| 中文摘要 | 第1-11页 |
| 英文摘要 | 第11-13页 |
| 前言 | 第13-31页 |
| 1 Bt的分布 | 第14-17页 |
| 2 Bt的分离 | 第17-19页 |
| ·样品的采集 | 第17页 |
| ·目标样品的选择 | 第17页 |
| ·采样方法 | 第17页 |
| ·样品保存 | 第17页 |
| ·分离方法 | 第17-19页 |
| ·无菌水法 | 第18页 |
| ·热处理法 | 第18页 |
| ·盖叶法 | 第18-19页 |
| ·擦试法 | 第19页 |
| 3 Bt的杀蚊研究 | 第19-27页 |
| ·白纹伊蚊的研究概况 | 第20-22页 |
| ·白纹伊蚊的危害 | 第20-21页 |
| ·白纹伊蚊的孳生场所 | 第21页 |
| ·白纹伊蚊的孳生习性 | 第21页 |
| ·化学物质对蚊虫孳生的影响 | 第21页 |
| ·白纹伊蚊的生态习性 | 第21-22页 |
| ·栖息习性 | 第21-22页 |
| ·昼夜活动规律 | 第22页 |
| ·季节消长 | 第22页 |
| ·产卵习性 | 第22页 |
| ·白纹伊蚊传播的疾病 | 第22-24页 |
| ·登革热/登革出血热/登革休克综合症 | 第22-23页 |
| ·西尼罗 | 第23-24页 |
| ·流行性乙型脑炎 | 第24页 |
| ·防治策略 | 第24-27页 |
| ·化学防治 | 第25页 |
| ·环境防治 | 第25页 |
| ·生物防治 | 第25-27页 |
| 4 主要杀蚊晶体蛋白结构 | 第27-28页 |
| ·杀虫晶体蛋白Cry2Aa的结构 | 第27页 |
| ·杀虫晶体蛋白Cyt的结构 | 第27-28页 |
| 5 杀虫晶体蛋白引起昆虫个体细胞裂解的机制 | 第28-29页 |
| ·质子梯度模型 | 第28页 |
| ·渗透裂解模型 | 第28-29页 |
| 6 昆虫对Bt的抗性研究 | 第29-31页 |
| 第1章 不同宿主Bt菌株的分离 | 第31-41页 |
| 1 材料与方法 | 第31-34页 |
| ·材料 | 第31-32页 |
| ·培养基 | 第31页 |
| ·药剂 | 第31页 |
| ·对照菌株 | 第31页 |
| ·分离材料 | 第31-32页 |
| ·试验方法 | 第32-34页 |
| ·分离材料的采集 | 第32-33页 |
| ·分离培养基的选择 | 第33页 |
| ·分离方法的选择 | 第33-34页 |
| ·镜检 | 第34页 |
| 2 结果与分析 | 第34-39页 |
| ·分离培养基的选择 | 第34-36页 |
| ·分离方法的选择 | 第36页 |
| ·Bt的分布情况 | 第36-39页 |
| 3 小结与讨论 | 第39-41页 |
| 第2章 Bt叶片分离株的生物学特性研究 | 第41-54页 |
| 1 材料与方法 | 第41-46页 |
| ·试验材料 | 第41-42页 |
| ·试验菌株 | 第41页 |
| ·试验药剂 | 第41页 |
| ·试验仪器 | 第41页 |
| ·供试虫源 | 第41页 |
| ·酶类 | 第41页 |
| ·缓冲液 | 第41-42页 |
| ·试验方法 | 第42-46页 |
| ·cry基因型鉴定 | 第42-45页 |
| ·对不同昆虫的杀虫活性测定 | 第45页 |
| ·蛋白测定 | 第45-46页 |
| 2 结果与分析 | 第46-51页 |
| ·cry基因的鉴定 | 第46-48页 |
| ·生物测定 | 第48-51页 |
| ·蛋白电泳鉴定 | 第51页 |
| 3 小结与讨论 | 第51-54页 |
| 第3章 LLP29菌株生理生化指标的测定及cyt1Aa6基因的克隆与表达 | 第54-69页 |
| 1 材料与方法 | 第54-63页 |
| ·试验材料 | 第54-55页 |
| ·培养基 | 第54页 |
| ·菌株 | 第54页 |
