度的筛选 | 第29页 |
| ·不同培养基萌发的小油桐无菌苗子叶的分化差异 | 第29-30页 |
| ·小油桐下胚轴愈伤组织和不定芽诱导最佳激素组合的筛选 | 第30-32页 |
| ·小油桐真叶愈伤组织和不定芽诱导最佳激素组合的筛选 | 第32页 |
| ·小油桐真叶柄愈伤组织和不定芽诱导最佳激素组合的筛选 | 第32-33页 |
| ·小油桐增殖最佳激素组合的筛选 | 第33页 |
| ·小油桐生根最佳激素组合的筛选 | 第33-34页 |
| ·苗龄、培养基pH值、外植体放置方式对小油桐子叶诱导的影响 | 第34-35页 |
| ·小油桐子叶愈伤组织和不定芽诱导最佳pH值的筛选 | 第34页 |
| ·小油桐子叶愈伤组织和不定芽诱导最佳苗龄的确定 | 第34-35页 |
| ·小油桐子叶愈伤组织和不定芽诱导最佳放置方式的确定 | 第35页 |
| ·不同炼苗时间和移栽基质对小油桐移栽的影响 | 第35-38页 |
| 3 结论与讨论 | 第38-40页 |
| ·材料的消毒与获得 | 第38页 |
| ·外植体的选择对小油桐组织培养的影响 | 第38-39页 |
| ·芽苗增殖 | 第39页 |
| ·苗龄、培养基pH值、外植体放置方式对小油桐子叶组织培养的影响 | 第39页 |
| ·生根培养 | 第39页 |
| ·移栽 | 第39-40页 |
| 第三章 农杆菌介导ipt遗传转化小油桐研究 | 第40-61页 |
| 前言 | 第40-41页 |
| 1 小油桐遗传转化研究材料与方法 | 第41-46页 |
| ·试验材料 | 第41-43页 |
| ·植物材料 | 第41页 |
| ·农杆菌菌株及质粒 | 第41页 |
| ·主要化学试剂 | 第41页 |
| ·基本培养基 | 第41-42页 |
| ·常用溶液配方 | 第42-43页 |
| ·实验方法 | 第43-46页 |
| ·菌种的活化和预处理 | 第43页 |
| ·小油桐无菌苗获得 | 第43页 |
| ·遗传转化步骤 | 第43页 |
| ·乙酰丁香酮(AS)的添加 | 第43-44页 |
| ·卡那霉素(Kan)有效选择压的确定 | 第44页 |
| ·抑菌剂浓度敏感性试验 | 第44页 |
| ·抗性愈伤组织诱导检测和观察 | 第44页 |
| ·遗传转化效率参数的优化 | 第44-45页 |
| ·GUS组织化学染色 | 第45页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第45-46页 |
| 2 转ipt基因小油桐植株生理特性检测材料与方法 | 第46-48页 |
| ·实验材料 | 第46页 |
| ·实验方法 | 第46-48页 |
| ·材料预处理 | 第46页 |
| ·叶绿素含量的测定 | 第46-47页 |
| ·细胞膜过氧化物酶(POD)活性的测定 | 第47页 |
| ·细胞膜保护物质含量的测定 | 第47-48页 |
| 3 结果与分析 | 第48-58页 |
| ·卡那霉素(Kan)有效筛选压的确定 | 第48-49页 |
| ·卡那霉素(Kan)对小油桐子叶愈伤组织诱导和分化的影响 | 第48-49页 |
| ·卡那霉素(Kan)对生根的影响 | 第49页 |
| ·头孢霉素对子叶愈伤组织诱导和不定芽分化的影响 | 第49页 |
| ·预培养时间对遗传转化的影响 | 第49-50页 |
| ·农杆菌感染时间和菌液浓度对遗传转化的影响 | 第50页 |
| ·共培养时间对遗传转化的影响 | 第50-51页 |
| ·乙酰丁香酮对转化效率的影响 | 第51页 |
| ·筛选培养时子叶不同放置方式对遗传转化的影响 | 第51-52页 |
| ·转基因小油桐植株的GUS组织染色鉴定 | 第52-53页 |
| ·转基因小油桐植株的分子生物学鉴定 | 第53-54页 |
| ·ipt基因表达对小油桐的影响 | 第54-56页 |
| ·小油桐高位分枝现象 | 第54页 |
| ·小油桐叶片与叶柄连接处着生再生芽 | 第54-56页 |
| ·低温处理对小油桐叶片叶绿素含量的影响 | 第56页 |
| ·低温处理对小油桐过氧化物酶活性的影响 | 第56-57页 |
| ·低温处理对小油桐叶片细胞膜保护物质含量的影响 | 第57-58页 |
| ·低温处理对小油桐叶片可溶性糖含量的影响 | 第57页 |
| ·低温处理对小油桐叶片可溶性蛋白含量的影响 | 第57-58页 |
| 4 结论 | 第58-61页 |
| ·外植体的选择 | 第58页 |
| ·影响转化频率的因素探讨 | 第58-59页 |
| ·预培养对转化的影响 | 第58-59页 |
| ·共培养对转化的影响 | 第59页 |
| ·乙酰丁香酮的使用 | 第59页 |
| ·浸染后对Kan抗性的增强 | 第59页 |
| ·转ipt基因小油桐表型特征 | 第59-60页 |
| ·转基因小油桐高位分枝 | 第59-60页 |
| ·转基因小油桐叶片与叶柄连接处着生再生芽 | 第60页 |
| ·ipt基因启动子调控 | 第60页 |
| ·ipt基因表达对生理小油桐生理特性的影响 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 缩写 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 附录 | 第69-71页 |
