| 第一章 文献综述及前言 | 第1-36页 |
| 1 辣椒生产概况 | 第14页 |
| 2 辣椒的离体再生与遗传转化研究进展 | 第14-21页 |
| ·辣椒离体培养研究概况 | 第15-17页 |
| ·辣椒离体培养途径 | 第15-16页 |
| ·影响辣椒离体再生培养的因素 | 第16页 |
| ·对策与今后的研究重点 | 第16-17页 |
| ·辣椒基因工程研究进展 | 第17-21页 |
| ·辣椒基因工程研究历史与现状 | 第17-18页 |
| ·辣椒基因工程研究中存在的主要问题 | 第18页 |
| ·对策与今后研究重点 | 第18-21页 |
| 3 植物基因表达转录水平调控研究概况 | 第21-33页 |
| ·顺式作用元件 | 第21-22页 |
| ·转录因子 | 第22-28页 |
| ·转录因子的结构与功能 | 第23-24页 |
| ·植物转录因子功能分析方法 | 第24-28页 |
| ·ERF转录因子 | 第28-33页 |
| ·ERF蛋白的结构特征及其功能特性 | 第29-31页 |
| ·ERF转录因子在植物胁迫应答中的作用 | 第31-33页 |
| 4 本研究的目的意义与技术路线 | 第33-36页 |
| ·本研究的目的意义 | 第33-35页 |
| ·技术路线 | 第35-36页 |
| 第二章 6-BA、IAA、PA及ABA对辣椒子叶离体再生的影响 | 第36-44页 |
| 1 材料与方法 | 第36-37页 |
| ·材料 | 第36页 |
| ·方法 | 第36-37页 |
| ·无菌苗的培育 | 第36页 |
| ·不定芽的诱导与分化 | 第36-37页 |
| ·不定芽的伸长 | 第37页 |
| ·生根与移栽 | 第37页 |
| 2 结果与分析 | 第37-41页 |
| ·6-BA与IAA的浓度及组合对不定芽分化的影响 | 第37-38页 |
| ·PA对辣椒子叶不定芽分化与伸长的影响 | 第38-40页 |
| ·PA的不同浓度对辣椒子叶不定芽分化与伸长的影响 | 第38-39页 |
| ·PA添加的不同时期对辣椒子叶不定芽分化与伸长的影响 | 第39-40页 |
| ·ABA对辣椒子叶不定芽分化与伸长的影响 | 第40-41页 |
| ·ABA的不同浓度对辣椒子叶不定芽分化与伸长的影响 | 第40-41页 |
| ·ABA添加的不同时期对辣椒子叶不定芽分化与伸长的影响 | 第41页 |
| 3 讨论 | 第41-43页 |
| ·6-BA与IAA的浓度及组合对辣椒子叶不定芽分化与伸长的影响 | 第41-42页 |
| ·PA对辣椒子叶不定芽分化与伸长的影响 | 第42页 |
| ·ABA对辣椒子叶不定芽分化与伸长的影响 | 第42-43页 |
| 4 小结 | 第43页 |
| 5 图版 | 第43-44页 |
| 第三章 辣椒遗传转化体系优化的研究 | 第44-55页 |
| 1 材料与方法 | 第45-48页 |
| ·材料 | 第45-46页 |
| ·质粒及农杆菌菌株 | 第45页 |
| ·辣(甜)椒品种 | 第45页 |
| ·试验用基本培养基 | 第45页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第45-46页 |
| ·方法 | 第46-48页 |
| ·工程菌液的制备 | 第46页 |
| ·外植体的准备、农杆菌侵染与共培养 | 第46页 |
| ·试验设计 | 第46页 |
| ·检测 | 第46-48页 |
| 2 结果与分析 | 第48-51页 |
| ·外植体Km抗性水平 | 第48-49页 |
| ·工程菌液pH值对转化的影响 | 第49页 |
| ·共培养基中AS的浓度对转化的影响 | 第49-50页 |
| ·共培养时的温度对转化的影响 | 第50页 |
| ·共培时间对转化的影响 | 第50页 |
| ·DNA的质量检测 | 第50-51页 |
| ·PCR检测 | 第51页 |
| 3 讨论 | 第51-53页 |
| ·关于抗生素Km的使用浓度和使用方法 | 第51页 |
| ·关于绿色荧光蛋白的检测 | 第51-52页 |
| ·关于AS对转化效率的影响 | 第52-53页 |
| ·关于温度对转化效率的影响 | 第53页 |
| 4 小结 | 第53-54页 |
| 5 图版 | 第54-55页 |
| 第四章 JERFs基因导入辣椒的研究 | 第55-73页 |
| 1 材料与方法 | 第55-63页 |
