中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
英文缩略表 | 第11-13页 |
1 引言 | 第13-22页 |
·逆境胁迫与信号转导 | 第13-15页 |
·细胞信号转导系统 | 第14-15页 |
·蛋白质的可逆磷酸化 | 第15页 |
·蛋白磷酸酶 | 第15-21页 |
·蛋白磷酸酶的发现 | 第15-16页 |
·蛋白磷酸酶的分类、结构及生化特性 | 第16-17页 |
·蛋白磷酸酶的生理功能 | 第17-21页 |
·调控植物生长发育 | 第18页 |
·参与植物抗逆响应 | 第18-19页 |
·参与信号转导 | 第19-20页 |
·在细胞周期和基因转录中的作用 | 第20-21页 |
·本课题的研究目的及意义 | 第21-22页 |
2 材料与方法 | 第22-44页 |
·试验材料与处理 | 第22-23页 |
·植物材料 | 第22页 |
·材料处理 | 第22页 |
·菌株与质粒 | 第22页 |
·酶及生化试剂 | 第22-23页 |
·PCR 引物 | 第23页 |
·试验方法 | 第23-44页 |
·利用TRIZOL 试剂盒提取RNA | 第23-25页 |
·利用 CTAB 法提取 RNA | 第25-26页 |
·反转录cDNA 第一条链的合成 | 第26页 |
·cDNA 全长序列的获得 | 第26-29页 |
·简并引物 PCR 获得 ZmPP2C 中间片段 | 第26-28页 |
·ZmPP2C 基因全长的分离 | 第28-29页 |
·玉米 ZmPP2C 基因的克隆及鉴定 | 第29-33页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第29页 |
·连接反应 | 第29-30页 |
·转化及克隆筛选 | 第30-31页 |
·碱法小量提取质粒 DNA | 第31-32页 |
·酶切鉴定 | 第32页 |
·序列测定和数据分析 | 第32-33页 |
·RNA 的提取、转膜及 Northern 杂交 | 第33-34页 |
·RNA 提取及电泳 | 第33页 |
·转膜及烘膜 | 第33页 |
·探针合成 | 第33-34页 |
·预杂交、杂交及放射自显影 | 第34页 |
·DNA 的提取、转膜及 Southern 杂交 | 第34-36页 |
·基因组 DNA 的提取(SDS 法) | 第34-35页 |
·基因组 DNA 的限制性内切酶消化 | 第35-36页 |
·转膜 | 第36页 |
·探针合成 | 第36页 |
·预杂交、杂交及放射自显影 | 第36页 |
·表达载体的构建 | 第36-39页 |
·碱法大量提取质粒 DNA | 第36-38页 |
·PBI-ZmPP2C 表达载体构建 | 第38-39页 |
·根癌农杆菌 C58C1 感受态细胞的制备及转化 | 第39-41页 |
·农杆菌感受态细胞的制备 | 第39-40页 |
·冻融法转化农杆菌 | 第40页 |
·农杆菌介导的烟草转化 | 第40-41页 |
·转基因烟草植株的 PCR 检测及生理指标的测定 | 第41-44页 |
·CTAB 微量法提取基因组 DNA | 第41-42页 |
·转基因烟草植株的 PCR 筛选 | 第42-43页 |
·转基因烟草 Northern 检测 | 第43页 |
·转基因烟草植株光合指标及荧光参数的测定 | 第43-44页 |
3 结果与分析 | 第44-60页 |
·玉米ZmPP2C 基因的克隆与序列分析 | 第44-50页 |
·ZmPP2C 基因中间片段的分离 | 第44-45页 |
·玉米 ZmPP2C 基因全长cDNA 的克隆 | 第45-48页 |
·五种植物蛋白磷酸酶2C 基因的同源性序列比较 | 第48-49页 |
·PP2C 序列系统发生分析 | 第49-50页 |
·ZmPP2C 基因在玉米基因组中的存在状况及其表达特性 | 第50-53页 |
·玉米 ZmPP2C 的基因组 Southern 杂交分析 | 第50-51页 |
·玉米 ZmPP2C 基因的表达分析 | 第51-53页 |
·ZmPP2C 基因的表达特性 | 第51页 |
·ZmPP2C 基因对信号调节物质和干旱胁迫的应答 | 第51-52页 |
·干旱胁迫下 ZmPP2C 基因在玉米中的表达特性 | 第52-53页 |
·低温胁迫对 ZmPP2C 基因转录表达的影响 | 第53页 |
·ZmPP2C 基因转化烟草及转基因烟草植株的生理反应 | 第53-60页 |
·正义表达载体 PBI-ZmPP2C 的构建 | 第53-55页 |
·正义表达载体的酶切鉴定 | 第55页 |
·表达载体转化农杆菌的 PCR 检测 | 第55-56页 |
·ZmPP2C 基因转化烟草及转基因植株检测 | 第56-57页 |
·转基因植株的 PCR 检测 | 第56-57页 |
·转基因植株的 Northern 检测 | 第57页 |
·低温胁迫对转基因烟草生理性状的影响 | 第57-60页 |
·低温胁迫对转基因烟草叶片光合作用的影响 | 第57-58页 |
·低温胁迫下 PSⅡ反应中心的可逆失活 | 第58-60页 |
4 讨论 | 第60-64页 |
·玉米 ZmPP2C 基因及其同源基因之间的序列分析 | 第60页 |
·玉米 ZmPP2C 基因表达模式与信号调节物质及干旱胁迫的关系 | 第60-61页 |
·逆境胁迫与 ZmPP2C 基因的表达调控 | 第61-62页 |
·玉米 ZmPP2C 基因可能的信号转导机制及其生理功能 | 第62-64页 |
5 结论 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
硕士期间发表论文情况 | 第74页 |