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甘蓝自交不亲和信号传导元件ARC1、SRK的克隆与体外表达及其相互作用研究

摘要第1-12页
ABSTRACT第12-17页
第一章 文献综述第17-43页
   ·植物自交不亲和性的简介第17-19页
     ·自交不亲和性植物的表现方式第17页
     ·自交不亲和性植物的分类第17-19页
   ·配子体自交不亲和信号传导分子机制的研究进展第19-24页
     ·以S-RNase为基础的自交不亲和信号传导第19-21页
     ·以胞质自由钙离子为第二信使的自交不亲和信号传导第21-22页
     ·配子体自交不亲和植物不亲和机理第22-24页
   ·孢子体自交不亲和信号传导分子机制研究进展第24-33页
     ·柱头中特异表达的功能基因第24-27页
     ·花粉中特异表达的功能基因第27-28页
     ·S位点复等位基因间的物理距离及其显隐性关系第28-29页
     ·参与自交不亲和细胞识别与信号传导反应的其他功能基因第29-33页
   ·自交不亲和性研究展望第33页
   ·蛋白质-蛋白质相互作用的研究策略第33-43页
     ·介导蛋白质-蛋白质间相互作用的几种结构域第34-35页
     ·蛋白相互作用的研究技术第35-41页
     ·蛋白质相互作用研究技术展望第41-43页
第二章 引言第43-47页
第三章 甘蓝ARC1臂重复蛋白编码基因的克隆与表达第47-77页
   ·材料第47-49页
     ·植物材料第47页
     ·质粒与菌株第47页
     ·主要仪器设备第47页
     ·工具酶和主要分子生物学试剂盒第47页
     ·培养基和其他试剂第47-49页
   ·方法第49-59页
     ·甘蓝基因组DNA提取第49页
     ·甘蓝柱头总RNA提取第49-50页
     ·cDNA第一链合成第50-51页
     ·引物设计第51页
     ·ARC1基因PCR扩增第51-53页
     ·目的片段克隆第53-55页
     ·测序与序列分析第55页
     ·ARC1在大肠杆菌BL21中表达第55-58页
     ·表达产物纯化第58-59页
   ·结果与分析第59-74页
     ·甘蓝基因组DNA和柱头总RNA的提取第59-60页
     ·ARC1基因克隆与序列分析第60-70页
     ·ARC1表达质粒构建与鉴定第70-72页
     ·ARC1在大肠杆菌BL21中诱导表达第72-73页
     ·ARC1蛋白的纯化第73-74页
   ·小结第74-77页
第四章 甘蓝SRK激酶结构域编码基因的克隆与表达第77-95页
   ·材料第77页
     ·植物材料第77页
     ·质粒与菌株第77页
     ·主要仪器设备第77页
     ·工具酶及主要的分子生物学试剂盒第77页
     ·培养基及其他试剂第77页
   ·方法第77-82页
     ·甘蓝基因组DNA提取第77页
     ·甘蓝柱头总RNA提取第77页
     ·cDNA第一链合成第77页
     ·引物设计第77-78页
     ·SRK_(E1)基因PCR扩增第78-79页
     ·目的片段克隆第79-80页
     ·测序与序列分析第80页
     ·SRK_(E1)在大肠杆菌BL21中表达第80-82页
   ·结果与分析第82-94页
     ·SRK_(E1)基因克隆与序列分析第82-91页
     ·表达质粒pET43.1-SRK_(E1)构建与鉴定第91-92页
     ·SRK_(E1)在大肠杆菌BL21中的诱导表达第92-93页
     ·SRK_(E1)蛋白的纯化第93-94页
   ·小结第94-95页
第五章 甘蓝自交不亲和信号传导元件ARC1与SRK相互作用的体外检测第95-99页
   ·材料第96页
   ·方法第96-97页
     ·诱饵蛋白制备第96页
     ·靶蛋白溶液制备第96页
     ·ARC1与SRK_(E1)相互作用检测第96-97页
   ·结果与分析第97-98页
     ·Ni~+剩余检测第97页
     ·ARC1与SRK_(E1)相互作用电泳检测第97-98页
   ·小结第98-99页
第六章 讨论第99-105页
   ·ARC1蛋白的结构与功能分析第99-100页
   ·SRK_(E1)蛋白的结构与功能分析第100-101页
   ·外源基因的体外表达第101页
   ·ARC1与SRK相互作用分析及其构建平台应用第101-102页
   ·蛋白质相互作用的研究策略探讨第102-105页
第七章 结论与创新点第105-107页
   ·结论第105-106页
   ·创新点第106-107页
参考文献第107-121页
附录1 英文缩略词表第121-123页
附录2 pET43.1a质粒图谱第123-125页
学习期间发表的论文和参加的科研项目第125-127页
致谢第127-128页

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