摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-12页 |
1 文献综述 | 第12-26页 |
·猕猴概况 | 第12-13页 |
·猕猴分布及分类 | 第12-13页 |
·猕猴生物学特性及应用价值 | 第13页 |
·猕猴MHC分子 | 第13-16页 |
·猕猴MHC分子的发现 | 第13-14页 |
·猕猴MHC分子结构 | 第14-15页 |
·猕猴MHC分子功能 | 第15-16页 |
·猕猴MHC基因结构 | 第16页 |
·猕猴MHC基因多样性 | 第16-19页 |
·猕猴MHC Ⅰ类基因多样性 | 第17页 |
·猕猴MHC Ⅱ类基因多样性 | 第17-19页 |
·猕猴MHC Ⅲ类基因多样性 | 第19页 |
·MHC多样性形成机制 | 第19-21页 |
·微生物选择与进化 | 第19页 |
·负向频率选择 | 第19-20页 |
·超显性假说 | 第20页 |
·MHC性别选择 | 第20-21页 |
·DRB基因 | 第21页 |
·四川猕猴研究地位 | 第21-22页 |
·研究方法 | 第22-25页 |
·研究方法进展 | 第22页 |
·本实验研究方法 | 第22-23页 |
·DGGE技术介绍 | 第23页 |
·DGGE技术原理 | 第23-25页 |
·研究目的和意义 | 第25-26页 |
2 材料与方法 | 第26-41页 |
·试验材料 | 第26页 |
·主要仪器设备 | 第26-28页 |
·主要试剂及其配制 | 第28-30页 |
·基因组DNA的提取与检测 | 第30-31页 |
·基因组DNA的提取 | 第30-31页 |
·DNA溶液浓度的检测 | 第31页 |
·基因组PCR扩增 | 第31-33页 |
·引物设计 | 第31-32页 |
·基因组PCR扩增反应 | 第32页 |
·PCR产物2.0%琼脂糖凝胶电泳检测 | 第32-33页 |
·猕猴DRB外显子2扩增片段DGGE检测及条带回收 | 第33-35页 |
·猕猴MHC DRB外显子2扩增片段DGGE检测 | 第33-35页 |
·回收条带MHC DRB 2号外显子区的PCR扩增 | 第35页 |
·猕猴MHC DRB外显子2 DGGE-二次PCR产物克隆 | 第35-41页 |
·载体选取 | 第36页 |
·感受态细胞的制备 | 第36页 |
·感受态细胞效价测定 | 第36-37页 |
·Pbluescript KS-Ⅱ+载体扩增 | 第37-38页 |
·PCR酶切产物及载体酶切产物制备 | 第38-40页 |
·连接 | 第40页 |
·转化 | 第40页 |
·克隆检测 | 第40-41页 |
·数据处理 | 第41页 |
3 结果与分析 | 第41-59页 |
·试验结果 | 第41-45页 |
·猕猴血液总DNA提取 | 第41-42页 |
·猕猴MHC DRB 2号外显子PCR扩增结果 | 第42页 |
·DRB基因外显子2 PCR—DGGE分离结果 | 第42-43页 |
·DRB基因外显子2二次PCR-DGGE结果 | 第43-44页 |
·DRB基因外显子2克隆结果 | 第44页 |
·DRB基因外显子2克隆产物DGGE鉴定 | 第44-45页 |
·数据分析 | 第45-59页 |
·DRB等位基因命名与猕猴个体基因统计 | 第45-50页 |
·DRB基因2号外显子氨基酸序列分析 | 第50-54页 |
·猕猴DRB基因外显子2序列进化树分析 | 第54-57页 |
·各群体内平均遗传距离 | 第57页 |
·群体间遗传距离 | 第57页 |
·各群体DRB基因总的选择压力图 | 第57-59页 |
4.讨论 | 第59-65页 |
·关于抽样和样本含量 | 第59页 |
·引物设计 | 第59-60页 |
·PCR试验条件的优化 | 第60页 |
·DGGE—二次PCR试验条件优化 | 第60页 |
·基因克隆—测序 | 第60-61页 |
·DRB基因命名 | 第61页 |
·猕猴个体基因统计 | 第61-62页 |
·氨基酸序列分析 | 第62-63页 |
·DRB基因聚类树 | 第63-64页 |
·各群体内基因平均遗传距离和群体之间平均遗传距离 | 第64-65页 |
·各群体总的正向选择压力 | 第65页 |
5.结论 | 第65-66页 |
参考文献: | 第66-73页 |
致谢 | 第73页 |