英文缩略词 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
引言 | 第11-25页 |
1. 鸡传染性支气管炎的基本概况 | 第11-13页 |
2. 鸡传染性支气管炎病毒 | 第13-14页 |
3. IBV的主要结构蛋白与功能 | 第14-17页 |
4. IBV分子变异机理 | 第17-19页 |
5. IBV疫苗的研究进展 | 第19-20页 |
6. IBV的流行病学 | 第20页 |
7. IBV的临床症状和病理变化 | 第20-21页 |
8. IBV的诊断和防治 | 第21-25页 |
研究内容 | 第25-46页 |
试验一 鸡传染性支气管炎51 基因在大肠杆菌中的分段表达 | 第25-36页 |
1. 材料与方法 | 第25-31页 |
·IBV Z 株 51 基因重组质粒 | 第25页 |
·PCR 引物 | 第25页 |
·PCR 反应扩增 DNA 片段 | 第25-26页 |
·PCR 产物 DNA 电泳 | 第26-27页 |
·PCR 产物和表达载体的酶切 | 第27页 |
·PCR 产物的回收与定量 | 第27页 |
·DNA 的连接反应 | 第27-28页 |
·BL21 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第28页 |
·连接产物的转化 | 第28-29页 |
·质粒 DNA 的提取 | 第29页 |
·重组质粒 DNA 的酶切鉴定 | 第29-30页 |
·阳性克隆序列测定 | 第30页 |
·重组菌的诱导表达 | 第30页 |
·十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳( SDS-PAGE) | 第30-31页 |
结果 | 第31-33页 |
·、PCR 扩增 51 基因的 A、B 两段 | 第31页 |
·表达性载体的构建 | 第31-32页 |
·融合蛋白的诱导 | 第32-33页 |
讨论 | 第33-36页 |
·、S1基因的分子生物学地位 | 第33-34页 |
·关于引物的设计 | 第34页 |
·表达载体的选择 | 第34-35页 |
·出现不完全表达蛋白的分析 | 第35-36页 |
试验二 表达产物的纯化及生物活性的初步鉴定 | 第36-46页 |
材料与方法 | 第36-39页 |
·抗体 | 第36页 |
·鸡胚、IBV 毒株 | 第36页 |
·Western -blotting 分析 | 第36-37页 |
·表达产物的纯化 | 第37页 |
·抗体的制备 | 第37-38页 |
·免疫家兔 | 第37-38页 |
·收获抗体 | 第38页 |
·气管环试验 | 第38页 |
·气管环的制备 | 第38页 |
·、气管环半数感染量(TOCID_(50))的测定 | 第38页 |
·、气管环试验 | 第38页 |
·纯化 GST 融合蛋白 ELISA 试验 | 第38-39页 |
结果 | 第39-43页 |
·诱导产物的 Western-blot 检测 | 第39-40页 |
·GST融合蛋白的纯化 | 第40-41页 |
·ELISA 试验结果 | 第41-42页 |
·气管环试验结果 | 第42-43页 |
讨论 | 第43-46页 |
·用 DNASTAR 软件分析 IBV 51 基因的抗原性 | 第43-44页 |
·Western-blot 结果分析 | 第44页 |
·融合蛋白的大量诱导和纯化 | 第44-45页 |
·气管环中和试验 | 第45页 |
·ELISA 试验 | 第45-46页 |
结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-58页 |
附录 | 第58-63页 |
个人简介及攻读硕士研究生期间的论文情况 | 第63-64页 |
致谢 | 第64页 |