| 中文摘要 | 第1-14页 |
| Abstract | 第14-17页 |
| 第一章 绪论 | 第17-45页 |
| §1．1 酶的膜固定化技术及其应用的研究进展 | 第17-28页 |
| §1．1．1 传统的固定化方法 | 第17-20页 |
| §1．1．1．1 吸附法 | 第17-18页 |
| §1．1．1．2 凝胶化法 | 第18页 |
| §1．1．1．3 包埋法 | 第18页 |
| §1．1．1．4 交联法 | 第18-19页 |
| §1．1．1．5 共价结合法 | 第19-20页 |
| §1．1．2 新型的固定化技术 | 第20-23页 |
| §1．1．2．1 利用光、辐射等物理技术固定化酶 | 第20-21页 |
| §1．1．2．2 定点固定化技术 | 第21-23页 |
| §1．1．2．3 多酶系统的共固定化 | 第23页 |
| §1．1．3 固定化酶膜的性质 | 第23-25页 |
| §1．1．3．1 催化活性 | 第23-24页 |
| §1．1．3．2 稳定性 | 第24页 |
| §1．1．3．3 最佳适用pH值 | 第24-25页 |
| §1．1．4 固定化酶膜的应用——酶膜生物反应器 | 第25-28页 |
| §1．2 天然的酶固定化载体材料 | 第28-34页 |
| §1．2．1 天然多聚糖 | 第28-30页 |
| §1．2．2 天然蛋白 | 第30-31页 |
| §1．2．3 脂双层 | 第31-34页 |
| §1．3 Candidarugosa脂肪酶的结构及构象特征 | 第34-42页 |
| §1．3．1 脂肪酶的结构——α／β—水解酶折叠 | 第35-36页 |
| §1．3．2 脂肪酶的活性位点 | 第36-37页 |
| §1．3．3 脂肪酶的多构象状态 | 第37页 |
| §1．3．4 脂肪酶的底物结合位点 | 第37-40页 |
| §1．3．5 脂肪酶的对映选择性 | 第40页 |
| §1．3．6 利用疏水界面活化固定脂肪酶 | 第40-42页 |
| §1．4 课题的提出 | 第42-45页 |
| §1．4．1 课题的意义 | 第42-43页 |
| §1．4．2 课题实验方案 | 第43-45页 |
| §1．4．2．1 脂肪酶在聚丙烯膜上的化学固定化 | 第43页 |
| §1．4．2．2 脂肪酶在含糖聚合物修饰的聚丙烯膜上的吸附和活性研究 | 第43页 |
| §1．4．2．3 脂肪酶在聚肽修饰的聚丙烯膜上的吸附和活性研究 | 第43页 |
| §1．4．2．4 脂肪酶在类磷脂聚合物修饰的聚丙烯膜上的吸附和活性研究 | 第43页 |
| §1．4．2．5 脂肪酶在两相酶膜反应器中水解橄榄油的研究 | 第43-45页 |
| 第二章 脂肪酶在聚丙烯微孔膜上的化学固定化 | 第45-70页 |
| §2．1 研究的目的及内容 | 第45-46页 |
| §2．2 实验部分 | 第46-54页 |
| §2．2．1 实验原料与仪器 | 第46-47页 |
| §2．2．1．1 实验原料 | 第46-47页 |
| §2．2．1．2 实验仪器 | 第47页 |
| §2．2．1．3 试剂的纯化 | 第47页 |
| §2．2．2 脂肪酶的化学固定化 | 第47-48页 |
| §2．2．2．1 甲基丙烯酸甲酯在膜表面的紫外光引发接枝聚合 | 第47-48页 |
| §2．2．2．2 间隔臂的引入 | 第48页 |
| §2．2．2．3 戊二醛活化 | 第48页 |
| §2．2．2．4 酶的固定化 | 第48页 |
| §2．2．3 固定化酶膜表面化学结构的表征 | 第48-49页 |
