| 第一章 绪论 | 第1-30页 |
| ·血栓性疾病、凝血与纤溶 | 第12-14页 |
| ·血栓性疾病 | 第12页 |
| ·凝血 | 第12-13页 |
| ·纤溶 | 第13-14页 |
| ·人纤溶酶原 | 第14页 |
| ·人纤溶酶及其对纤维蛋白的降解作用 | 第14页 |
| ·纤溶酶类溶栓剂应用状况 | 第14-17页 |
| ·链激酶(SK) | 第15页 |
| ·尿激酶(u-PA) | 第15页 |
| ·组织型纤溶酶原激活剂(t-PA) | 第15-16页 |
| ·对-甲氧苯甲酰纤溶酶原链激酶激活剂复合物(APSAC) | 第16页 |
| ·单链尿激酶型纤溶酶原激活剂(scu-PA) | 第16-17页 |
| ·纤溶酶类溶栓剂研究开发状况 | 第17-24页 |
| ·重组t-PA的突变体、组建嵌合型溶栓剂、单抗导向溶栓剂、葡激酶 | 第17-19页 |
| ·重组t-PA的突变体 | 第17-18页 |
| ·组建嵌合型溶栓剂 | 第18页 |
| ·单抗导向溶栓剂 | 第18页 |
| ·葡激酶(SAK) | 第18-19页 |
| ·动物来源纤溶酶 | 第19-22页 |
| ·蛇毒来源纤溶酶 | 第19-20页 |
| ·蚯蚓来源纤溶酶 | 第20-21页 |
| ·吸血动物来源纤溶酶 | 第21-22页 |
| ·植物来源纤溶酶 | 第22页 |
| ·海洋生物来源纤溶酶 | 第22页 |
| ·微生物来源纤溶酶 | 第22-24页 |
| ·课题来源及本论文需要解决的问题 | 第24-25页 |
| 参考文献 | 第25-30页 |
| 第二章 高产纤溶酶菌株根霉的诱变育种和固态发酵条件的优化 | 第30-46页 |
| ·引言 | 第30-31页 |
| ·微生物育种的意义 | 第30页 |
| ·诱变育种的优点和现状 | 第30页 |
| ·固态发酵及其条件优化 | 第30-31页 |
| ·本实验的思路和内容 | 第31页 |
| ·材料与方法 | 第31-33页 |
| ·出发菌株 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31页 |
| ·培养基 | 第31-32页 |
| ·实验方法 | 第32页 |
| ·分析方法 | 第32-33页 |
| ·结果与讨论 | 第33-43页 |
| ·诱变育种 | 第33-35页 |
| ·最小抑制剂浓度选择 | 第33页 |
| ·紫外线照射剂量的选择 | 第33-34页 |
| ·紫外线-氯化锂复合诱变及制霉素抗性突变株的筛选 | 第34页 |
| ·高产纤溶酶制霉素抗性株的固态发酵筛选试验 | 第34页 |
| ·高产突变株遗传稳定性 | 第34-35页 |
| ·固态发酵产纤溶酶条件的优化 | 第35-43页 |
| ·碳源的选择 | 第35页 |
| ·氮源的选择 | 第35-36页 |
| ·适宜碳氮比的确定 | 第36-37页 |
| ·培养基初始pH值对产纤溶酶的影响 | 第37-38页 |
| ·培养基含水量对纤溶酶产量的影响 | 第38页 |
| ·无机盐对纤溶酶产量的影响 | 第38-41页 |
| ·接种量和发酵时间对纤溶酶产量的影响 | 第41-43页 |
| ·优化条件下的固态发酵实验 | 第43页 |
| ·小结 | 第43页 |
| 参考文献 | 第43-46页 |
| 第三章 根霉液体发酵生产纤溶酶发酵条件的优化 | 第46-59页 |
| ·引言 | 第46页 |
| ·纤溶酶的诱导 | 第46页 |
| ·本实验的目的和基本思路 | 第46页 |
| ·材料与方法 | 第46-48页 |
| ·主要设备 | 第46页 |
| ·方法 | 第46-48页 |
| ·结果与讨论 | 第48-58页 |
| ·碳源和氮源的选择、碳氮比的确定 | 第48-49页 |
| ·固体豆粕作有机氮源时无机氮源对产纤溶酶的影响 | 第49-51页 |
| ·胰蛋白胨对产纤溶酶的诱导促进作用 | 第51-52页 |
| ·发酵液初始pH值对产生纤溶酶的影响 | 第52-53页 |
| ·豆粕水解物对纤溶酶的诱导作用 | 第53-56页 |
| ·豆粕水解物作有机氮源时无机氮源的选择 | 第56-57页 |
| ·豆粕水解物作有机氮时胰蛋白胨和发酵液初始pH对产纤溶酶的影响 | 第57-58页 |
| ·小结 | 第58页 |
| 参考文献 | 第58-59页 |
| 第四章 根霉纤溶酶的分离提纯 | 第59-76页 |
| ·引言 | 第59-61页 |
| ·分离纯化的目的意义 | 第59页 |
| ·分离纯化常用的方法和策略 | 第59-61页 |
| ·本实验的目的、主要内容和基本思路 | 第61页 |
| ·材料与方法 | 第61-64页 |
