中文摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
引言 | 第9-10页 |
1 材料与方法 | 第10-15页 |
·试验材料 | 第10-11页 |
·转基因材料 | 第10页 |
·质粒载体 | 第10页 |
·菌株 | 第10-11页 |
·试验方法 | 第11-15页 |
·RNAi 载体的构建 | 第11-13页 |
·两步 PCR 法加接头 | 第11-13页 |
·构建三个基因的转基因 RNAi 载体 | 第13页 |
·三个RANi 载体液氮冻融法转化相应农杆菌感受态细胞 | 第13-14页 |
·农杆菌介导的辣椒遗传转化 | 第14-15页 |
·转基因苗PCR 检测 | 第15页 |
2 结果分析 | 第15-19页 |
·载体的构建 | 第15-18页 |
·目的片段的 PCR 扩增及接头的添加 | 第15-17页 |
·BP 和 LR 反应获得 RNAi 目的载体 | 第17-18页 |
·农杆菌介导的辣椒遗传转化 | 第18-19页 |
3 讨论 | 第19-21页 |
·多基因家族不同成员蛋白 RNAI 载体构建中目标片段的选择 | 第19-20页 |
·基于GATEWAY克隆技术RNAI载体构建中BP和 LR反应易出现的问题及其克服对策 | 第20-21页 |
4. 结果 | 第21页 |
参考文献 | 第21-24页 |
附录 1:缩略词表 | 第24-25页 |
附录 2:主要仪器与主要试剂 | 第25-26页 |
附录 3:本研究使用的质粒图谱 | 第26-28页 |
附录 4: DNA MARKER 示意图 | 第28页 |
附录 5:大肠杆菌细胞感受态的制备及转化 | 第28-29页 |
附录 6:农杆菌感受态细胞制备及质粒转化 | 第29-30页 |
附录 7:主要试剂与缓冲液的配制 | 第30-32页 |
附录 8:主要使用的培养基配方 | 第32-34页 |
致谢 | 第34-35页 |
作者简介 | 第35页 |