| §2．2．3．1 衰减全反射傅立叶变换红外分析(ATR／FT-IR) | 第48页 |
| §2．2．3．2 X—射线光电子能谱分析(XPS) | 第48-49页 |
| §2．2．4 脂肪酶载酶量的测定 | 第49-50页 |
| §2．2．4．1 Bradford方法检测溶液中蛋白含量 | 第49页 |
| §2．2．4．2 BSA标准曲线的绘制 | 第49-50页 |
| §2．2．4．3 载酶量的确定 | 第50页 |
| §2．2．5 脂肪酶活性的测定 | 第50-53页 |
| §2．2．5．1 氢氧化钠标准溶液的配制及其浓度标定 | 第50-51页 |
| §2．2．5．2 脂肪酶活性的测定 | 第51-53页 |
| §2．2．6 脂肪酶热稳定性的测定 | 第53-54页 |
| §2．3 结果与讨论 | 第54-69页 |
| §2．3．1 紫外光引发接枝反应条件对接枝率的影响 | 第54-56页 |
| §2．3．1．1 紫外光预处理时间对接枝率的影响 | 第55页 |
| §2．3．1．2 单体浓度对接枝率的影响 | 第55-56页 |
| §2．3．1．3 接枝反应时间对接枝率的影响 | 第56页 |
| §2．3．2 固定化酶膜表面化学结构的表征 | 第56-59页 |
| §2．3．2．1 衰减全反射傅立叶变换红外分析(ATR／FT-IR) | 第56-58页 |
| §2．3．2．2 X—射线光电子能谱分析(XPS) | 第58-59页 |
| §2．3．3 脂肪酶载酶量的测定 | 第59-61页 |
| §2．3．3．1 溶液中蛋白浓度的测定 | 第59-60页 |
| §2．3．3．2 BSA标准曲线的绘制 | 第60-61页 |
| §2．3．4 固定化条件对酶活性的影响 | 第61-66页 |
| §2．3．4．1 接枝率、载酶量与酶活性的关系 | 第61页 |
| §2．3．4．2 间隔臂的引入 | 第61-64页 |
| §2．3．4．2．1 胺烷基化温度对酶活性的影响 | 第62页 |
| §2．3．4．2．2 己二胺浓度对酶活性的影响 | 第62-63页 |
| §2．3．4．2．3 胺烷基化时间对酶活性的影响 | 第63-64页 |
| §2．3．4．3 戊二醛活化 | 第64页 |
| §2．3．4．3．1 戊二醛浓度对酶活性的影响 | 第64页 |
| §2．3．4．3．2 戊二醛作用时间对酶活性的影响 | 第64页 |
| §2．3．4．4 酶的固定化 | 第64-66页 |
| §2．3．4．4．1 酶溶液浓度对酶活性的影响 | 第64-65页 |
| §2．3．4．4．2 酶固定化反应时间对酶活性的影响 | 第65-66页 |
| §2．3．5 pH值对酶活性的影响 | 第66-67页 |
| §2．3．6 温度对酶活性的影响 | 第67页 |
| §2．3．7 脂肪酶的热稳定性 | 第67-69页 |
| §2．4 小结 | 第69-70页 |
| 第三章 脂肪酶在含糖聚合物修饰的聚丙烯微孔膜上的吸附及活性研究 | 第70-95页 |
| §3．1 研究的目的及内容 | 第70-72页 |
| §3．2 实验部分 | 第72-77页 |
| §3．2．1 实验原料与仪器 | 第72-74页 |
| §3．2．1．1 实验原料 | 第72-73页 |
| §3．2．1．2 实验仪器 | 第73-74页 |
| §3．2．1．3 试剂的纯化 | 第74页 |
| §3．2．2 含糖聚合物修饰的聚丙烯膜的制备 | 第74-75页 |
| §3．2．2．1 烯丙基葡萄糖单体的合成 | 第74页 |
