| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-26页 |
| ·课题的提出 | 第10-11页 |
| ·国内外前人研究进展 | 第11-25页 |
| ·青枯病病原(Ralstonia solanacearum)研究进展 | 第11-14页 |
| ·Ralstonia solanacearum致病机理 | 第11-13页 |
| ·Ralstonia solanacearum基因组分析 | 第13-14页 |
| ·马铃薯青枯病抗性的遗传分析 | 第14-15页 |
| ·马铃薯青枯病抗性的育种研究 | 第15-17页 |
| ·2n配子的利用 | 第15页 |
| ·体细胞杂交技术的应用 | 第15-16页 |
| ·转基因技术的应用 | 第16-17页 |
| ·SRAP标记原理及应用 | 第17-21页 |
| ·SRAP标记引物设计原理 | 第17-19页 |
| ·SRAP标记特征 | 第19页 |
| ·SRAP标记的应用 | 第19-21页 |
| ·马铃薯青枯病抗性分子标记的应用 | 第21页 |
| ·蛋白酶抑制子基因研究进展 | 第21-22页 |
| ·TAIL-PCR原理 | 第22-25页 |
| ·本课题研究的目的与内容 | 第25-26页 |
| ·研究目的 | 第25页 |
| ·研究内容 | 第25-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-36页 |
| ·实验材料 | 第26页 |
| ·实验方法 | 第26-36页 |
| ·群体材料的繁殖与保存 | 第26-27页 |
| ·DNA提取及纯化 | 第27-28页 |
| ·马铃薯基因组总DNA大量抽提法 | 第27页 |
| ·马铃薯基因组总DNA小量抽提法 | 第27-28页 |
| ·SRAP分析 | 第28-29页 |
| ·SRAP引物 | 第28页 |
| ·用群分法建立抗感DNA池 | 第28-29页 |
| ·SRAP-PCR反应体系及反应程序 | 第29页 |
| ·连锁分析 | 第29页 |
| ·蛋白酶抑制子I基因的克隆 | 第29-31页 |
| ·DNA模板材料 | 第29页 |
| ·蛋白酶抑制子I基因部分序列的特异PCR扩增 | 第29-30页 |
| ·蛋白酶抑制子基因序列的TAIL-PCR扩增 | 第30-31页 |
| ·PCR扩增产物分析 | 第31页 |
| ·PCR扩增片段的回收及克隆 | 第31-35页 |
| ·PCR扩增片段的回收 | 第31-32页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第32页 |
| ·PCR扩增片段的克隆 | 第32-35页 |
| ·PCR扩增片段的测序 | 第35页 |
| ·生物信息学分析 | 第35-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-48页 |
| ·青枯病抗性分子标记的筛选 | 第36-42页 |
| ·抗病基因池和感病基因池的构建 | 第36页 |
| ·SRAP标记筛选 | 第36-42页 |
| ·引物在亲本及抗感基因池中的 PCR扩增 | 第36-40页 |
| ·引物me3-em2在ED和CE群体中的PCR扩增 | 第40页 |
| ·标记M32在ED群体和CE群体中的连锁分析 | 第40-41页 |
| ·SRAP标记M32的信息分析 | 第41-42页 |
| ·蛋白酶抑制子I基因的克隆 | 第42-48页 |
| ·蛋白酶抑制子I基因的克隆策略 | 第42页 |
| ·蛋白酶抑制子I基因序列的特异 PCR扩增 | 第42-44页 |
| ·蛋白酶抑制子I基因的测序与生物信息分析 | 第44-48页 |
| ·PI-2214核酸序列分析及基因预测 | 第44-45页 |
| ·PI-2214与已知部分蛋白酶抑制子I基因的同源性分析 | 第45-48页 |
| 4 讨论 | 第48-51页 |
| ·影响群分法(BSA)准确性的因素 | 第48-49页 |
| ·SRAP标记的有效性 | 第49-50页 |
| ·TAIL-PCR基因克隆 | 第50页 |
| ·蛋白酶抑制子I基因与植物抗性 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-59页 |
| 附录 1:标记 M32与田间鉴定*的共分离情况统计 | 第59-62页 |
| 附录 2.克隆基因序列与已知蛋白酶抑制子基因核酸序列比较 | 第62-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
