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白菜抗虫转基因研究

中文摘要第1-4页
英文摘要第4-5页
目录第5-7页
缩略词第7-8页
序言第8-10页
第一章 文献综述第10-25页
 1.1 白菜类作物转基因技术研究进展第10-18页
  1.1.1 建立在细胞或组织培养基础上的遗传转化第11-15页
  1.1.2 原位渗入转化法第15-18页
 1.2 植物抗虫基因的研究进展第18-25页
  1.2.1 微生物来源的抗虫基因第19-20页
  1.2.2 植物来源的抗虫基因第20-23页
  1.2.3 动物来源的抗虫基因第23-24页
  1.2.4 植物抗虫基因工程存在的问题及其对策第24-25页
第二章: 植物表达质粒载体的改造和构建第25-32页
 2.1 材料第25-26页
 2.2 p~(BBB-PinⅡ)质粒的去内含子第26-28页
 2.3 p~(SHK-SIP)质粒的构建第28-32页
第三章 结球白菜的叶盘法转化及抗虫基因转化株的获得第32-47页
 3.1 材料第32页
 3.2 方法第32-37页
  3.2.1 无菌苗及外植体的获得第32-33页
  3.2.2 不定芽的再生能力比较第33-34页
  3.2.3 农杆菌转化第34页
  3.2.4 不定芽的诱导及抗性株筛选第34-35页
  3.2.5 抗性株嵌合体的鉴定与分离第35页
  3.2.6 抗性株的鉴定第35-37页
  3.2.7 转化植株的抗虫性测定第37页
 3.3 实验结果和分析第37-43页
  3.3.1 基因型对子叶-子叶柄形态发生的影响第37-38页
  3.3.2 Basta浓度对筛选结果的影响第38页
  3.3.3 结球白菜PinⅡ基因的转化及转化株的筛选第38-39页
  3.3.4 抗性株的嵌合体鉴定与分离第39-40页
  3.3.5 氯酚红鉴定第40页
  3.3.6 抗性株的分子生物学鉴定第40-42页
  3.3.7 PinⅡ转基因植株的抗虫性测定结果第42-43页
 3.4 讨论第43-47页
第四章 农杆菌介导的真空渗入转化第47-56页
 4.1 材料准备第47-48页
  4.1.1 “49菜心”准备第47页
  4.1.2 农杆菌液的准备第47-48页
 4.2 真空渗入转化第48页
 4.3 转化株的筛选第48-49页
  4.3.1 处理植株的栽培管理第48页
  4.3.2 抗性株的筛选第48-49页
 4.4 抗性株的氯酚红鉴定第49页
 4.5 抗性株的分子生物学鉴定第49页
 4.6 结果第49-53页
  4.6.1 处理植株的结籽及转化株筛选情况第49页
  4.6.2 氯酚红法鉴定第49-51页
  4.6.3 PCR及PCR-Southern杂交结果第51-52页
  4.6.4 抗性株基因组DNA Southern杂交第52-53页
 4.7 讨论第53-56页
第五章 结论第56-57页
 5.1 植物表达质粒载体的改造和构建第56页
 5.2 获得PinⅡ转基因大白菜第56页
 5.3 获得PinⅡ转基因小白菜第56-57页
附录第57-64页
 1 质粒的大量提取法(碱裂解法)第57-58页
 2 碱法小量快速提取质粒第58-59页
 3 凝胶的玻璃奶回收法第59页
 4 农杆菌(电激转化)感受态细胞的制备第59-60页
 5 SDS法提取植物总DNA第60-61页
 6 Southern杂交第61-64页
参考文献第64-69页
致谢第69页

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