| ·供试虫源 | 第54-55页 |
| ·缓冲液 | 第55页 |
| ·试验方法 | 第55-63页 |
| ·主要生理生化指标的鉴定 | 第55-57页 |
| ·cyt1基因的克隆 | 第57-60页 |
| ·cyt1基因的表达 | 第60-62页 |
| ·cyt1Aa6基因原核表达的生物测定 | 第62-63页 |
| 2 结果与分析 | 第63-67页 |
| ·生理生化指标试验结果 | 第63页 |
| ·PCR检测 | 第63页 |
| ·酶切分析 | 第63-64页 |
| ·序列测定 | 第64-66页 |
| ·cyt1Aa6基因的表达 | 第66-67页 |
| ·表达菌液生物活性测定 | 第67页 |
| 3 小结与讨论 | 第67-69页 |
| 第4章 cyt1Aa6对白纹伊蚊作用机理的研究 | 第69-77页 |
| 1 材料与方法 | 第69-72页 |
| ·细胞株、蚊虫及菌株 | 第69页 |
| ·细胞株 | 第69页 |
| ·蚊虫 | 第69页 |
| ·供试菌株 | 第69页 |
| ·Cyt1Aa6蛋白的纯化 | 第69页 |
| ·白纹伊蚊及C6/36细胞刷状缘膜(BBMV)蛋白的提取 | 第69页 |
| ·Bradford法测定蛋白浓度 | 第69-70页 |
| ·主要试剂 | 第70页 |
| ·抗体的制备与纯化 | 第70页 |
| ·Cyt1Aa6毒素蛋白对白纹伊蚊的毒力测定 | 第70页 |
| ·Cyt1Aa6毒素蛋白对C6/36的毒力测定(MTT) | 第70-71页 |
| ·Cyt1Aa6毒素蛋白对C6/36的结合试验 | 第71页 |
| ·免疫组织化学 | 第71-72页 |
| 2 结果与分析 | 第72-75页 |
| ·白纹伊蚊的形态特征 | 第72-73页 |
| ·对白纹伊蚊的毒力测定 | 第73页 |
| ·对C6/36细胞的毒力测定(MTT) | 第73-74页 |
| ·对C6/36的荧光标记结合试验 | 第74-75页 |
| ·免疫组织化学 | 第75页 |
| 3 小结与讨论 | 第75-77页 |
| 第5章 Cy1Aa6对白纹伊蚊C6/36抗性机制的研究 | 第77-85页 |
| 1 材料与方法 | 第77-79页 |
| ·试验材料 | 第77页 |
| ·细胞株及菌种 | 第77页 |
| ·主要试剂及药品 | 第77页 |
| ·试验方法 | 第77-79页 |
| ·白纹伊蚊C6/36细胞的抗性诱导 | 第77页 |
| ·噻唑蓝比色法(MTT)测定细胞抗性比 | 第77页 |
| ·敏感与抗性细胞的形态学观察 | 第77页 |
| ·间接免疫荧光 | 第77-78页 |
| ·敏感与抗性C6/36细胞的刷状缘膜蛋白(BBMV)的提取 | 第78页 |
| ·酶联免疫结合实验 | 第78页 |
| ·敏感与抗性细胞毒素结合蛋白的配体印迹实验 | 第78-79页 |
| 2 结果与分析 | 第79-81页 |
| ·MTT细胞毒性试验 | 第79页 |
| ·敏感与抗性细胞形态学观察 | 第79-80页 |
| ·敏感与抗性细胞的间接免疫荧光显微观察 | 第80页 |
| ·敏感和抗性细胞与毒素结合的ELISA分析 | 第80页 |
| ·敏感和抗性细胞与蛋白毒素结合的配体印迹 | 第80-81页 |
| 3 小结与讨论 | 第81-85页 |
| 第6章 总结 | 第85-87页 |
| 1 主要研究结果 | 第85页 |
| 2 创新点 | 第85-86页 |
| 3 下一步研究内容 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-96页 |
| 附录1 本试验使用的试剂与溶液的配制 | 第96-98页 |
| 附录2 博士期间发表(或投稿)论文及参加课题 | 第98-99页 |
| 附录3 序列GenBank登录号 | 第99-100页 |
| 致谢 | 第100页 |
