| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-14页 |
| 综述部分 | 第14-56页 |
| 第一章 成体干细胞及其可塑性研究 | 第14-28页 |
| ·引言 | 第14页 |
| ·成体干细胞的生物学特性 | 第14-15页 |
| ·成体干细胞发育来源的可能模式 | 第15-16页 |
| ·成体干细胞的可塑性 | 第16-18页 |
| ·骨髓组织 | 第16-17页 |
| ·神经干细胞 | 第17-18页 |
| ·皮肤干细胞 | 第18页 |
| ·其它干细胞 | 第18页 |
| ·成体干细胞可塑性实验中供体细胞的追踪 | 第18-19页 |
| ·追踪供体细胞的方法 | 第19页 |
| ·供体细胞分化状态的确定 | 第19页 |
| ·成体干细胞可塑性的几种假设 | 第19-21页 |
| ·成体干细胞的发育不均一性 | 第20页 |
| ·组织中干细胞的异质性假说 | 第20页 |
| ·“细胞融合”学说 | 第20-21页 |
| ·成体干细胞的可塑性有多大 | 第21页 |
| ·成体干细胞可塑性的调控机制 | 第21-23页 |
| ·外源性调控 | 第22页 |
| ·内源性调控 | 第22页 |
| ·环境信号对成体干细胞可塑性的影响 | 第22-23页 |
| ·成体干细胞的临床应用 | 第23-25页 |
| ·成体干细胞临床应用研究现状 | 第23-24页 |
| ·成体干细胞潜在的临床应用 | 第24-25页 |
| ·成体干细胞与人体生物组织工程 | 第25页 |
| ·成体干细胞研究存在问题 | 第25-28页 |
| 第二章 神经干细胞体外扩增技术研究进展 | 第28-44页 |
| ·引言 | 第28页 |
| ·中枢神经系统发育过程中神经干细胞的发生 | 第28-33页 |
| ·中枢神经系统神经干细胞 | 第29-30页 |
| ·神经嵴干细胞 | 第30-31页 |
| ·室管膜下带神经干细胞 | 第31-32页 |
| ·海马部神经干细胞 | 第32-33页 |
| ·神经干细胞的多潜能性 | 第33-35页 |
| ·神经干细胞分化潜能 | 第33页 |
| ·神经干细胞克隆形成潜能 | 第33-35页 |
| ·神经干细胞的分离培养 | 第35-41页 |
| ·神经干细胞的分离 | 第35-36页 |
| ·神经干细胞的大量培养 | 第36-39页 |
| ·神经干细胞的传代培养 | 第39-41页 |
| ·神经干细胞的检测 | 第41-44页 |
| ·神经系统中细胞的特征蛋白 | 第41-42页 |
| ·神经干细胞的检测 | 第42-44页 |
| 第三章 神经干细胞永生化与端粒和端粒酶 | 第44-56页 |
| ·永生化神经干细胞系概况 | 第44-49页 |
| ·细胞永生化中端粒和端粒酶的作用 | 第45-47页 |
| ·细胞寿命与端粒酶 | 第47-49页 |
| ·细胞基因转染常用方法 | 第49-53页 |
| ·传统转染技术 | 第49-52页 |
| ·纳米转染技术 | 第52-53页 |
| ·神经干细胞临床应用 | 第53-55页 |
| ·动物模型：实验的有效性和实用性 | 第53-54页 |
| ·神经干细胞的临床应用 | 第54-55页 |
| ·结语 | 第55-56页 |
| 试验部分 | 第56-106页 |
| 前言 | 第56-58页 |
| 第四章 大鼠胎儿神经干细胞培养体系的建立 | 第58-72页 |
| ·引言 | 第58页 |
| ·材料和方法 | 第58-64页 |
| ·材料 | 第58-61页 |
| ·方法 | 第61-64页 |
| ·结果 | 第64-69页 |
| ·神经干细胞的体外生长特性 | 第64页 |
| ·大鼠胎儿NSCs 的多能性鉴定 | 第64-66页 |
| ·不同培养液对大鼠胎儿NSCs 增殖的影响 | 第66页 |
| ·传代中不同酶消化对大鼠胎儿NSCs 的影响 | 第66-68页 |
| ·不同培养方法对大鼠胎儿NSCs 增殖的影响 | 第68-69页 |