| §3．2．2．2 聚丙烯微孔膜接枝改性 | 第74-75页 |
| §3．2．3 改性膜表面化学结构及形貌的表征 | 第75页 |
| §3．2．3．1 衰减全反射傅立叶变换红外分析(ATR／FT-IR) | 第75页 |
| §3．2．3．2 X-射线光电子能谱分析(XPS) | 第75页 |
| §3．2．3．3 扫描电镜(SEM)观察接枝膜的表面形貌 | 第75页 |
| §3．2．4 膜表面水接触角的测定 | 第75页 |
| §3．2．5 脂肪酶的吸附固定化 | 第75-76页 |
| §3．2．6 固定化脂肪酶的脱附实验 | 第76页 |
| §3．2．7 脂肪酶载酶量的测定 | 第76-77页 |
| §3．2．7．1 Bradford方法检测溶液中蛋白含量 | 第76页 |
| §3．2．7．2 BSA标准曲线的绘制 | 第76-77页 |
| §3．2．7．3 载酶量的确定 | 第77页 |
| §3．2．8 脂肪酶活性的测定 | 第77页 |
| §3．2．8．1 氢氧化钠标准溶液的配制及其浓度标定 | 第77页 |
| §3．2．8．2 脂肪酶活性的测定 | 第77页 |
| §3．2．9 脂肪酶热稳定性的测定 | 第77页 |
| §3．3 结果与讨论 | 第77-93页 |
| §3．3．1 改性膜表面的化学结构及形貌表征 | 第77-81页 |
| §3．3．1．1 接枝膜的衰减全反射傅立叶变换红外分析(ATR／FT-IR) | 第77-78页 |
| §3．3．1．2 接枝膜的X—射线光电子能谱分析(XPS) | 第78-80页 |
| §3．3．1．3 扫描电镜(SEM)观察接枝膜的表面形貌 | 第80-81页 |
| §3．3．2 含糖聚合物修饰膜接枝率的变化规律 | 第81-82页 |
| §3．3．3 膜表面水接触角的测定 | 第82-83页 |
| §3．3．4 脂肪酶在膜表面的吸附实验 | 第83-87页 |
| §3．3．4．1 酶溶液浓度对载酶量的影响 | 第84-85页 |
| §3．3．4．2 吸附时间对载酶量的影响 | 第85-86页 |
| §3．3．4．3 pH值对载酶量的影响 | 第86-87页 |
| §3．3．5 脱附实验 | 第87-88页 |
| §3．3．6 膜表面修饰对吸附的脂肪酶活性的影响 | 第88-91页 |
| §3．3．7 pH 值对酶活性的影响 | 第91-92页 |
| §3．3．8 温度对酶活性的影响 | 第92页 |
| §3．3．9 固定化脂肪酶的热稳定性 | 第92-93页 |
| §3．4 小结 | 第93-95页 |
| 第四章 脂肪酶在聚肽修饰的聚丙烯微孔膜上的吸附及活性研究 | 第95-116页 |
| §4．1 研究的目的及内容 | 第95-96页 |
| §4．2 实验部分 | 第96-101页 |
| §4．2．1 实验原料与仪器 | 第96-99页 |
| §4．2．1．1 实验原料 | 第96-98页 |
| §4．2．1．2 实验仪器 | 第98页 |
| §4．2．1．3 试剂的纯化 | 第98-99页 |
| §4．2．2 聚肽修饰的聚丙烯膜的制备 | 第99-101页 |
| §4．2．2．1 γ~-十八烷基L-谷氨酸酯及其NCA的合成 | 第99页 |
| §4．2．2．2 γ~-乙基-L-谷氨酸酯及其NCA的合成 | 第99-100页 |
| §4．2．2．3 聚丙烯膜表面氨等离子体处理 | 第100页 |
| §4．2．2．4 聚丙烯膜接枝改性 | 第100-101页 |
| §4．2．3 改性膜表面化学结构及形貌的表征 | 第101页 |
| §4．2．3．1 衰减全反射傅立叶变换红外分析(ATR／FT-IR) | 第101页 |
