| 第一章 文献综述 | 第1-26页 |
| ·转化生长因子-β1的研究进展 | 第12-17页 |
| ·TGF-β1前体的活化机制 | 第12-13页 |
| ·TGF-β1信号转导通路 | 第13页 |
| ·TGF-β1表达改变同人类疾病的关系 | 第13-16页 |
| ·TGF-β1的基因多态性及同疾病的关系 | 第16-17页 |
| ·作为抑癌基因的TGF-β1受体 | 第17页 |
| ·TGF-β胞内信号分子SMADs | 第17-19页 |
| ·Smad2、4突变或表达丢失同肿瘤发生的关系 | 第18页 |
| ·Smad3同肿瘤发生的关系 | 第18-19页 |
| ·抑制TGF-β信号转导通路的Smads：Smad7 | 第19页 |
| ·RNA干涉技术 | 第19-24页 |
| ·RNA干涉现象的发现史 | 第19-21页 |
| ·RNA干涉的作用机制 | 第21页 |
| ·RNA干涉的特点及siRNAs的产生方法 | 第21-22页 |
| ·RNAi技术的应用 | 第22-24页 |
| ·立题依据 | 第24-26页 |
| 第二章 Smad7基因在细胞模型中的异常表达及对TGF-β1刺激的应答 | 第26-32页 |
| ·实验材料 | 第26-27页 |
| ·细胞和基因来源 | 第26页 |
| ·主要实验仪器和设备 | 第26-27页 |
| ·主要试剂和耗材 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-28页 |
| ·细胞培养及TGF-β1处理 | 第27页 |
| ·RNA提取 | 第27页 |
| ·Northern杂交 | 第27-28页 |
| ·实验结果分析 | 第28-31页 |
| ·BEP2D细胞和BERP35T2细胞Smad7 mRNA表达分析 | 第28-29页 |
| ·BEP2D和BERP35T2细胞中Smad7对TGF-β1刺激的应答 | 第29-31页 |
| ·讨论 | 第31-32页 |
| 第三章 Smad7基因过表达对细胞增殖及TGF-β1介导的细胞生长抑制效应的影响 | 第32-40页 |
| ·实验材料 | 第32页 |
| ·实验方法 | 第32-35页 |
| ·Smad7基因稳定转染BEP2D及BERP35T2细胞 | 第32页 |
| ·Western blot | 第32-35页 |
| ·细胞生长、增殖能力检测 | 第35页 |
| ·TGF-β1对各细胞系的生长抑制效应检测 | 第35页 |
| ·实验结果分析 | 第35-38页 |
| ·BEP2D及BERP35T2细胞的细胞生长曲线及不同浓度的TGF-β1对两细胞系的生长抑制效应 | 第35-37页 |
| ·BEP2D和BERP35T2细胞稳定转染Smad7基因后筛选克隆的Western blot鉴定 | 第37页 |
| ·Smad7基因对细胞生长、增殖的影响 | 第37-38页 |
| ·SMAD7异位过表达的细胞对TGF-β1介导的生长抑制效应的应答 | 第38页 |
| ·讨论 | 第38-40页 |
| 第四章 利用RNA干涉技术对Smad7基因表达的阻断及其对BERP35T2细胞增殖的影响 | 第40-49页 |
| ·实验材料 | 第40页 |
| ·实验方法 | 第40-45页 |
| ·siRNA(small interfering RNA)寡核苷酸模板的设计 | 第40-41页 |
| ·siRNA寡核苷酸模板的合成 | 第41页 |
| ·用体外转录的方法制备siRNA | 第41-43页 |
| ·用制备的siRNA和Smad7表达载体(质粒)瞬时转染BERP35T2细胞 | 第43页 |
| ·Northern blot杂交 | 第43-44页 |
| ·siRNA瞬时转染BERP35T2细胞 | 第44-45页 |
| ·siRNA对BERP35T2细胞的生长抑制效应检测 | 第45页 |
| ·实验结果分析 | 第45-47页 |
| ·siRNA寡核苷酸模板的设计 | 第45页 |
| ·siRNA寡核苷酸模板的合成 | 第45页 |
| ·用体外转录的方法制备siRNA | 第45-46页 |
| ·瞬时转染BERP35T2细胞后，细胞中Smad7基因mRNA表达水平分析 | 第46页 |
| ·siRNA对BERP35T2细胞的生长抑制效应检测结果 | 第46-47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-61页 |
| 附录 常用缩写词中英文对照表 | 第61-62页 |
| 作者简介 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
