中文摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-11页 |
插图、附表清单 | 第11-12页 |
英文名称缩略词 | 第12-13页 |
前言 | 第13-17页 |
第一章 材料与方法 | 第17-35页 |
1 实验材料 | 第17-22页 |
·细胞株 | 第17页 |
·菌株 | 第17页 |
·质粒 | 第17页 |
·主要试剂 | 第17-18页 |
·主要实验器材 | 第18-19页 |
·实验中使用的缓冲液和试剂的配制 | 第19-22页 |
2 实验方法 | 第22-35页 |
·shRNA 真核表达载体的设计和构建 | 第22-24页 |
·细胞培养 | 第24-25页 |
·真核表达载体转染细胞 | 第25-26页 |
·MTT 法检测细胞体外生长情况 | 第26-27页 |
·细胞形态学的改变 | 第27页 |
·流式细胞仪(FCM ) 分析细胞凋亡 | 第27页 |
·Westernblot 检测细胞中蛋白表达情况 | 第27-29页 |
·人端粒酶逆转录酶(hTERT)的表达检测 | 第29-32页 |
·TRAP-PCR 银染法检测端粒酶活性 | 第32-34页 |
·统计学分析 | 第34-35页 |
第二章 实验结果 | 第35-43页 |
1 PGENESIL-1-SP1 真核表达载体的鉴定 | 第35-37页 |
·pGenesil-1-Sp1 酶切结果 | 第35页 |
·基因测序结果 | 第35-37页 |
2 PGENESIL-1-SP1 转染SW480 细胞及转染效率 | 第37页 |
3 SP1 基因沉默对SW480 细胞形态学的影响 | 第37-38页 |
4 MTT 实验结果 | 第38-39页 |
5 流式细胞术(FCM)分析细胞的凋亡 | 第39-40页 |
6 转染PGENESIL-1-SP1 后SP11 在大肠癌细胞中的蛋白表达 | 第40-41页 |
7 SP1 沉默后对大肠癌细胞HTERT 表达的影响 | 第41-42页 |
8 SP1 沉默后对大肠癌细胞端粒酶活性的影响 | 第42-43页 |
第三章 讨论 | 第43-47页 |
第四章 结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-52页 |
综述 | 第52-60页 |
参考文献 | 第57-60页 |
个人简介 | 第60-61页 |
致谢 | 第61页 |