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鸡传染性支气管炎S1基因在大肠杆菌中的表达及其生物活性的初步鉴定

英文缩略词第1-8页
中文摘要第8-9页
英文摘要第9-11页
引言第11-25页
 1. 鸡传染性支气管炎的基本概况第11-13页
 2. 鸡传染性支气管炎病毒第13-14页
 3. IBV的主要结构蛋白与功能第14-17页
 4. IBV分子变异机理第17-19页
 5. IBV疫苗的研究进展第19-20页
 6. IBV的流行病学第20页
 7. IBV的临床症状和病理变化第20-21页
 8. IBV的诊断和防治第21-25页
研究内容第25-46页
 试验一 鸡传染性支气管炎51 基因在大肠杆菌中的分段表达第25-36页
  1. 材料与方法第25-31页
   ·IBV Z 株 51 基因重组质粒第25页
   ·PCR 引物第25页
   ·PCR 反应扩增 DNA 片段第25-26页
   ·PCR 产物 DNA 电泳第26-27页
   ·PCR 产物和表达载体的酶切第27页
   ·PCR 产物的回收与定量第27页
   ·DNA 的连接反应第27-28页
   ·BL21 大肠杆菌感受态细胞的制备第28页
   ·连接产物的转化第28-29页
   ·质粒 DNA 的提取第29页
   ·重组质粒 DNA 的酶切鉴定第29-30页
   ·阳性克隆序列测定第30页
   ·重组菌的诱导表达第30页
   ·十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳( SDS-PAGE)第30-31页
  结果第31-33页
   ·、PCR 扩增 51 基因的 A、B 两段第31页
   ·表达性载体的构建第31-32页
   ·融合蛋白的诱导第32-33页
  讨论第33-36页
   ·、S1基因的分子生物学地位第33-34页
   ·关于引物的设计第34页
   ·表达载体的选择第34-35页
   ·出现不完全表达蛋白的分析第35-36页
 试验二 表达产物的纯化及生物活性的初步鉴定第36-46页
  材料与方法第36-39页
   ·抗体第36页
   ·鸡胚、IBV 毒株第36页
   ·Western -blotting 分析第36-37页
   ·表达产物的纯化第37页
   ·抗体的制备第37-38页
     ·免疫家兔第37-38页
     ·收获抗体第38页
   ·气管环试验第38页
     ·气管环的制备第38页
     ·、气管环半数感染量(TOCID_(50))的测定第38页
     ·、气管环试验第38页
   ·纯化 GST 融合蛋白 ELISA 试验第38-39页
  结果第39-43页
   ·诱导产物的 Western-blot 检测第39-40页
     ·GST融合蛋白的纯化第40-41页
   ·ELISA 试验结果第41-42页
   ·气管环试验结果第42-43页
  讨论第43-46页
   ·用 DNASTAR 软件分析 IBV 51 基因的抗原性第43-44页
   ·Western-blot 结果分析第44页
   ·融合蛋白的大量诱导和纯化第44-45页
   ·气管环中和试验第45页
   ·ELISA 试验第45-46页
结论第46-47页
参考文献第47-58页
附录第58-63页
个人简介及攻读硕士研究生期间的论文情况第63-64页
致谢第64页

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