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产酶溶杆菌OH11菌株clp基因的克隆及功能分析

目录第1-7页
摘要第7-8页
ABSTRACT第8-10页
上篇 文献综述第10-30页
 第一章 植物病害的生物防治第11-22页
  1. 传统植物病害防治方法第11-13页
  2 植物病害生物防治的研究进展第13-22页
   ·生物防治发展简况第13页
   ·生物农药的研究及其在生物防治中的应用第13-22页
 第二章 产酶溶杆菌研究进展第22-30页
  1 产酶溶杆菌的分类地位第22-23页
  2 产酶溶杆菌的生物学特性第23-24页
  3 产酶溶杆菌的微生物发酵及存活条件研究第24页
  4 产酶溶杆菌在植物病害防治中的应用第24-25页
  5 产酶溶杆菌的生防机制第25-30页
   ·产酶溶杆菌胞外酶研究进展第25-27页
   ·生物表面活性剂第27页
   ·诱导抗性第27-28页
   ·热稳定抗真菌因子—HSAF第28页
   ·调控基因第28-30页
下篇 研究内容第30-81页
 第一章 产酶溶杆菌OH11突变体文库的建立及拮抗活性丧失突变株的筛选第31-50页
  1. 试验材料第32-34页
   ·供试菌株和质粒第32页
   ·培养基及抗生素第32-34页
  2 试验方法第34-44页
   ·细菌基因组DNA的提取第34-35页
   ·质粒的提取第35-36页
   ·DNA凝胶电泳及DNA片段浓度、大小测算第36页
   ·大肠杆菌感受态的制备和转化第36-38页
   ·Southern杂交第38-41页
   ·L.enzymongenes OH11对抗生素的耐受水平第41页
   ·L.enzymogenes OH11转座子插入文库的构建及验证第41-42页
   ·拮抗活性丧失的L.enzymogenes OH11的突变株的筛选第42-43页
   ·L.enzymogenes OH11拮抗活性丧失突变株中转座子插入位点的鉴定第43-44页
  3 结果第44-47页
   ·L.enzymongenes OH11对多种抗生素具有耐受能力第44页
   ·L.enzymogenes OH11转座子插入文库的构建及验证第44-45页
   ·OH11对油菜菌核病菌拮抗活性丧失突变株3F-11的获得第45-46页
   ·mariner转座子在菌株3F-11中的插入位点鉴定第46-47页
  4 讨论第47-50页
 第二章 CLP基因的敲除及突变体特性的研究第50-81页
  1 试验材料第51-52页
   ·试验菌株、质粒和培养条件第51-52页
   ·培养基配制第52页
  2 试验方法第52-63页
   ·L.enzymogenes OH11中clp基因的定向敲除第52-56页
   ·clp互补菌株pMclp的构建及验证第56-59页
   ·胞外酶测定第59-60页
   ·病原真菌或卵菌的平板拮抗活性测定第60页
   ·生长速率测定第60页
   ·生物膜测定第60页
   ·菌体沉降试验第60-61页
   ·胞外多糖(EPS)的检测第61页
   ·菌落形态观察第61页
   ·细胞形态观察第61-62页
   ·油菜离体叶片的防病试验第62页
   ·clp突变株在油菜叶片上的分布情况第62-63页
  3 结果第63-77页
   ·重组质粒pEXclp的构建及验证第63-64页
   ·OH11的clp突变体的构建及验证第64-67页
   ·Mclp互补菌株的构建及验证第67-70页
   ·突变株Mclp丧失了对油菜菌核病菌平板拮抗活性第70页
   ·clp基因的突变影响OH11胞外酶的产生第70-72页
   ·clp基因的突变降低了对病原真菌和卵菌的拮抗活性第72页
   ·clp基因的突变影响OH11的正常生长第72-73页
   ·clp基因的突变增强了OH11生物膜的形成第73-74页
   ·clp基因的突变加速了菌体沉降速率第74-75页
   ·clp基因的突变不影响胞外多糖产生第75页
   ·clp基因的突变影响了菌落形态第75页
   ·clp基因的突变增加了细胞外多糖类似物的积累第75-76页
   ·突变株Mclp丧失了对油菜离体叶片的防治效果第76-77页
   ·突变株Mclp在油菜叶片上紧密聚集分布第77页
  4 讨论第77-81页
附录第81-107页
参考文献第107-115页
致谢第115页

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