| 英文缩写词表 | 第1-8页 |
| 前 言 | 第8-23页 |
| 一、 什么是微小残留病 | 第8页 |
| 二、 研究微小残留病以及提高残留白血病细胞检测技术水平的重要意义 | 第8-9页 |
| 三、 目前用于ALL检测的标记有那些 | 第9-12页 |
| 1 免疫分子标记 | 第9页 |
| 2 遗传学标志 | 第9-12页 |
| 四、 AL的MRD的检测方法 | 第12-13页 |
| 1 原位杂交技术(FISH) | 第12页 |
| 2 流式细胞仪检测技术 | 第12页 |
| 3 PCR和RT-PCR) | 第12-13页 |
| 五 e选用T细胞受体(TCR)和免疫球蛋白(IGH)重排基因作为检测微小残留病的标记 | 第13-15页 |
| 六 e传统PCR及实时PCR | 第15-23页 |
| 1 传统PCR扩增原理 | 第15-16页 |
| 2 实时定量PCR(Real-time PCR) | 第16-19页 |
| 3 dsDNA SYBR Green I 实时PCR | 第19-20页 |
| 4 Ct(threshold cycle) | 第20-21页 |
| 5 标准曲线的制作 | 第21页 |
| 6 R-T PCR的优点: | 第21页 |
| 7 应用领域 | 第21-23页 |
| 材料和方法 | 第23-31页 |
| 一 e主要试剂 | 第23页 |
| 二 e主要仪器 | 第23-24页 |
| 三 e样品的采集及保存 | 第24页 |
| 四 e传统PCR检测不同阶段样品的IGH和TCRγ基因重排: | 第24-26页 |
| 五 e荧光定量PCR参比模板的构建 | 第26-28页 |
| 1 IgH/TCRγ特异片段的克隆 | 第26-27页 |
| 2 重组子鉴定 | 第27-28页 |
| 六 e实时荧光PCR反应系统相关参数确定 | 第28页 |
| 七 e实时荧光PCR反应系统敏感性测试及线性标准曲线绘制 | 第28-29页 |
| 八 e样品的DNA结合SYBR Green I定量PCR: | 第29-31页 |
| 结 果 | 第31-41页 |
| 一、 PCR扩增结果 | 第31-32页 |
| 二、 蓝白筛选结果: | 第32-33页 |
| 三、 重组质粒提纯后目的基因质粒DNA PCR后的电泳图 | 第33-34页 |
| 四、 重组质粒测序结果 | 第34-35页 |
| 五、 荧光定量PCR结果 | 第35-40页 |
| 1 IgH质粒标准荧光定量PCR扩增图 | 第35-37页 |
| 2 TCR质粒标准荧光定量PCR扩增图 | 第37-39页 |
| 3 样品荧光定量PCR结果: | 第39-40页 |
| 六、 所有阳性样品的各个阶段的传统PCRJ及实时PCR结果统计表: | 第40-41页 |
| 讨 论 | 第41-44页 |
| 结 论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-49页 |
| 中文摘要 | 第49-52页 |
| ABSTRACT | 第52-55页 |
| 致 谢 | 第55页 |
