| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-12页 |
| Content | 第12-16页 |
| 1 前言 | 第16-33页 |
| ·裂殖酵母简介 | 第16页 |
| ·rDNA沉默(rDNA silencing) | 第16-23页 |
| ·rDNA区是基因组内一个特殊的区域 | 第16-17页 |
| ·什么是rDNA沉默 | 第17-18页 |
| ·rDNA沉默研究进展 | 第18-23页 |
| ·rDNA沉默在芽殖酵母中的研究进展 | 第18-20页 |
| ·rDNA沉默在裂殖酵母中的研究进展 | 第20-23页 |
| ·集缩素(condensin) | 第23-29页 |
| ·集缩素的组成 | 第23-24页 |
| ·集缩素的功能 | 第24-27页 |
| ·集缩素与染色体分离 | 第24页 |
| ·集缩素与DNA复性(DNA renaturation) | 第24页 |
| ·集缩素与DNA修复 | 第24-25页 |
| ·集缩素与剂量补偿效应及基因沉默 | 第25-27页 |
| ·调控集缩素的几种蛋白 | 第27-29页 |
| ·本论文的研究内容、目的和意义 | 第29-33页 |
| ·Dnt1与Pcs1/Mde4复合体 | 第29-31页 |
| ·Dnt1与集缩素复合体 | 第31页 |
| ·Dnt1与RNAi系统 | 第31-32页 |
| ·ade6+报道基因的克隆 | 第32-33页 |
| 2 材料与方法 | 第33-54页 |
| ·实验材料 | 第33-35页 |
| ·主要器械 | 第35-36页 |
| ·药品试剂 | 第36-37页 |
| ·实验方法 | 第37-54页 |
| ·裂殖酵母的培养 | 第37-41页 |
| ·主要培养基 | 第37-40页 |
| ·裂殖酵母的一般培养、保存和复苏 | 第40-41页 |
| ·随机孢子分析法(random spore analysis) | 第41-42页 |
| ·四分体解剖(tetrad dissection) | 第42-43页 |
| ·解剖针的制作 | 第42页 |
| ·裂殖酵母的四分体解剖 | 第42-43页 |
| ·h90菌株的杂交操作 | 第43-44页 |
| ·裂殖酵母基因组DNA的抽提 | 第44-46页 |
| ·溶液的配制 | 第44-45页 |
| ·裂殖酵母基因组DNA的酶法抽提 | 第45-46页 |
| ·裂殖酵母基因组DNA的快速裂解法抽提 | 第46页 |
| ·显微镜方法 | 第46-47页 |
| ·溶液配制 | 第46页 |
| ·甲醇(或乙醇)固定 | 第46-47页 |
| ·滴板实验(drop test) | 第47页 |
| ·裂殖酵母血球计数板直接计数法 | 第47页 |
| ·裂殖酵母的rDNA沉默分析-滴板实验法 | 第47页 |
| ·羟基脲(HU)阻断的细胞周期同步化 | 第47-48页 |
| ·含ade6+的pUC19质粒的构建 | 第48-52页 |
| ·溶液、培养基配制 | 第48-49页 |
| ·ade6+基因的PCR扩增 | 第49页 |
| ·pUC19质粒的扩增 | 第49-50页 |
| ·ade6+基因和pUC19质粒的双酶切 | 第50页 |
| ·ade6+基因和pUC19质粒的连接 | 第50-51页 |
| ·转化 | 第51页 |
| ·质粒DNA的扩增和小量提取 | 第51页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第51-52页 |
| ·酵母细胞转化同源整合方法 | 第52-54页 |
| ·溶液配制 | 第52-53页 |
| ·酵母细胞转化 | 第53-54页 |
| 3 结果与分析 | 第54-65页 |
| ·Pcs1/Mde4与rDNA沉默的关系 | 第54-55页 |
| ·Pcs1参与调控rDNA区同源重组 | 第54-55页 |
| ·Pcs1/Mde4复合体不参与调控rDNA沉默 | 第55页 |
| ·Dnt1与集缩素在调控rDNA沉默中的联系 | 第55-58页 |
| ·集缩素参与调控rDNA沉默 | 第55-56页 |
| ·集缩素有丝分裂中期在rDNA区富集所需的蛋白因子参与rDNA沉默调控 | 第56-57页 |
| ·Dnt1为集缩素亚基有丝分裂中期富集于rDNA区所需 | 第57-58页 |
| ·Dnt1与RNAi在调控rDNA沉默中的关系 | 第58-60页 |
| ·Dnt1独立于Ago1、Dcr1和Clr4调控rDNA沉默 | 第58-59页 |
| ·集缩素独立于Ago1和spSir2调控rDNA沉默 | 第59-60页 |
| ·含ade6+基因的pUC19质粒构建 | 第60-65页 |
| ·pUC19的酶切鉴定 | 第60-61页 |
| ·ade6+的PCR扩增 | 第61页 |
| ·pUC19和ade6+的双酶切 | 第61-62页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第62-65页 |
| 4 结论与讨论 | 第65-68页 |
| 参考文献 | 第68-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
