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野油菜黄单胞菌hrp基因簇的功能鉴定和表达调控分析

中文摘要第1-4页
英文摘要第4-9页
第一章 前言第9-18页
   ·野油菜黄单胞菌野油菜致病变种分子遗传学研究概况第9-11页
     ·野油菜黄单胞菌野油菜致病变种特征及其分类现状第9-10页
     ·Xcc基因组研究概况第10-11页
   ·hrp基因研究进展第11-15页
     ·hrp基因概述第11-15页
     ·Xcc 8004 hrp基因簇第15页
   ·Hrp TTSS和其它致病系统之间的研究第15-17页
   ·本研究工作的目的、内容及意义第17-18页
     ·目的与内容第17页
     ·意义第17-18页
第二章 材料与方法第18-35页
   ·材料第18-22页
     ·菌株和质粒第18-20页
     ·抗生素和其它药剂第20页
     ·培养基第20-21页
     ·溶液与缓冲液第21页
     ·试材第21-22页
   ·方法第22-35页
     ·菌株培养条件及保存第22页
     ·三亲本接合第22-23页
     ·两亲本接合第23页
     ·PCR反应第23-24页
     ·琼脂糖凝胶电泳第24-25页
     ·总DNA的提取第25页
     ·DNA的纯化和DNA的沉淀第25-26页
     ·限制性内切酶酶切第26页
     ·DNA片段的回收第26-27页
     ·DNA连接第27页
     ·感受态细胞的制备第27-28页
     ·转化第28-29页
     ·质粒的提取第29-30页
     ·植株的致病性试验第30-31页
     ·生长曲线的测定第31页
     ·过敏性反应第31-32页
     ·被测菌在叶中的生长状况第32页
     ·胞外多糖的检测第32-33页
     ·胞外酶的检测第33页
     ·β-半乳糖苷酶(GUS)活性测定第33-35页
第三章 结果与分析第35-69页
   ·hrp基因同源性比较第35页
   ·hrp基因Tn5gusA5突变体筛选和表型鉴定第35-37页
     ·筛库第35-36页
     ·表型检测第36-37页
   ·构建hrp基因簇缺失突变体第37-46页
     ·hrp基因簇缺失突变体构建的技术路线第37-38页
     ·hrp基因簇缺失突变体的构建第38-45页
     ·hrp基因簇缺失突变体的致病性试验第45-46页
   ·hrp基因Tn5gusA5插入突变体的致病性试验第46-47页
   ·构建hrp基因簇缺失突变体的hrpG整合突变体(双突变)第47-51页
     ·hrpG双突变体构建的技术路线第47-50页
     ·hrp基因簇缺失突变体的hrpG整合突变体的致病性试验第50-51页
   ·hrp基因簇缺失突变体的部分反式功能互补第51-55页
     ·hrp基因簇缺失突变体的部分反式功能互补的构建第51-53页
     ·8004△27、8004△27/pIJH5的致病性试验第53-55页
   ·构建hrpG缺失突变体第55-61页
     ·hrpG缺失突变体的构建第55-60页
     ·hrpG缺失突变体的致病性试验第60-61页
   ·hrpG缺失突变体的反式功能互补第61-63页
     ·hrpG缺失突变体的反式功能互补的构建第61-62页
     ·hrpG缺失突变体反式功能互补后的致病性试验第62-63页
   ·构建hrp基因Tn5gusA5插入突变体的hrpG整合突变体(双突变)第63-66页
     ·hrpG双突变体的构建第63-64页
     ·hrpG整合突变后突变体GUS活性检测第64-66页
   ·XC3024(conserved hypothetical gene)生物信息学分析第66-69页
     ·同源性分析第66页
     ·分子量和等电点分析第66页
     ·亲、疏水性分析第66页
     ·跨膜结构域分析第66-67页
     ·功能域分析第67-69页
第四章 讨论第69-72页
   ·关于Xcc突变体库的构建第69页
   ·关于hrp基因簇的功能研究第69页
   ·关于XC3024的研究第69-70页
   ·Hrp TTSS系统和其它致病系统之间的关系第70页
   ·Xcc HrpG调控元研究第70-72页
参考文献第72-76页
致谢第76页

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