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初生乌骨鸡肝脏差异显示ESTs的筛选及分析

中文摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
符号说明第11-12页
前言第12-13页
1.文献综述第13-22页
   ·乌骨鸡的药用价值和营养价值研究第13-14页
   ·乌骨鸡特异性状研究第14-15页
   ·基因表达差异的研究方法第15-19页
     ·研究基因表达差异的传统方法第15-16页
     ·差异显示PCR技术第16页
     ·差异显示技术与其他寻找差异表达基因方法的联合应用第16-17页
     ·mRNA差异显示技术的衍生技术第17-18页
     ·mRNA差异显示技术的应用第18-19页
   ·表达序列标签的研究及应用第19-21页
   ·基因芯片简介第21页
   ·本试验的目的和意义第21-22页
2.材料和方法第22-31页
   ·试验材料第22-25页
     ·试验动物和样品第22页
     ·差异显示引物第22页
     ·所需试剂及试剂盒第22-23页
     ·常用试剂的配制第23-24页
     ·主要仪器设备第24-25页
   ·试验方法第25-31页
     ·四个品种鸡肝脏差异表达cDNA的筛选第25-28页
     ·差异表达cDNA片段真实性的验证第28-29页
     ·初生乌骨鸡鸡肝脏差异表达cDNA片段克隆和测序第29页
     ·特异表达序列标签的生物信息学分析第29-31页
3.试验结果与分析第31-44页
   ·肝脏组织总RNA的提取及纯化第31页
   ·差异显示逆转录PCR(DDRT-PCR)产物的电泳结果第31-32页
   ·差异片段的切取第32-36页
   ·差异片段的再扩增与回收第36-37页
   ·SSCP筛选结果第37-38页
   ·基因芯片杂交剔除假阳性结果第38-40页
     ·芯片杂交伪色图第38-39页
     ·基因芯片扫描结果第39-40页
   ·差异表达片段克隆测序结果第40-41页
   ·初生乌骨鸡差异表达序列标签的分析鉴定第41-44页
     ·序列递交结果第41页
     ·相似性搜索第41-44页
4.分析与讨论第44-50页
   ·总RNA的抽提和DNASEⅠ处理第44页
   ·差异显示PCR第44-45页
   ·差异条带的回收和再扩增第45页
   ·SSCP第45-46页
   ·基因芯片杂交第46页
   ·序列测定第46页
   ·扩增现象第46-47页
   ·序列标签的电子延伸及定位第47页
   ·对应的基因组序列分析第47-48页
   ·差异显示的基因及其编码蛋白质的功能第48-50页
5.小结第50-51页
主要参考文献第51-56页
致谢第56-57页
附录第57-63页
 附录1 所用上游随机引物序列信息第57-58页
 附录2 芯片的质量控制及芯片杂交所需试剂第58-60页
 附录3 芯片杂交剔除假阳性第60-63页
 附录4 作者简介第63页

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