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稻瘟病菌Rab蛋白功能研究

摘要第1-10页
Abstract第10-12页
1. 引言第12-34页
   ·稻瘟病和稻瘟病菌第12-13页
   ·Ras 超家族蛋白第13-19页
   ·Rab 家族蛋白第19-34页
     ·Rab 家族蛋白结构和功能第19-23页
     ·胞吐作用和胞吞作用第23-29页
     ·Rab 家族蛋白进化第29-32页
     ·真菌中Rab 蛋白的功能第32-34页
2. 稻瘟病菌Rab 家族蛋白结构及演化的生物信息学分析第34-46页
   ·材料和方法第34-35页
     ·蛋白序列同源搜索及其相关信息的预测第34-35页
     ·稻瘟病菌Rab 家族蛋白的进化关系第35页
     ·真菌Rab 同源蛋白系统演化关系分析第35页
   ·结果与分析第35-44页
     ·稻瘟病菌基因组Rab 蛋白序列分析第35-39页
     ·稻瘟病菌Rab 蛋白编码基因的结构第39页
     ·稻瘟病菌Rab 蛋白家族的系统进化关系第39-40页
     ·稻瘟病菌Rab 表达的组织和时空特点第40-42页
     ·真菌Rab 蛋白同源序列系统进化关系第42-44页
   ·讨论第44-46页
3. 稻瘟病菌Rab 族蛋白编码基因的表达分析第46-64页
   ·实验材料与方法第46-53页
     ·菌株、培养基及生化试剂第46页
     ·实验方法第46-53页
   ·稻瘟病菌Rab 基因在不同发育阶段的表达特点第53-62页
     ·MoRa61 在稻瘟病菌各发育阶段的表达情况第54-55页
     ·MoRa64 在稻瘟病菌各发育阶段的表达情况第55页
     ·MoRa65 亚家族蛋白在稻瘟病菌各发育阶段的表达情况第55-58页
     ·MoRa66 蛋白在稻瘟病菌各发育阶段的表达情况第58页
     ·MoRa67 蛋白在稻瘟病菌各发育阶段的表达情况第58-59页
     ·MoRa68 蛋白在稻瘟病菌各发育阶段的表达情况第59-60页
     ·MGG_01079 蛋白在稻瘟病菌各发育阶段的表达第60页
     ·MGG_07191 蛋白在稻瘟病菌各发育阶段的表达第60-61页
     ·MoSec4 蛋白在稻瘟病菌各发育阶段的表达第61-62页
   ·讨论第62-64页
4. 稻瘟病菌Ra65 和Ra67 同源物的功能分析第64-117页
   ·材料与方法第68-86页
     ·供试菌株与质粒及培养基第68-69页
     ·稻瘟病菌基因组DNA 的提取第69-70页
     ·稻瘟病菌基因组DNA 的快速提取第70页
     ·DNA 琼脂糖凝胶电泳第70-71页
     ·基因克隆第71-74页
     ·敲除载体的构建第74-77页
     ·稻瘟病菌原生质体的制备第77-78页
     ·稻瘟病菌原生质体转化第78页
     ·利用酵母同源重组的方法构建互补载体第78-84页
     ·突变体生物性状分析方法第84-86页
   ·结果与分析第86-115页
     ·稻瘟病菌MoRa651 功能分析第86-98页
       ·稻瘟病菌MoRa651 蛋白生物信息学分析第86-88页
       ·稻瘟病菌MoRa651 蛋白系统进化关系第88页
       ·同源重组获得MoRa651 敲除突变体第88-91页
       ·MoRa651 缺失引起菌丝生长减慢、产孢量显著减少第91-93页
       ·MoRa651敲除突变体的孢子形态和萌发附着胞及侵染洋葱表皮情况第93-94页
         ·显微镜观察孢子形态变化第93页
         ·显微镜观察孢子不能够正常萌发和形成附着胞第93-94页
       ·MoRa651 敲除突变体的致病性丧失第94-96页
       ·MoRa651 敲除突变体囊泡增多变小第96-97页
       ·互补载体的构建第97-98页
     ·稻瘟病菌MoRa67 功能分析第98-115页
       ·稻瘟病菌MoRa67 蛋白分析及系统进化关系第98-99页
       ·稻瘟病菌MoRa67 蛋白系统进化关系第99-100页
       ·同源重组获得MoRa67 敲除突变体第100-102页
       ·Real-time 验证MoRa67 敲除突变体第102-103页
       ·MoRa67 缺失引起菌丝生长减慢,不产孢第103-105页
       ·MoRa67 缺失引起培养基表面气生菌丝减少第105页
       ·MoRa67 缺失没有引起菌丝形态变化第105-106页
       ·MoRa67 敲除突变体不能侵染洋葱表皮第106-107页
       ·MoRa67 敲除突变体对水稻的致病力丧失第107-109页
       ·MoRa67 敲除突变体中其它Rab 蛋白表达量降低第109-113页
         ·MoRa67 敲除突变体中MoRa651 表达降低第109页
         ·MoRa67 敲除突变体中MoRa652 表达降低第109-110页
         ·MoRa67 敲除突变体中MoRa653 表达降低第110-111页
         ·MoRa67 敲除突变体中MoRa61 表达降低第111页
         ·MoRa67 敲除突变体中MoRa68 表达降低第111-112页
         ·MoRa67 敲除突变体中MGG_07191 表达降低第112-113页
       ·MoRa67 敲除突变体囊泡增多变小第113页
       ·互补载体的构建第113-115页
   ·讨论第115-117页
参考文献第117-125页
致谢第125-126页

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