摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
第一章 引言 | 第9-15页 |
·双组分信号系统概述 | 第9-11页 |
·双组分信号系统的特征 | 第10页 |
·高等植物的双组分信号系统 | 第10-11页 |
·蛋白激酶研究概述 | 第11-12页 |
·细胞分裂素信号通路 | 第12页 |
·拟南芥AHK1 蛋白 | 第12-13页 |
·生物信息学分析 | 第13页 |
·实验目的和意义 | 第13-15页 |
·PHK1 基因的分离 | 第14页 |
·PHK1 基因的序列分析 | 第14-15页 |
第二章 实验材料和方法 | 第15-25页 |
·实验材料 | 第15页 |
·实验仪器与试剂 | 第15-16页 |
·实验仪器 | 第15页 |
·实验试剂和药品 | 第15-16页 |
·引物 | 第16页 |
·实验方法 | 第16-25页 |
·大白菜AB-81 植株的培养 | 第16页 |
·CTAB 法提取大白菜基因组DNA | 第16页 |
·反向PCR 反应 | 第16-18页 |
·PCR 产物的回收 | 第18页 |
·连接反应 | 第18页 |
·转化反应 | 第18-20页 |
·测序 | 第20-21页 |
·染色体步移实验 | 第21页 |
·Trizol 法提取大白菜总RNA | 第21-22页 |
·RT-PCR 反应 | 第22-23页 |
·3’RACE 反应 | 第23页 |
·利用生物信息学方法对PHK1 基因及氨基酸序列的分析 | 第23-25页 |
第三章 PHK1 基因DNA 和cDNA 的分离 | 第25-31页 |
·PHK1 基因DNA 序列的分离 | 第25-28页 |
·反向PCR 扩增 PHK1 基因2513 bp 片段 | 第25页 |
·常规PCR 扩增 PHK1 基因的2707 bp 片段 | 第25-27页 |
·用染色体步移技术获得PHK1 基因2707 bp 的3’端侧翼未知序列 | 第27页 |
·PHK1 基因7598 bp 片段的获得 | 第27-28页 |
·PHK1 基因的部分cDNA 序列的分离 | 第28-30页 |
·大白菜总RNA 的提取 | 第28页 |
·PHK1 基因cDNA 序列2009 bp 片段的获得 | 第28-29页 |
·3’RACE 扩增PHK1 基因cDNA 的3’末端序列 | 第29-30页 |
·PHK1 基因cDNA 序列2848 bp 片段的获得 | 第30页 |
·常规 PCR 验证 2513 bp 片段 | 第30-31页 |
第四章 生物信息学分析 | 第31-38页 |
·大白菜PHK1 基因的DNA 序列分析 | 第31-32页 |
·PHK1 基因的cDNA 序列分析 | 第32-38页 |
·拟南芥AHK1 的保守结构域分析 | 第32页 |
·大白菜PHK1 氨基酸序列的保守结构域分析 | 第32-33页 |
·大白菜PHK1 保守结构域的三级结构预测分析 | 第33-34页 |
·进化树分析 | 第34-37页 |
·大白菜PHK1 基因和拟南芥AHK1 基因的3’UTR 区比较 | 第37-38页 |
第五章 讨论 | 第38-42页 |
·基因序列获得方法的比较 | 第38-40页 |
·反向PCR | 第38页 |
·常规PCR | 第38页 |
·染色体步移技术 | 第38-39页 |
·cDNA 序列的获得 | 第39-40页 |
·小结 | 第40页 |
·生物信息学分析 | 第40-42页 |
·编码序列的生物信息学分析 | 第40-41页 |
·小结 | 第41-42页 |
第六章 结论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-46页 |
缩略语表 | 第46-47页 |
致谢 | 第47页 |