| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-14页 |
| 第1章 引言 | 第14-20页 |
| ·鸡球虫病的危害及防治现状 | 第14-16页 |
| ·鸡球虫差异基因的研究进展 | 第16-20页 |
| 第2章 BW4-C03、BW1-E03 基因的克隆与表达 | 第20-56页 |
| ·引言 | 第20页 |
| ·材料和方法 | 第20-40页 |
| ·实验动物 | 第20页 |
| ·实验虫株 | 第20-21页 |
| ·实验试剂 | 第21页 |
| ·实验仪器 | 第21页 |
| ·试剂配制方法 | 第21-26页 |
| ·未孢子化、孢子化卵囊、子孢子和第二代裂殖子的提取 | 第26页 |
| ·RACE 及全长引物的设计 | 第26-27页 |
| ·孢子化卵囊Total RNA 的提取及RACE 模板的制备 | 第27-30页 |
| ·5’和3’RACE 序列扩增 | 第30-33页 |
| ·全长的拼接及扩增 | 第33-34页 |
| ·BW4-C03、BW1-E03 基因的生物信息学分析 | 第34页 |
| ·BW4-C03、BW1-E03 的表达差异分析 | 第34-37页 |
| ·BW4-C03 的原核表达及鉴定 | 第37-40页 |
| ·结果 | 第40-54页 |
| ·未孢子化卵囊、孢子化卵囊、子孢子、第二代裂殖子以及不同孢子化时间卵囊的收集和纯化 | 第40页 |
| ·总RNA 的提取结果 | 第40页 |
| ·BW4-C03 和BW1-E03 cDNA 序列 | 第40-42页 |
| ·BW4-C03 和BW1-E03cDNA 生物信息学分析结果 | 第42-49页 |
| ·实时定量PCR 结果 | 第49-51页 |
| ·EtSAG 基因原核表达及鉴定 | 第51-54页 |
| ·讨论 | 第54-56页 |
| 第3章 ZB10-E05 基因的克隆表达及特性分析 | 第56-74页 |
| ·引言 | 第56页 |
| ·材料和方法 | 第56-63页 |
| ·实验动物 | 第56页 |
| ·实验虫种及细胞 | 第56页 |
| ·实验试剂 | 第56-57页 |
| ·实验仪器 | 第57页 |
| ·试剂配制 | 第57-58页 |
| ·未孢子化卵囊、孢子化卵囊、子孢子、第二代裂殖子的制备 | 第58页 |
| ·RACE 及全长cDNA 序列的获得 | 第58-59页 |
| ·ZB10-E05 基因生物信息学分析 | 第59页 |
| ·ZB10-E05 在球虫不同发育阶段表达差异分析 | 第59页 |
| ·重组蛋白的表达、鉴定及纯化 | 第59-60页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第60-61页 |
| ·间接免疫荧光实验 | 第61-62页 |
| ·体外抑制实验 | 第62-63页 |
| ·结果 | 第63-72页 |
| ·ZB10-E05 基因cDNA 全长序列的扩增 | 第63页 |
| ·ZB10-E05 基因的生物信息学分析 | 第63-66页 |
| ·ZB10-E05 不同发育阶段Real-time PCR 结果 | 第66-67页 |
| ·原核表达与Western-blot | 第67-69页 |
| ·免疫荧光定位结果 | 第69-70页 |
| ·体外抑制实验结果 | 第70-72页 |
| ·讨论 | 第72-74页 |
| 第4章 重组蛋白E05 对鸡球虫的免疫保护实验 | 第74-86页 |
| ·引言 | 第74页 |
| ·材料和方法 | 第74-78页 |
| ·实验动物 | 第74页 |
| ·实验虫株 | 第74-75页 |
| ·实验试剂 | 第75页 |
| ·实验仪器 | 第75页 |
| ·试剂配制 | 第75页 |
| ·重组蛋白的获得 | 第75页 |
| ·保护性实验方案 | 第75-76页 |
| ·保护性效果的观察 | 第76-78页 |
| ·实验结果 | 第78-82页 |
| ·卵囊产量 | 第78-79页 |
| ·病变积分 | 第79页 |
| ·增重效果 | 第79页 |
| ·抗体的检测 | 第79-80页 |
| ·细胞免疫指标检测 | 第80-82页 |
| ·讨论 | 第82-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-92页 |
| 作者简历 | 第92页 |
