| 中文提要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 引言 | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-31页 |
| 第一节 酚氧化酶原及其相关因子的研究概况 | 第9-18页 |
| 1 酚氧化酶原系统进化研究 | 第9-10页 |
| 2 酚氧化酶的分类及基因结构分析 | 第10-12页 |
| 3 细胞组织定位和表达研究 | 第12-13页 |
| 4 激活系统相关因子研究 | 第13-16页 |
| 5 proPO 激活系统的调节机制 | 第16-18页 |
| 6 proPO 的功能研究 | 第18页 |
| 第二节 重组蛋白原核表达系统中的可溶性表达研究 | 第18-21页 |
| 1 重组蛋白原核表达研究意义 | 第18-19页 |
| 2 重组蛋白原核可溶性表达研究意义 | 第19页 |
| 3 蛋白可溶性表达策略研究 | 第19-21页 |
| 参考文献 | 第21-31页 |
| 第二章 实验方案设计 | 第31-33页 |
| 1 研究目的和意义 | 第31页 |
| 2 研究内容 | 第31-32页 |
| 3 实验流程图 | 第32-33页 |
| 第三章 材料与方法 | 第33-46页 |
| 1 实验材料 | 第33-38页 |
| ·生物材料 | 第33页 |
| ·工具酶及Kit | 第33页 |
| ·主要实验试剂与配制 | 第33-38页 |
| 2 实验常用仪器设备 | 第38-39页 |
| 3 常用方法 | 第39-44页 |
| ·连接反应 | 第39页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第39页 |
| ·重组DNA 的转化 | 第39-40页 |
| ·SDS 碱裂解法制备质粒DNA | 第40页 |
| ·酶切反应 | 第40-41页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第41页 |
| ·SDS-PAGE 蛋白质电泳 | 第41-42页 |
| ·SDS-PAGE 凝胶的染色和脱色 | 第42页 |
| ·Western-blotting | 第42-43页 |
| ·细胞的培养和保存 | 第43页 |
| ·细胞转染 | 第43-44页 |
| ·细胞基因组DNA 的提取 | 第44页 |
| 参考文献 | 第44-46页 |
| 第四章 斑节对虾proPO 基因的原核表达研究 | 第46-58页 |
| 第一节 低温诱导下的可溶性表达 | 第46-52页 |
| 1 材料与方法 | 第46-47页 |
| 2 结果与分析 | 第47-50页 |
| 3 讨论 | 第50-52页 |
| 第二节 包涵体纯化与变复性 | 第52-55页 |
| 1 材料和方法 | 第52-53页 |
| 2 结果 | 第53-54页 |
| 3 讨论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-58页 |
| 第五章 斑节对虾proPO 基因的真核表达研究 | 第58-67页 |
| 1 材料和方法 | 第58-59页 |
| ·材料 | 第58页 |
| ·试验方法 | 第58-59页 |
| 2 结果 | 第59-64页 |
| ·重组质粒pIZT/V5-His-proPO 的酶切鉴定 | 第59-60页 |
| ·转染Bm-N 细胞的筛选 | 第60-62页 |
| ·稳定转染Bm-N 细胞基因组的PCR 鉴定 | 第62-63页 |
| ·重组蛋白表达的检测分析 | 第63-64页 |
| ·粗酶活性分析 | 第64页 |
| 3 讨论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-67页 |
| 结论 | 第67-68页 |
| 附录 | 第68-71页 |
| 致谢 | 第71页 |