摘要 | 第1-12页 |
ABSTRACT | 第12-17页 |
第一章 文献综述 | 第17-43页 |
·植物自交不亲和性的简介 | 第17-19页 |
·自交不亲和性植物的表现方式 | 第17页 |
·自交不亲和性植物的分类 | 第17-19页 |
·配子体自交不亲和信号传导分子机制的研究进展 | 第19-24页 |
·以S-RNase为基础的自交不亲和信号传导 | 第19-21页 |
·以胞质自由钙离子为第二信使的自交不亲和信号传导 | 第21-22页 |
·配子体自交不亲和植物不亲和机理 | 第22-24页 |
·孢子体自交不亲和信号传导分子机制研究进展 | 第24-33页 |
·柱头中特异表达的功能基因 | 第24-27页 |
·花粉中特异表达的功能基因 | 第27-28页 |
·S位点复等位基因间的物理距离及其显隐性关系 | 第28-29页 |
·参与自交不亲和细胞识别与信号传导反应的其他功能基因 | 第29-33页 |
·自交不亲和性研究展望 | 第33页 |
·蛋白质-蛋白质相互作用的研究策略 | 第33-43页 |
·介导蛋白质-蛋白质间相互作用的几种结构域 | 第34-35页 |
·蛋白相互作用的研究技术 | 第35-41页 |
·蛋白质相互作用研究技术展望 | 第41-43页 |
第二章 引言 | 第43-47页 |
第三章 甘蓝ARC1臂重复蛋白编码基因的克隆与表达 | 第47-77页 |
·材料 | 第47-49页 |
·植物材料 | 第47页 |
·质粒与菌株 | 第47页 |
·主要仪器设备 | 第47页 |
·工具酶和主要分子生物学试剂盒 | 第47页 |
·培养基和其他试剂 | 第47-49页 |
·方法 | 第49-59页 |
·甘蓝基因组DNA提取 | 第49页 |
·甘蓝柱头总RNA提取 | 第49-50页 |
·cDNA第一链合成 | 第50-51页 |
·引物设计 | 第51页 |
·ARC1基因PCR扩增 | 第51-53页 |
·目的片段克隆 | 第53-55页 |
·测序与序列分析 | 第55页 |
·ARC1在大肠杆菌BL21中表达 | 第55-58页 |
·表达产物纯化 | 第58-59页 |
·结果与分析 | 第59-74页 |
·甘蓝基因组DNA和柱头总RNA的提取 | 第59-60页 |
·ARC1基因克隆与序列分析 | 第60-70页 |
·ARC1表达质粒构建与鉴定 | 第70-72页 |
·ARC1在大肠杆菌BL21中诱导表达 | 第72-73页 |
·ARC1蛋白的纯化 | 第73-74页 |
·小结 | 第74-77页 |
第四章 甘蓝SRK激酶结构域编码基因的克隆与表达 | 第77-95页 |
·材料 | 第77页 |
·植物材料 | 第77页 |
·质粒与菌株 | 第77页 |
·主要仪器设备 | 第77页 |
·工具酶及主要的分子生物学试剂盒 | 第77页 |
·培养基及其他试剂 | 第77页 |
·方法 | 第77-82页 |
·甘蓝基因组DNA提取 | 第77页 |
·甘蓝柱头总RNA提取 | 第77页 |
·cDNA第一链合成 | 第77页 |
·引物设计 | 第77-78页 |
·SRK_(E1)基因PCR扩增 | 第78-79页 |
·目的片段克隆 | 第79-80页 |
·测序与序列分析 | 第80页 |
·SRK_(E1)在大肠杆菌BL21中表达 | 第80-82页 |
·结果与分析 | 第82-94页 |
·SRK_(E1)基因克隆与序列分析 | 第82-91页 |
·表达质粒pET43.1-SRK_(E1)构建与鉴定 | 第91-92页 |
·SRK_(E1)在大肠杆菌BL21中的诱导表达 | 第92-93页 |
·SRK_(E1)蛋白的纯化 | 第93-94页 |
·小结 | 第94-95页 |
第五章 甘蓝自交不亲和信号传导元件ARC1与SRK相互作用的体外检测 | 第95-99页 |
·材料 | 第96页 |
·方法 | 第96-97页 |
·诱饵蛋白制备 | 第96页 |
·靶蛋白溶液制备 | 第96页 |
·ARC1与SRK_(E1)相互作用检测 | 第96-97页 |
·结果与分析 | 第97-98页 |
·Ni~+剩余检测 | 第97页 |
·ARC1与SRK_(E1)相互作用电泳检测 | 第97-98页 |
·小结 | 第98-99页 |
第六章 讨论 | 第99-105页 |
·ARC1蛋白的结构与功能分析 | 第99-100页 |
·SRK_(E1)蛋白的结构与功能分析 | 第100-101页 |
·外源基因的体外表达 | 第101页 |
·ARC1与SRK相互作用分析及其构建平台应用 | 第101-102页 |
·蛋白质相互作用的研究策略探讨 | 第102-105页 |
第七章 结论与创新点 | 第105-107页 |
·结论 | 第105-106页 |
·创新点 | 第106-107页 |
参考文献 | 第107-121页 |
附录1 英文缩略词表 | 第121-123页 |
附录2 pET43.1a质粒图谱 | 第123-125页 |
学习期间发表的论文和参加的科研项目 | 第125-127页 |
致谢 | 第127-128页 |