| §4．2．3．2 X—射线光电子能谱分析(XPS) | 第101页 |
| §4．2．3．3 扫描电镜(SEM)观察接枝膜的表面形貌 | 第101页 |
| §4．2．4 膜表面水接触角的测定 | 第101页 |
| §4．2．5 脂肪酶的吸附固定化 | 第101页 |
| §4．2．6 固定化脂肪酶的脱附实验 | 第101页 |
| §4．2．7 脂肪酶载酶量的测定 | 第101页 |
| §4．2．8 脂肪酶活性的测定 | 第101页 |
| §4．2．9 脂肪酶热稳定性的测定 | 第101页 |
| §4．3 结果与讨论 | 第101-115页 |
| §4．3．1 改性膜表面的化学结构及形貌表征 | 第101-106页 |
| §4．3．1．1 接枝膜的衰减全反射傅立叶变换红外分析(ATR／FT-IR) | 第101-103页 |
| §4．3．1．2 接枝膜的X—射线光电子能谱分析(XPS) | 第103-105页 |
| §4．3．1．3 扫描电镜(SEM)观察接枝膜的表面形貌 | 第105-106页 |
| §4．3．2 聚肽修饰膜接枝率的变化规律 | 第106页 |
| §4．3．3 膜表面水接触角的测定 | 第106-107页 |
| §4．3．4 脂肪酶在膜表面的吸附实验 | 第107-110页 |
| §4．3．4．1 酶溶液浓度对载酶量的影响 | 第107-108页 |
| §4．3．4．2 吸附时间对载酶量的影响 | 第108-109页 |
| §4．3．4．3 pH值对载酶量的影响 | 第109-110页 |
| §4．3．5 脱附实验 | 第110-111页 |
| §4．3．6 膜表面修饰对吸附的脂肪酶活性的影响 | 第111-113页 |
| §4．3．7 pH 值对酶活性的影响 | 第113页 |
| §4．3．8 温度对酶活性的影响 | 第113-114页 |
| §4．3．9 固定化脂肪酶的热稳定性 | 第114-115页 |
| §4．4 小结 | 第115-116页 |
| 第五章 脂肪酶在类磷脂聚合物修饰的聚丙烯微孔膜上的吸附及活性研究 | 第116-137页 |
| §5．1 研究的目的及内容 | 第116-118页 |
| §5．2 实验部分 | 第118-122页 |
| §5．2．1 实验原料与仪器 | 第118-120页 |
| §5．2．1．1 实验原料 | 第118-119页 |
| §5．2．1．2 实验仪器 | 第119页 |
| §5．2．1．3 试剂的纯化 | 第119-120页 |
| §5．2．2 磷脂修饰的聚丙烯膜的制备 | 第120-121页 |
| §5．2．2．1 2-氯-2-氧-1，3，2-二氧磷杂环戊烷的合成 | 第120页 |
| §5．2．2．2 2-烷氧基-2-氧-1，3，2-二氧磷杂环戊烷的合成 | 第120页 |
| §5．2．2．3 紫外光引发接枝甲基丙烯酸二甲胺乙酯 | 第120-121页 |
| §5．2．2．4 磷脂酰胆碱修饰聚丙烯微孔膜的形成 | 第121页 |
| §5．2．3 改性膜表面的化学结构及形貌表征 | 第121页 |
| §5．2．3．1 傅立叶衰减全反射变换红外分析(ATR／FT-IR) | 第121页 |
| §5．2．3．2 X—射线光电子能谱(XPS) | 第121页 |
| §5．2．3．3 扫描电镜(SEM)观察接枝膜的表面形貌 | 第121页 |
| §5．2．4 膜表面水接触角的测定 | 第121-122页 |
| §5．2．5 脂肪酶的吸附固定化 | 第122页 |
| §5．2．6 固定化脂肪酶的脱附实验 | 第122页 |
