中文摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
符号说明 | 第11-12页 |
前言 | 第12-13页 |
1.文献综述 | 第13-22页 |
·乌骨鸡的药用价值和营养价值研究 | 第13-14页 |
·乌骨鸡特异性状研究 | 第14-15页 |
·基因表达差异的研究方法 | 第15-19页 |
·研究基因表达差异的传统方法 | 第15-16页 |
·差异显示PCR技术 | 第16页 |
·差异显示技术与其他寻找差异表达基因方法的联合应用 | 第16-17页 |
·mRNA差异显示技术的衍生技术 | 第17-18页 |
·mRNA差异显示技术的应用 | 第18-19页 |
·表达序列标签的研究及应用 | 第19-21页 |
·基因芯片简介 | 第21页 |
·本试验的目的和意义 | 第21-22页 |
2.材料和方法 | 第22-31页 |
·试验材料 | 第22-25页 |
·试验动物和样品 | 第22页 |
·差异显示引物 | 第22页 |
·所需试剂及试剂盒 | 第22-23页 |
·常用试剂的配制 | 第23-24页 |
·主要仪器设备 | 第24-25页 |
·试验方法 | 第25-31页 |
·四个品种鸡肝脏差异表达cDNA的筛选 | 第25-28页 |
·差异表达cDNA片段真实性的验证 | 第28-29页 |
·初生乌骨鸡鸡肝脏差异表达cDNA片段克隆和测序 | 第29页 |
·特异表达序列标签的生物信息学分析 | 第29-31页 |
3.试验结果与分析 | 第31-44页 |
·肝脏组织总RNA的提取及纯化 | 第31页 |
·差异显示逆转录PCR(DDRT-PCR)产物的电泳结果 | 第31-32页 |
·差异片段的切取 | 第32-36页 |
·差异片段的再扩增与回收 | 第36-37页 |
·SSCP筛选结果 | 第37-38页 |
·基因芯片杂交剔除假阳性结果 | 第38-40页 |
·芯片杂交伪色图 | 第38-39页 |
·基因芯片扫描结果 | 第39-40页 |
·差异表达片段克隆测序结果 | 第40-41页 |
·初生乌骨鸡差异表达序列标签的分析鉴定 | 第41-44页 |
·序列递交结果 | 第41页 |
·相似性搜索 | 第41-44页 |
4.分析与讨论 | 第44-50页 |
·总RNA的抽提和DNASEⅠ处理 | 第44页 |
·差异显示PCR | 第44-45页 |
·差异条带的回收和再扩增 | 第45页 |
·SSCP | 第45-46页 |
·基因芯片杂交 | 第46页 |
·序列测定 | 第46页 |
·扩增现象 | 第46-47页 |
·序列标签的电子延伸及定位 | 第47页 |
·对应的基因组序列分析 | 第47-48页 |
·差异显示的基因及其编码蛋白质的功能 | 第48-50页 |
5.小结 | 第50-51页 |
主要参考文献 | 第51-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
附录 | 第57-63页 |
附录1 所用上游随机引物序列信息 | 第57-58页 |
附录2 芯片的质量控制及芯片杂交所需试剂 | 第58-60页 |
附录3 芯片杂交剔除假阳性 | 第60-63页 |
附录4 作者简介 | 第63页 |