| 中文摘要 | 第1-12页 |
| 英文摘要 | 第12-14页 |
| 1 引言 | 第14-37页 |
| ·植物的耐盐性 | 第14-21页 |
| ·盐胁迫对植物的危害 | 第14-15页 |
| ·植物对盐胁迫的反应 | 第15-21页 |
| ·耐盐基因和耐盐基因工程 | 第21-26页 |
| ·渗透调节物质合成基因 | 第24页 |
| ·编码细胞保护蛋白的基因 | 第24页 |
| ·与细胞排毒、抗氧化防御能力相关的酶基因 | 第24-25页 |
| ·与信号转导和基因表达相关的调控基因 | 第25-26页 |
| ·维持细胞离子平衡的转运蛋白基因 | 第26页 |
| ·Na~+/H~+反向转运蛋白 | 第26-33页 |
| ·Na~+/H~+反向转运蛋白的结构特征 | 第27-28页 |
| ·质膜 Na~+/H~+ 反向转运蛋白基因 5051 及其调控途径 | 第28-29页 |
| ·液泡膜Na~+/H~+反向转运蛋白基因及其调控途径 | 第29-32页 |
| ·Na~+/H~+ 反向转运蛋白基因工程 | 第32-33页 |
| ·草坪草耐盐基因工程研究进展 | 第33-37页 |
| ·转化受体和转化方法 | 第34-35页 |
| ·禾本科草坪草耐盐基因工程 | 第35-37页 |
| 2 材料与方法 | 第37-57页 |
| ·材料 | 第37-38页 |
| ·植物材料 | 第37页 |
| ·菌株与质粒 | 第37页 |
| ·酵母菌株和载体 | 第37页 |
| ·酶及生化试剂 | 第37页 |
| ·PCR引物 | 第37-38页 |
| ·实验方法 | 第38-57页 |
| ·总RNA 的提取 | 第38-39页 |
| ·RNA 纯化 | 第39-40页 |
| ·cDNA 第一条链的合成 | 第40页 |
| ·cDNA 纯化 | 第40-41页 |
| ·对cDNA 进行末端加尾 | 第41页 |
| ·植物基因组DNA 的提取 | 第41-42页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第42页 |
| ·碱法小量质粒DNA 的提取 | 第42-43页 |
| ·DNA 序列测定 | 第43页 |
| ·根癌农杆菌GV3101 或C58C1 感受态细胞的制备与转化 | 第43-44页 |
| ·目的基因 AeNHX1 和AeNHX2 的分离 | 第44-45页 |
| ·凝胶电泳中DNA片段的回收 | 第45页 |
| ·Northern 杂交分析 | 第45-48页 |
| ·Southern 杂交分析 | 第48页 |
| ·AeNHX1-GFP 融合蛋白表达载体转化洋葱表皮细胞 | 第48-49页 |
| ·酵母表达载体的构建与转化 | 第49-51页 |
| ·拟南芥的无土栽培、转化及分析 | 第51-52页 |
| ·羊茅的转化与鉴定 | 第52-54页 |
| ·高羊茅耐盐实验 | 第54页 |
| ·光合速率的测定 | 第54页 |
| ·荧光参数测定 | 第54-55页 |
| ·叶片水势、饱和渗透势的测定 | 第55页 |
| ·离子含量的测定 | 第55-57页 |
| 3 结果与分析 | 第57-84页 |
| ·长穗偃麦草液泡膜Na~+/H~+反向转运蛋白基因的分离及表达分析 | 第57-68页 |
| ·长穗偃麦草液泡膜Na~+/H~+反向转运蛋白基因的分离 | 第57-58页 |
| ·AeNHX1和AeNHX2基因的序列分析 | 第58-65页 |
| ·AeNHX1-GFP 融合蛋白的亚细胞定位 | 第65-66页 |
| ·AeNHX1基因在长穗偃麦草中的表达分析 | 第66-67页 |
| ·AeNHX1互补酵母突变体ATX3碱性阳离子敏感缺陷型 | 第67-68页 |
| ·AeNHX1提高转基因植物的耐盐性 | 第68-84页 |
| ·AeNHX1提高转基因拟南芥的耐盐性 | 第68-75页 |
| ·AeNHX1 提高转基因高羊茅的耐盐性 | 第75-84页 |
| 4 讨论 | 第84-88页 |
| ·AeNHX1 是组成型表达的液泡膜Na~+/H~+反向转运蛋白基因 | 第84-85页 |
| ·过量表达AeNHX1能显著提高酵母、拟南芥和高羊茅的耐盐性 | 第85-86页 |
| ·Na~+/H~+反向转运蛋白基因的耐盐基因工程策略 | 第86-88页 |
| 5 结论 | 第88-90页 |
| 参考文献 | 第90-106页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第106-107页 |
| 致谢 | 第107页 |
