| 中文摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 插图、附表清单 | 第12-13页 |
| 英文名称缩略词 | 第13-14页 |
| 前言 | 第14-16页 |
| 第一部分 Pin1 基因 RNA 干扰表达载体的构建及鉴定 | 第16-32页 |
| 1. 引言 | 第16页 |
| 2 实验材料 | 第16-21页 |
| 3. 实验方法 | 第21-27页 |
| ·设计 | 第21页 |
| ·P-shRNA 干扰表达载体的设计与合成 | 第21-23页 |
| ·细胞培养 | 第23-24页 |
| ·脂质体介导质粒转染细胞 | 第24-25页 |
| ·总蛋白的提取及浓度测定 | 第25-27页 |
| ·统计学方法 | 第27页 |
| 4. 实验结果 | 第27-30页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第27页 |
| ·重组质粒的 DNA 序列测定 | 第27-28页 |
| ·SW620 细胞转染 pGenesil-1-Pin1 观察图及转染效率 | 第28-29页 |
| ·P-shRNA 对 Pin1 蛋白表达的作用 | 第29-30页 |
| 5 讨论 | 第30-32页 |
| 第二部分 Pin1基因表达下降对大肠癌SW620细胞生物学 行为的影响 | 第32-46页 |
| 1. 引言 | 第32页 |
| 2 材料 | 第32-34页 |
| 3 实验方法 | 第34-37页 |
| ·技术路线 | 第34页 |
| ·细胞形态学的改变 | 第34页 |
| ·生长曲线检测细胞的生长速度 | 第34页 |
| ·MTT法检测细胞的增殖能力 | 第34-35页 |
| ·流式细胞术检测细胞凋亡 | 第35页 |
| ·细胞免疫荧光检测 NF-κB/p65 的核内定位 | 第35-36页 |
| ·Western blot分析P65在细胞核内的蛋白量及Bcl-2的蛋白表达 | 第36-37页 |
| ·统计学分析 | 第37页 |
| 4 实验结果 | 第37-43页 |
| ·Pin1表达下降对SW620细胞形态学的影响 | 第37页 |
| ·Pin1 表达下降对 SW620 细胞生长速度的影响 | 第37-38页 |
| ·Pin1 表达下降对 sw620 细胞增殖能力的影响 | 第38-39页 |
| ·Pin1 表达下降对 sw620 细胞凋亡能力的影响 | 第39-40页 |
| ·Pin1表达下降后对NF-κB/p65核易位的影响 | 第40-42页 |
| ·Pin1 表达下降对细胞凋亡相关基因 Bcl-2 表达的影响 | 第42-43页 |
| 5 讨论 | 第43-46页 |
| 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-50页 |
| 综述 | 第50-57页 |
| 参考文献 | 第55-57页 |
| 个人简介 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