| ·材料 | 第55-56页 |
| ·供试辣椒品种 | 第55页 |
| ·供试质粒、基因与农杆菌菌株 | 第55-56页 |
| ·试验用基本培养基 | 第56页 |
| ·农杆菌培养基为YEB | 第56页 |
| ·遗传转化基本培养基 | 第56页 |
| ·方法 | 第56-63页 |
| ·工程菌液的制备 | 第56页 |
| ·外植体的准备、农杆菌侵染与共培养 | 第56页 |
| ·转化子的筛选与再生培养 | 第56页 |
| ·阳性试管苗的快速繁殖 | 第56页 |
| ·小苗的移栽 | 第56-57页 |
| ·辣椒总DNA的提取 | 第57页 |
| ·辣椒基因组DNA的微量提取 | 第57页 |
| ·辣椒基因组DNA的大量提取 | 第57页 |
| ·拟转化植株的PCR检测 | 第57-58页 |
| ·PCR引物 | 第57-58页 |
| ·PCR检测 | 第58页 |
| ·Southern杂交 | 第58-60页 |
| ·试剂配制 | 第58-59页 |
| ·模板DNA的制备 | 第59页 |
| ·探针的制备 | 第59页 |
| ·PCR Southern杂交 | 第59-60页 |
| ·基因组DNA斑点杂交 | 第60页 |
| ·Northern杂交 | 第60-63页 |
| ·总RNA的提取 | 第60-61页 |
| ·甲醛凝胶电泳 | 第61-62页 |
| ·真空转膜与紫外交联 | 第62页 |
| ·Northern杂交 | 第62-63页 |
| ·洗膜 | 第63页 |
| 2 结果与分析 | 第63-69页 |
| ·农杆菌转染子叶外植体获得再生植株 | 第63-64页 |
| ·DNA的质量 | 第64页 |
| ·转化再生植株PCR | 第64-66页 |
| ·拟转基因植株PCR-Southern杂交 | 第66-67页 |
| ·拟转基因辣椒基因组DNA点杂交 | 第67-68页 |
| ·转基因植株的Northern杂交 | 第68-69页 |
| 3 讨论 | 第69-70页 |
| ·关于转基因植株检测方法的评价 | 第69-70页 |
| ·关于转基因沉默 | 第70页 |
| 4 小结 | 第70-71页 |
| 5 图版 | 第71-73页 |
| 第五章 转JERFs基因辣椒的抗病性鉴定与下游PR蛋白基因的表达分析 | 第73-90页 |
| 1 材料与方法 | 第74-80页 |
| ·转基因辣椒植株抗病性鉴定 | 第74-76页 |
| ·材料 | 第74页 |
| ·接种病原 | 第74页 |
| ·实验方法 | 第74-76页 |
| ·辣椒病毒病苗期抗病性鉴定 | 第74-75页 |
| ·辣椒疫病苗期抗病性鉴定 | 第75-76页 |
| ·辣椒疮痂病抗病性鉴定 | 第76页 |
| ·转基因植株中PR蛋白基因的表达分析 | 第76-80页 |
| ·材料 | 第76-77页 |
| ·供试辣椒植株 | 第76页 |
| ·PR蛋白基因 | 第76-77页 |
| ·方法 | 第77-80页 |
| ·下游PR蛋白基因片段的PCR克隆与RT-PCR鉴定 | 第77-80页 |
| ·序列测定及同源性分析 | 第80页 |
| ·pROK2-JERF33的表达诱导辣椒中PR蛋白基因的表达分析 | 第80页 |
| 2 结果与分析 | 第80-84页 |
| ·RNA的质量 | 第80-81页 |
| ·转基因植株中PR蛋白基因的RT-PCR | 第81-82页 |
| ·序列测定与同源性比较 | 第82页 |
| ·转基因植株的抗病性 | 第82-84页 |
| ·转基因植株CMV抗性 | 第82-83页 |
| ·转基因植株疫病抗性 | 第83页 |
| ·转基因植株疮痂病的抗性 | 第83-84页 |
| ·pROK2-JERF33的表达诱导辣椒中PR蛋白基因的表达分析 | 第84页 |
| 3 讨论 | 第84-87页 |
| ·关于转录因子与植物抗逆性 | 第84-86页 |
| ·关于PR蛋白在植物抗病中的作用 | 第86-87页 |
| 4 小结 | 第87-88页 |
| 5 图版 | 第88-90页 |
| 结论 | 第90-91页 |
| 下一步工作设想 | 第91-92页 |
| 参考文献 | 第92-103页 |
| 附图 | 第103-119页 |
| 致谢 | 第119-120页 |
| 作者简历 | 第120-121页 |
| 博士在读期间获得的学术成果 | 第121页 |
