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莠去津降解细菌HB-5的鉴定、发酵及其降解酶初步纯化的研究

中文摘要第1-12页
英文摘要第12-15页
1 引言第15-28页
   ·莠去津的结构和理化性质第15页
   ·莠去津的除草机理及应用概况第15-16页
   ·莠去津在生物体内和环境中的代谢第16-18页
     ·动植物体内的代谢第16-17页
     ·水环境、土壤中的降解代谢第17-18页
   ·莠去津的污染状况及生态毒理学效应第18-20页
     ·莠去津的污染状况第18-19页
     ·莠去津污染的生态毒理学效应第19-20页
   ·莠去津生物降解第20-22页
     ·降解莠去津的微生物第20-21页
     ·莠去津生物降解的影响因素第21页
     ·莠去津生物降解研究进展第21-22页
   ·分子生物学方法鉴定细菌现状第22-23页
   ·莠去津降解菌的摇瓶发酵研究第23-24页
   ·酶的分离纯化第24-26页
   ·本研究的目的与意义第26-28页
2 材料与方法第28-42页
   ·药品试剂第28-29页
   ·仪器设备第29-30页
   ·菌种和培养基第30页
   ·降解菌的培养及其降解酶的提取第30-31页
     ·降解菌的培养第30页
     ·降解酶的提取第30-31页
   ·莠去津降解率的测定第31-32页
     ·莠去津降解酶酶促反应第31页
     ·水样中莠去津的GC-FID 色谱分析条件第31页
     ·降解率的计算第31-32页
   ·16S rDNA 片段扩增和序列分析第32-36页
     ·细菌总DNA 的提取第32页
     ·16S rDNA 片段的 PCR 扩增第32-33页
     ·PCR 产物的纯化第33-34页
     ·质粒载体与目的DNA 连接第34页
     ·感受态细胞制备第34-35页
     ·转化第35页
     ·重组质粒的检测第35页
     ·16S rDNA 基因的核苷酸序列测定第35-36页
     ·16S rDNA 的序列分析第36页
   ·降解菌发酵培养基与发酵条件的研究第36-39页
     ·降解菌发酵培养基的优化第36-38页
       ·最优碳源浓度的选择第36页
       ·最优氮源浓度的选择第36页
       ·最优无机盐浓度的选择第36-37页
       ·微量元素溶液终浓度的选择第37-38页
       ·发酵培养基最佳配方的均匀试验设计第38页
     ·降解菌发酵条件的优化第38页
       ·最佳培养时间的选择第38页
       ·最佳接种量的选择第38页
       ·最适初始 pH 值的选择第38页
       ·最佳装液量的选择第38页
     ·发酵培养基与发酵条件的验证试验第38-39页
   ·降解酶的分离纯化第39-42页
     ·硫酸铵分级沉淀第39页
     ·透析脱盐第39页
     ·DEAE-Sepharose FF 阴离子交换柱层析第39-40页
     ·Sephacryl S-300HR 分子筛层析第40-42页
3 结果与分析第42-58页
   ·降解菌HB-5 的16S rDNA 序列分析第42-45页
     ·16S rDNA 基因 PCR 扩增结果第42页
     ·菌株HB-5 的16S rDNA 序列测定结果第42-43页
     ·菌株 HB-5 的16S rDNA 序列分析第43-44页
     ·16S rDNA 系统进化树的建立第44-45页
   ·降解菌发酵培养基与发酵条件的研究第45-54页
     ·降解菌发酵培养基的优化第45-51页
       ·碳源浓度的选择第45-46页
       ·氮源浓度的选择第46-47页
       ·不同无机盐浓度的选择第47-49页
       ·微量元素溶液终浓度的选择第49页
       ·发酵配方均匀试验设计结果第49-51页
     ·降解菌发酵条件的优化第51-54页
       ·培养时间的选择第51页
       ·接种量的选择第51-52页
       ·初始 pH 值的选择第52-53页
       ·装液量的选择第53-54页
     ·发酵培养基与发酵条件优化结果的验证第54页
   ·莠去津降解酶的分离纯化第54-58页
     ·硫酸铵分级沉淀第54-55页
     ·DEAE-Sepharose FF 阴离子交换柱层析第55-56页
     ·Sephacryl S-300HR 分子筛层析第56-58页
4 讨论第58-63页
   ·莠去津降解酶研究第58页
   ·降解菌的菌株鉴定第58-60页
   ·降解菌的发酵技术第60页
   ·降解酶的纯化技术第60-63页
5 结论第63-64页
   ·降解菌HB-5 菌株鉴定第63页
   ·降解酶发酵条件研究第63页
   ·降解酶的分离纯化第63-64页
本研究的创新之处第64-65页
参考文献第65-76页
附录第76-77页
致谢第77-78页
硕士期间发表论文第78页

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