| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 第1章 综述 | 第8-23页 |
| ·等温扩增技术及其研究现状 | 第8-10页 |
| ·环介导等温扩增LAMP技术概述 | 第10-13页 |
| ·LAMP的基本特点 | 第10-11页 |
| ·LAMP反应的特殊性及其反应体系 | 第11-13页 |
| ·特殊性 | 第11-12页 |
| ·LAMP反应体系 | 第12-13页 |
| ·LAMP工作原理 | 第13-16页 |
| ·LAMP技术的应用 | 第16-20页 |
| ·病毒病原体的检测 | 第16-18页 |
| ·人类疱疹病毒的检测 | 第16-17页 |
| ·严重急性呼吸综合症冠状病毒(SARS-CoV)的检测 | 第17页 |
| ·禽流感病毒(Human Influenza A Viruses)的检测 | 第17页 |
| ·传染性造血器官坏死病毒(IHNV)的检测 | 第17页 |
| ·狂犬病毒(CDV)的检测 | 第17页 |
| ·番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)的检测 | 第17-18页 |
| ·细菌病原体的检测 | 第18-19页 |
| ·分枝杆菌的检测 | 第18页 |
| ·牙周细菌的检测 | 第18页 |
| ·艰难梭状芽孢杆菌的检测 | 第18-19页 |
| ·大肠杆菌O157:H7的检测 | 第19页 |
| ·真菌病原体的检测 | 第19页 |
| ·寄生虫病的检测 | 第19-20页 |
| ·疟疾病原体的检测 | 第19页 |
| ·非洲锥体虫的检测 | 第19页 |
| ·巴贝西虫的检测 | 第19-20页 |
| ·其它方面的应用 | 第20页 |
| ·转基因食品(GMOs)的检测 | 第20页 |
| ·动物胚胎性别鉴定 | 第20页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第20-23页 |
| 第2章 材料与方法 | 第23-38页 |
| ·材料与试剂 | 第23-25页 |
| ·仪器和设备 | 第23页 |
| ·菌株和培养基 | 第23-24页 |
| ·嗜水气单胞菌菌株 | 第23页 |
| ·嗜水气单胞菌培养基 | 第23-24页 |
| ·引物 | 第24-25页 |
| ·主要酶和试剂 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-38页 |
| ·实验技术路线及LAMP主要操作 | 第25-26页 |
| ·菌种的培养 | 第26页 |
| ·Ah基因组DNA的提取 | 第26-27页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测DNA基因组 | 第27-28页 |
| ·DNA浓度的测定 | 第28页 |
| ·Ah菌液的细胞计数 | 第28-29页 |
| ·LAMP反应及引物设计 | 第29-31页 |
| ·主要试剂 | 第29页 |
| ·LAMP反应引物的设计 | 第29-31页 |
| ·第一套引物 | 第30页 |
| ·第二套引物 | 第30-31页 |
| ·建立LAMP的反应体系 | 第31-38页 |
| ·第一套引物正交实验 | 第31-32页 |
| ·加入甜菜碱的对比实验 | 第32页 |
| ·第二套引物正交实验及LAMP体系的建立 | 第32-33页 |
| ·浓度梯度实验 | 第33-34页 |
| ·LAMP浓度梯度实验 | 第33-34页 |
| ·PCR浓度梯度实验 | 第34页 |
| ·特异性的鉴定 | 第34-35页 |
| ·时间梯度实验 | 第35-36页 |
| ·活菌浓度梯度实验 | 第36-38页 |
| ·菌液的简单处理 | 第36页 |
| ·LAMP实验 | 第36页 |
| ·PCR实验 | 第36-38页 |
| 第3章 结果与分析 | 第38-50页 |
| ·基因组DNA结果分析 | 第38-39页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第38-39页 |
| ·LAMP分析 | 第39-43页 |
| ·第一套引物建立体系 | 第39-42页 |
| ·第二套引物建立体系 | 第42-43页 |
| ·LAMP灵敏度的鉴定 | 第43-45页 |
| ·LAMP检测嗜水气单胞菌 | 第43-44页 |
| ·PCR检测嗜水气单胞菌 | 第44-45页 |
| ·LAMP特异性的鉴定 | 第45-46页 |
| ·加环引物的LAMP时间梯度分析 | 第46-47页 |
| ·活菌LAMP浓度梯度分析 | 第47-50页 |
| ·活菌浓度梯度LAMP分析 | 第47-48页 |
| ·活菌浓度梯度PCR分析 | 第48-50页 |
| 第4章 讨论 | 第50-53页 |
| ·建立LAMP检测体系出现的问题 | 第50页 |
| ·环介导等温扩增LAMP方法检测嗜水气单胞菌Ah方法学评价 | 第50-51页 |
| ·今后的进一步研究工作 | 第51-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 攻读学位期间研究成果 | 第58页 |
