第一章 文献综述 | 第1-21页 |
·恶性肿瘤 | 第9页 |
·恶性肿瘤概况 | 第9页 |
·恶性肿瘤的迁移过程 | 第9页 |
·黏附分子与肿瘤 | 第9-11页 |
·黏附分子的种类 | 第9-10页 |
·黏附分子与肿瘤迁移 | 第10-11页 |
·整合素与肿瘤迁移 | 第11-19页 |
·整合素家族 | 第11-12页 |
·整合素家族分子的配体 | 第12页 |
·整合素与肿瘤 | 第12-13页 |
·肿瘤转移过程中整合素的信号传导作用 | 第13页 |
·整合素参与肿瘤的迁移与血管生成 | 第13-15页 |
·整合素的构象状态与肿瘤迁移 | 第15-18页 |
·整合素aVβ3、aVβ5 与β1 类分子与肿瘤 | 第18-19页 |
·本研究的科学前提及目的意义 | 第19-21页 |
·本研究的科学前提 | 第19-20页 |
·本研究的目的意义 | 第20-21页 |
第二章 材料与方法 | 第21-37页 |
·材料 | 第21-22页 |
·实验所用菌株、细胞株及实验动物 | 第21页 |
·与本论文有关的质粒 | 第21页 |
·主要试剂 | 第21页 |
·标准分子量 | 第21-22页 |
·方法 | 第22-37页 |
·流式细胞术检测整合素aVβ3 野生型及其突变体在CHO 中的表达 | 第22页 |
·以CHO 细胞构建SCID 小鼠肿瘤迁移动物模型 | 第22-23页 |
·SCID 小鼠肺部的组织形态学 | 第23页 |
·PCR 扩增整合素β1 和β5 突变体 | 第23-27页 |
·PCR 片段的克隆及真核表达载体的构建 | 第27-29页 |
·细胞的复苏 | 第29页 |
·培养细胞的传代 | 第29-30页 |
·细胞瞬时表达转染方法 | 第30页 |
·稳定表达细胞株的筛选 | 第30-31页 |
·细胞的冻存 | 第31页 |
·细胞蛋白质样品的制备 | 第31-32页 |
·细胞蛋白浓度的测定 | 第32页 |
·SDS-PAGE 分析细胞表达蛋白 | 第32-35页 |
·Western Blot 分析细胞表达蛋白 | 第35-37页 |
第三章 结果与分析 | 第37-48页 |
·实验引言 | 第37页 |
·流式细胞术分析整合素aVβ3 及突变体在CHO 细胞上的表达 | 第37-40页 |
·整合素aVβ3 及突变体在CHO 细胞上表达量的分析 | 第37页 |
·整合素aVβ3 野生型及突变体激活状态分析 | 第37-40页 |
·肿瘤迁移动物模型的构建 | 第40页 |
·整合素β1 亚基与β5 亚基突变体的构建 | 第40-46页 |
·整合素β3、β1 与β5 亚基同源性分析 | 第40-41页 |
·整合素β1 亚基与β5 亚基突变体的克隆策略 | 第41页 |
·PCR 扩增整合素β1 亚基与β5 亚基重叠突变小片段 | 第41-42页 |
·PCR 扩增整合素β1 亚基与β5 亚基野生型及突变全长片断 | 第42-43页 |
·整合素β1 与β5 亚基野生型及突变体表达载体的构建 | 第43-46页 |
·整合素β1 亚基野生型及突变体在COS7 细胞中的瞬时表达 | 第46页 |
·整合素aVβ5 野生型及突变体CHO 稳定细胞系的构建 | 第46-48页 |
·pEMC-3-aV 表达载体的酶切鉴定 | 第46-47页 |
·整合素aVβ5 野生型及突变体CHO 稳定表达细胞系的构建 | 第47-48页 |
第四章 讨论 | 第48-50页 |
第五章 结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
作者简介 | 第58页 |