| ·讨论 | 第69-71页 |
| ·不同培养液对大鼠胎儿大脑皮层源性NSCs 增殖的影响 | 第69-70页 |
| ·传代中不同酶消化对大鼠胎儿NSCs 的影响 | 第70页 |
| ·悬浮法和不同底物贴壁法对大鼠胎儿神经干细胞增殖的影响 | 第70-71页 |
| ·小结 | 第71-72页 |
| 第五章 大鼠胎儿神经干细胞超低温冷冻保存和体外诱导分化试验 | 第72-79页 |
| ·引言 | 第72页 |
| ·材料与方法 | 第72-74页 |
| ·材料 | 第72-73页 |
| ·方法 | 第73-74页 |
| ·结果 | 第74-77页 |
| ·超低温冷冻保存对大鼠胎儿NSCs 的影响 | 第74-75页 |
| ·大鼠胎儿NSCs 诱导分化及免疫细胞化学检测 | 第75-77页 |
| ·讨论 | 第77-78页 |
| ·超低温冻存对大鼠胎儿神经干细胞的影响 | 第77页 |
| ·大鼠胎儿NSCs 的诱导分化 | 第77-78页 |
| ·小结 | 第78-79页 |
| 第六章 PEGFP-N1-HTERT 真核表达载体的构建与鉴定 | 第79-90页 |
| ·引言 | 第79页 |
| ·材料与方法 | 第79-84页 |
| ·材料 | 第79-80页 |
| ·方法 | 第80-84页 |
| ·结果 | 第84-88页 |
| ·质粒pC1-neo-hTERT 的EcoR I 和Sal I 双酶切 | 第84页 |
| ·pEGFP-N1 和pC1-neo-hTERT 的EcoR I 和Sal I 双酶切回收产物 | 第84-85页 |
| ·pEGFP-N1-hTERT 重组质粒的双酶切鉴定、PCR 鉴定、测序和真核表达 | 第85-88页 |
| ·讨论 | 第88-89页 |
| ·小结 | 第89-90页 |
| 第七章 大鼠胎儿神经干细胞的永生化与检测 | 第90-106页 |
| ·引言 | 第90页 |
| ·材料与方法 | 第90-97页 |
| ·材料 | 第90-91页 |
| ·方法 | 第91-97页 |
| ·结果 | 第97-103页 |
| ·转染pEGFP-N1-hTERT 重组质粒大鼠胎儿NSCs 的GFP 表达与增殖 | 第97-98页 |
| ·转染pEGFP-N1-hTERT 重组质粒大鼠胎儿NSCs 多能性鉴定 | 第98-99页 |
| ·转染重组质粒大鼠胎儿NSCs 中hTERT 基因表达RT-PCR 检测 | 第99-100页 |
| ·转染pEGFP-N1-hTERT 重组质粒大鼠胎儿NSCs Western-blot 检测 | 第100页 |
| ·转染pEGFP-N1-hTERT 重组质粒大鼠胎儿NSCs 致瘤性检测 | 第100页 |
| ·转染pEGFP-N1-hTERT 重组质粒大鼠胎儿NSCs 中CD133~＋细胞增殖检测 | 第100-101页 |
| ·转染pEGFP-N1-hTERT 重组质粒大鼠胎儿NSCs 的细胞周期特性 | 第101-103页 |
| ·讨论 | 第103-104页 |
| ·转染pEGFP-N1-hTERT 重组质粒大鼠胎儿NSCs 的多潜能性鉴定 | 第103页 |
| ·转染pEGFP-N1-hTERT 重组质粒大鼠胎儿NSCs 的分子生物学检测 | 第103-104页 |
| ·转染pEGFP-N1-hTERT 重组质粒大鼠胎儿NSCs 中CD133~+细胞增殖特性 | 第104页 |
| ·转染pEGFP-N1-hTERT 重组质粒的大鼠胎儿NSCs 的细胞周期特性 | 第104页 |
| ·小结 | 第104-106页 |
| 结论 | 第106-107页 |
| 创新点 | 第107-108页 |
| 进一步研究的设想 | 第108-109页 |
| 参考文献 | 第109-127页 |
| 附录1 重组质粒PEGFP-N1-HTERT 测序结果 | 第127-134页 |
| 附录2 缩略语 | 第134-135页 |
| 致谢 | 第135-136页 |
| 作者简介 | 第136页 |
