目录 | 第1-8页 |
图表目录 | 第8-10页 |
中文摘要 | 第10-12页 |
英文摘要 | 第12-15页 |
第一章 引言 | 第15-48页 |
第一节 乙酰胆碱酯酶研究概况 | 第15-35页 |
1.乙酰胆碱酯酶(AChE)的功能 | 第15-18页 |
2.胆碱酯酶及AChE的研究历史 | 第18-20页 |
3.AChE的分子型 | 第20-23页 |
4.AChE的组织分布 | 第23-24页 |
5.AChE的结构 | 第24-28页 |
6.AChE的基因结构 | 第28-31页 |
7.AChE的抑制剂及复能剂 | 第31-35页 |
第二节 昆虫AChE的研究概况 | 第35-38页 |
1.昆虫AChE的基因结构 | 第35-37页 |
2.靶标酶AChE引起的昆虫抗药性 | 第37-38页 |
第三节 中华蜜蜂与意大利蜜蜂研究概述 | 第38-48页 |
1.蜜蜂种的分布及东方蜜蜂和西方蜜蜂的生物学特性 | 第38-40页 |
2.蜜蜂的经济价值及农药对蜜蜂的影响 | 第40-43页 |
3.国内外蜜蜂AChE的研究现状及对蜜蜂AChE研究的意义 | 第43-47页 |
4.结语 | 第47-48页 |
第二章 正交试验法确定意大利蜜蜂头部AChE反应的最适条件 | 第48-63页 |
1 材料和方法 | 第49-52页 |
·供试虫源 | 第49页 |
·化学试剂 | 第49-50页 |
·仪器设备 | 第50页 |
·0.1mol/L磷酸缓冲液的配制 | 第50页 |
·0.4mmol/L DTNB试剂的配制 | 第50页 |
·考马斯亮兰G-250染色液的配制: | 第50页 |
·酶液制备 | 第50页 |
·AChE活性测定 | 第50-51页 |
·蛋白质含量测定 | 第51页 |
·正交设计 | 第51-52页 |
·蜜蜂头部AChE比活力的测定 | 第52页 |
2 结果与分析 | 第52-60页 |
·蜜蜂头部AChE比活力测定 | 第52-53页 |
·正交试验结果的极差分析 | 第53-56页 |
·正交试验结果的方差分析 | 第56-57页 |
·实验因素各水平间的多重比较 | 第57-60页 |
3 讨论 | 第60-63页 |
第三章 中华蜜蜂和意大利蜜蜂AChE生物化学性质的比较研究 | 第63-85页 |
第一节 中华蜜蜂和意大利蜜蜂AChE的活性分布 | 第64-70页 |
1 材料和方法 | 第65-66页 |
·供试虫源 | 第65页 |
·化学试剂 | 第65页 |
·仪器设备 | 第65页 |
·酶液制备 | 第65页 |
·中华蜜蜂和意大利蜜蜂头部、胸部、腹部AChE活性的测定 | 第65-66页 |
·中华蜜蜂和意大利蜜蜂头部AChE的亚细胞分布 | 第66页 |
·蛋白质含量测定 | 第66页 |
2 结果与分析 | 第66-68页 |
·中华蜜蜂和意大利蜜蜂AChE体躯分布的比较 | 第66-68页 |
·中华蜜蜂和意大利蜜蜂头部AChE亚细胞分布的比较 | 第68页 |
3 讨论 | 第68-70页 |
第二节 中华蜜蜂和意大利蜜蜂头部AChE的底物特异性 | 第70-74页 |
1 材料和方法 | 第70-71页 |
·供试虫源 | 第71页 |
·化学试剂 | 第71页 |
·仪器设备 | 第71页 |
·酶液制备 | 第71页 |
·米氏常数(K_m)和最大反应速率(V_(max))的测定 | 第71页 |
2 结果与分析 | 第71-72页 |
·中华蜜蜂和意大利蜜蜂头部AChE底物特异性的比较 | 第72页 |
3 讨论 | 第72-74页 |
第三节 中华蜜蜂和意大利蜜蜂头部AChE的抑制动力学研究 | 第74-85页 |
1 材利和方法 | 第74-76页 |
·供试虫源 | 第74页 |
·化学试剂 | 第74页 |
·仪器设备 | 第74页 |
·酶液制备 | 第74-75页 |
·抑制动力学常数的测定 | 第75页 |
·抑制时间进程曲线 | 第75-76页 |
2 结果与分析 | 第76-82页 |
·抑制时间进程曲线的测定 | 第76-79页 |
·抑制动力学常数的测定结果 | 第79-82页 |
3 讨论 | 第82-85页 |
第四章 中华蜜蜂和意大利蜜蜂AChE分离纯化的初步研究 | 第85-95页 |
1 材料和方法 | 第86-90页 |
·供试虫源 | 第86页 |
·化学试剂 | 第86-87页 |
·仪器设备 | 第87页 |
·纯化缓冲液的配制 | 第87页 |
·酶液制备 | 第87页 |
·PEG分级沉淀 | 第87页 |
·层析柱参数 | 第87-88页 |
·层析柱装柱、上样及洗脱方法 | 第88-89页 |
·AChE纯化方法 | 第89页 |
·AChE活性测定方法 | 第89页 |
·蛋白质含量测定 | 第89-90页 |
2 结果与分析 | 第90-93页 |
·PEG双水相萃取 | 第90-91页 |
·Sephadex G-200纯化结果 | 第91-93页 |
3 讨论 | 第93-95页 |
第五章 总结与讨论 | 第95-98页 |
参考文献 | 第98-112页 |
致谢 | 第112页 |