中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-12页 |
1 前言 | 第12-28页 |
·转基因植物的发展概况 | 第12-13页 |
·主要抗虫基因的研究进展 | 第13-20页 |
·Bt研究进展 | 第13-18页 |
·CpTI研究进展 | 第18-20页 |
·选择标记基因在转基因植物上的应用 | 第20-21页 |
·转基因植物检测技术的研究进展 | 第21-22页 |
·生物学水平检测 | 第21页 |
·DNA水平检测 | 第21页 |
·蛋白质水平检测 | 第21-22页 |
·胶体金标记检测技术 | 第22-26页 |
·胶体金标记检测技术的原理 | 第22-25页 |
·胶体金标记检测技术的发展与应用 | 第25-26页 |
·本文的立题思想 | 第26-27页 |
·本研究的技术路线 | 第27-28页 |
2 材料与方法 | 第28-39页 |
·实验材料 | 第28-29页 |
·供试转基因植物品种 | 第28页 |
·供试菌株 | 第28页 |
·供试抗原、抗体 | 第28页 |
·供试实验动物 | 第28页 |
·主要试剂和仪器 | 第28-29页 |
·实验方法 | 第29-39页 |
·Hpt在大肠杆菌中的表达与纯化及其兔多抗的制备和纯化 | 第29-32页 |
·胶体金的制备 | 第32页 |
·标记抗体的纯化 | 第32-33页 |
·标记抗体纯化后的效价测定 | 第33-34页 |
·胶体金标记最适蛋白用量的测定 | 第34页 |
·免疫胶体金的制备 | 第34-35页 |
·转基因植株的栽培与蛋白提取 | 第35-36页 |
·金标检测试剂盒的研制 | 第36-37页 |
·试剂盒的应用 | 第37页 |
·用ELISA法检测转基因植物 | 第37-39页 |
3 结果与分析 | 第39-63页 |
·转CryIA(e)植物胶体金标记快速检测试剂盒的研制 | 第39-44页 |
·CryIA(e)标记抗体纯化后的效价分析 | 第39-40页 |
·胶体金标记最适蛋白用量的测定 | 第40页 |
·金标试剂盒对转CryIA(e)植物的检测 | 第40-41页 |
·试剂盒与ELISA检测结果的比较分析 | 第41-44页 |
·试剂盒的稳定性分析 | 第44页 |
·转SCH植物胶体金标记快速检测试剂盒的研制 | 第44-50页 |
·SCH标记抗体纯化后的效价分析 | 第44-45页 |
·胶体金标记最适蛋白用量的测定 | 第45-46页 |
·金标试剂盒对转SCH植物的检测 | 第46页 |
·试剂盒与ELISA检测结果的比较分析 | 第46-50页 |
·试剂盒的稳定性分析 | 第50页 |
·转CpTI植物胶体金标记快速检测试剂盒的研制 | 第50-56页 |
·CpTI标记抗体纯化后的效价分析 | 第50-51页 |
·胶体金标记最适蛋白用量的测定 | 第51页 |
·金标试剂盒对转CpTI植物的检测 | 第51-52页 |
·试剂盒与ELISA检测结果的比较分析 | 第52-55页 |
·试剂盒的稳定性分析 | 第55-56页 |
·Hpt标记转基因植物金标快速检测试剂盒的初步研制 | 第56-63页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第56页 |
·GST-Hpt融合蛋白的诱导表达及可溶性分析 | 第56-57页 |
·融合蛋白的纯化及Thrombin酶切 | 第57-58页 |
·高效价Hpt蛋白兔多抗的制备 | 第58-59页 |
·抗体的特异性检测 | 第59-61页 |
·胶体金标记最适蛋白用量的分析 | 第61页 |
·金标试剂盒对Hpt纯蛋白的检测 | 第61-62页 |
·后期工作 | 第62-63页 |
4 讨论 | 第63-66页 |
参考文献 | 第66-72页 |
附录 | 第72-81页 |
附录1 胶体金电镜图 | 第72页 |
附录2 转Bt杀虫基因的植物种类 | 第72-74页 |
附录3 pGEX-4T-3-Hpt表达载体的构建过程 | 第74-75页 |
附录4 论文中所需溶液的配制方法 | 第75页 |
附录5 Bulk and RediPact GST Purification Modules纯化蛋白说明 | 第75-78页 |
附录6 底物试剂盒使用方法 | 第78页 |
附录7 透析袋的处理 | 第78-79页 |
附录8 转基因植物胶体金标记检测试剂盒说明书 | 第79-81页 |
致谢 | 第81页 |