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鸡β-防御素-8 cDNA的克隆及在毕赤酵母中的表达

摘要第1-6页
Abstract第6-12页
文献综述第12-19页
引言第19-21页
1. 材料与方法第21-29页
   ·常用仪器第21页
   ·质粒与菌株第21页
   ·工具酶及引物第21-22页
   ·其他试剂与材料第22页
   ·主要溶液及培养基的配制第22-25页
   ·方法第25-29页
     ·鸡肝脏细胞总RNA 分离提取第25页
     ·RT—PCR 反应和cDNA 的扩增第25页
     ·Gal-8 的克隆鉴定与测序第25页
     ·pPIC3.5K-gal-8 重组质粒的构建第25页
     ·重组质粒的双酶切鉴定及酶切线性化第25-26页
     ·酶切重组质粒的纯化第26页
     ·G5115 感受态细胞制备及酶切重组表达质粒的电转化第26-27页
     ·阳性转化子的Mut 表型鉴定第27页
     ·酵母重组抗菌肽的诱导表达第27页
     ·诱导表达上清的SDS-PAGE第27-29页
2 结果第29-35页
   ·RT-PCR 扩增第29页
   ·阳性菌落的PCR 鉴定与酶切鉴定第29-30页
   ·测序与DNA 序列比较第30页
   ·Gal-8 成熟肽PCR 扩增结果第30-31页
   ·pPIC3.5K-gal-8 重组质粒的构建与鉴定第31-32页
   ·重组酵母的鉴定第32-33页
   ·阳性转化子的Mut 表型鉴定第33-34页
   ·重组酵母的诱导表达第34-35页
3 讨论第35-37页
   ·重组表达质粒的提取及限制性内切酶酶切图谱分析第35页
   ·酶切线性化重组质粒的电转化第35页
   ·阳性转化子的Mut 表型鉴定第35-37页
4 结论第37-38页
参考文献第38-44页
附录第44-45页
致谢第45-46页
个人简介第46页

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