| ·主要材料 | 第61页 |
| ·主要试剂 | 第61页 |
| ·主要设备 | 第61-62页 |
| ·主要溶液 | 第62-63页 |
| ·实验方法 | 第63-64页 |
| ·结果与讨论 | 第64-74页 |
| ·粗酶浸提液的性质、提取用缓冲液的选择 | 第64页 |
| ·硫酸铵盐析 | 第64-65页 |
| ·疏水相互作用色谱层析 | 第65-68页 |
| ·疏水层析固定相的选择 | 第65-67页 |
| ·Octyl-Sepharose FF疏水层析 | 第67-68页 |
| ·离子交换层析 | 第68-70页 |
| ·凝胶色谱层析 | 第70-71页 |
| ·根霉纤溶酶纯度的电泳鉴定 | 第71-72页 |
| ·根霉纤溶酶纯化回收情况 | 第72-73页 |
| ·试用过的其它色谱方法及效果 | 第73-74页 |
| ·小结 | 第74页 |
| 参考文献 | 第74-76页 |
| 第五章 根霉产生的纤溶酶分离提纯方法的优化 | 第76-88页 |
| ·引言 | 第76页 |
| ·蛋白质分离提纯方法优化的意义和原则 | 第76页 |
| ·本实验需要解决的问题、实验内容和基本策略 | 第76页 |
| ·材料、设备与方法 | 第76-79页 |
| ·主要材料 | 第76-77页 |
| ·主要试剂 | 第77页 |
| ·主要设备 | 第77页 |
| ·方法 | 第77-79页 |
| ·结果与讨论 | 第79-86页 |
| ·粗纤溶酶液的脱色 | 第79-80页 |
| ·制备色谱单元模式的选择和流程的优化组合 | 第80-82页 |
| ·Octyl-sepharose Fast Flow疏水相互作用色谱 | 第82-83页 |
| ·Phenyl-Sepharose High Performance疏水相互作用色谱 | 第83页 |
| ·SP-Sepharose High Performance强阳离子交换色谱 | 第83-84页 |
| ·Resource Phe高分离度疏水相互作用色谱 | 第84-85页 |
| ·制备色谱优化流程的提纯效果 | 第85-86页 |
| ·小结 | 第86页 |
| 参考文献 | 第86-88页 |
| 第六章 根霉产生纤溶酶的酶学性质 | 第88-120页 |
| ·引言 | 第88页 |
| ·酶学性质研究的意义 | 第88页 |
| ·材料与方法 | 第88-93页 |
| ·主要材料 | 第88页 |
| ·主要试剂 | 第88页 |
| ·主要仪器和设备 | 第88-89页 |
| ·主要溶液 | 第89-90页 |
| ·方法 | 第90-93页 |
| ·结果与讨论 | 第93-111页 |
| ·纤溶酶分子量的测定 | 第93-96页 |
| ·SDS-PAGE方法测定 | 第93-94页 |
| ·凝胶层析法纤溶酶分子量测定 | 第94-96页 |
| ·纤溶酶等电点的测定 | 第96-97页 |
| ·纤溶酶对人纤溶酶原激活的作用 | 第97-98页 |
| ·纤溶酶对人血纤维蛋白的作用方式 | 第98-100页 |
| ·纤溶酶的最适作用温度和热稳定性 | 第100-101页 |
| ·纤溶酶的最适作用温度 | 第100-101页 |
| ·纤溶酶的热稳定性 | 第101页 |
| ·纤溶酶的最适作用pH和pH稳定性 | 第101-103页 |
| ·纤溶酶的最适作用pH | 第102页 |
| ·纤溶酶的pH稳定性 | 第102-103页 |
| ·纤溶酶的底物作用专一性及酶反应动力学 | 第103-106页 |
| ·纤溶酶对酪蛋白的分解反应 | 第104页 |
| ·纤溶酶对蛋白酶生色底物的作用 | 第104页 |
| ·纤溶酶对生色底物N-Succinyl-Ala-Ala-Pro-Phe-pNA作用动力学 | 第104-106页 |
| ·纤溶酶为糖蛋白的定性与定量 | 第106-107页 |
| ·蛋白酶抑制剂对纤溶酶的作用 | 第107-108页 |
| ·金属离子对纤溶酶活性的影响 | 第108-110页 |
| ·提高纤溶酶稳定性的方法和酶的保存 | 第110-111页 |
| ·纤溶酶的N端氨基酸序列测定 | 第111页 |
| ·小结 | 第111-113页 |
| 参考文献 | 第113-115页 |
| 附录: 根霉纤溶酶N端氨基酸序列测定图谱 | 第115-120页 |
| 第七章 全文总结与展望 | 第120-123页 |
| ·全文总结 | 第120-121页 |
| ·本论文的创新性工作 | 第121-122页 |
| ·展望 | 第122-123页 |
| 致谢 | 第123-124页 |
| 攻读博士期间发表论文 | 第124页 |
