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四种转基因植物胶体金标记快速检测试剂盒的研制

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-12页
1 前言第12-28页
   ·转基因植物的发展概况第12-13页
   ·主要抗虫基因的研究进展第13-20页
     ·Bt研究进展第13-18页
     ·CpTI研究进展第18-20页
   ·选择标记基因在转基因植物上的应用第20-21页
   ·转基因植物检测技术的研究进展第21-22页
     ·生物学水平检测第21页
     ·DNA水平检测第21页
     ·蛋白质水平检测第21-22页
   ·胶体金标记检测技术第22-26页
     ·胶体金标记检测技术的原理第22-25页
     ·胶体金标记检测技术的发展与应用第25-26页
   ·本文的立题思想第26-27页
   ·本研究的技术路线第27-28页
2 材料与方法第28-39页
   ·实验材料第28-29页
     ·供试转基因植物品种第28页
     ·供试菌株第28页
     ·供试抗原、抗体第28页
     ·供试实验动物第28页
     ·主要试剂和仪器第28-29页
   ·实验方法第29-39页
     ·Hpt在大肠杆菌中的表达与纯化及其兔多抗的制备和纯化第29-32页
     ·胶体金的制备第32页
     ·标记抗体的纯化第32-33页
     ·标记抗体纯化后的效价测定第33-34页
     ·胶体金标记最适蛋白用量的测定第34页
     ·免疫胶体金的制备第34-35页
     ·转基因植株的栽培与蛋白提取第35-36页
     ·金标检测试剂盒的研制第36-37页
     ·试剂盒的应用第37页
     ·用ELISA法检测转基因植物第37-39页
3 结果与分析第39-63页
   ·转CryIA(e)植物胶体金标记快速检测试剂盒的研制第39-44页
     ·CryIA(e)标记抗体纯化后的效价分析第39-40页
     ·胶体金标记最适蛋白用量的测定第40页
     ·金标试剂盒对转CryIA(e)植物的检测第40-41页
     ·试剂盒与ELISA检测结果的比较分析第41-44页
     ·试剂盒的稳定性分析第44页
   ·转SCH植物胶体金标记快速检测试剂盒的研制第44-50页
     ·SCH标记抗体纯化后的效价分析第44-45页
     ·胶体金标记最适蛋白用量的测定第45-46页
     ·金标试剂盒对转SCH植物的检测第46页
     ·试剂盒与ELISA检测结果的比较分析第46-50页
     ·试剂盒的稳定性分析第50页
   ·转CpTI植物胶体金标记快速检测试剂盒的研制第50-56页
     ·CpTI标记抗体纯化后的效价分析第50-51页
     ·胶体金标记最适蛋白用量的测定第51页
     ·金标试剂盒对转CpTI植物的检测第51-52页
     ·试剂盒与ELISA检测结果的比较分析第52-55页
     ·试剂盒的稳定性分析第55-56页
   ·Hpt标记转基因植物金标快速检测试剂盒的初步研制第56-63页
     ·重组质粒的酶切鉴定第56页
     ·GST-Hpt融合蛋白的诱导表达及可溶性分析第56-57页
     ·融合蛋白的纯化及Thrombin酶切第57-58页
     ·高效价Hpt蛋白兔多抗的制备第58-59页
     ·抗体的特异性检测第59-61页
     ·胶体金标记最适蛋白用量的分析第61页
     ·金标试剂盒对Hpt纯蛋白的检测第61-62页
     ·后期工作第62-63页
4 讨论第63-66页
参考文献第66-72页
附录第72-81页
 附录1 胶体金电镜图第72页
 附录2 转Bt杀虫基因的植物种类第72-74页
 附录3 pGEX-4T-3-Hpt表达载体的构建过程第74-75页
 附录4 论文中所需溶液的配制方法第75页
 附录5 Bulk and RediPact GST Purification Modules纯化蛋白说明第75-78页
 附录6 底物试剂盒使用方法第78页
 附录7 透析袋的处理第78-79页
 附录8 转基因植物胶体金标记检测试剂盒说明书第79-81页
致谢第81页

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