| §5．2．7 脂肪酶载酶量的测定 | 第122页 |
| §5．2．8 脂肪酶活性的测定 | 第122页 |
| §5．2．9 脂肪酶热稳定性的测定 | 第122页 |
| §5．3 结果与讨论 | 第122-135页 |
| §5．3．1 改性膜表面的化学结构及形貌表征 | 第122-126页 |
| §5．3．1．1 接枝膜的傅立叶变换衰减全反射红外分析(ATR／FT-IR) | 第122-123页 |
| §5．3．1．2 接枝膜的X—射线光电子能谱分析(XPS) | 第123-125页 |
| §5．3．1．3 扫描电镜(SEM)观察接枝膜的表面形貌 | 第125-126页 |
| §5．3．2 类磷脂聚合物修饰膜接枝率的变化规律 | 第126页 |
| §5．3．3 膜表面水接触角的测定 | 第126-128页 |
| §5．3．4 脂肪酶在膜表面的吸附实验 | 第128-130页 |
| §5．3．4．1 酶溶液浓度对载酶量的影响 | 第128页 |
| §5．3．4．2 吸附时间对载酶量的影响 | 第128-129页 |
| §5．3．4．3 pH值对载酶量的影响 | 第129-130页 |
| §5．3．5 脱附实验 | 第130-131页 |
| §5．3．6 膜表面修饰对吸附的脂肪酶活性的影响 | 第131-133页 |
| §5．3．7 pH 值对酶活性的影响 | 第133-134页 |
| §5．3．8 温度对酶活性的影响 | 第134-135页 |
| §5．3．9 固定化脂肪酶的热稳定性 | 第135页 |
| §5．4 小结 | 第135-137页 |
| 第六章 脂肪酶在两相酶膜反应器中水解橄榄油的研究 | 第137-152页 |
| §6．1 研究的目的及内容 | 第137-138页 |
| §6．2 实验部分 | 第138-141页 |
| §6．2．1 实验原料与仪器 | 第138页 |
| §6．2．1．1 实验原料 | 第138页 |
| §6．2．1．2 实验仪器 | 第138页 |
| §6．2．2 含糖聚合物修饰的聚丙烯膜的制备 | 第138页 |
| §6．2．3 脂肪酶的固定化 | 第138-140页 |
| §6．2．4 脂肪酶催化橄榄油的水解 | 第140-141页 |
| §6．3 结果与讨论 | 第141-151页 |
| §6．3．1 脂肪酶的固定化 | 第141-143页 |
| §6．3．1．1 酶溶液浓度对载酶量的影响 | 第141-142页 |
| §6．3．1．2 固定化时间对载酶量的影响 | 第142页 |
| §6．3．1．3 过膜压力对载酶量的影响 | 第142-143页 |
| §6．3．2 脂肪酶催化橄榄油的水解 | 第143-151页 |
| §6．3．2．1 过膜压力对反应速率的影响 | 第143-145页 |
| §6．3．2．2 两相流速对反应速率的影响 | 第145-146页 |
| §6．3．2．3 底物浓度对反应速率的影响 | 第146-147页 |
| §6．3．2．4 pH 值对反应速率的影响 | 第147-148页 |
| §6．3．2．5 温度对反应速率的影响 | 第148-149页 |
| §6．3．2．6 载酶量对反应速率的影响 | 第149-150页 |
| §6．3．2．7 膜反应器的重复使用性 | 第150-151页 |
| §6．4 小结 | 第151-152页 |
| 第七章 总结 | 第152-156页 |
| 参考文献 | 第156-175页 |
| 博士论文工作期间发表的文章 | 第175-176页 |
| 致谢 | 第176页 |
