| 致谢 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 缩略词表 | 第9-11页 |
| 目次 | 第11-14页 |
| 1 文献综述 | 第14-38页 |
| ·骨和骨发生 | 第14-15页 |
| ·软骨和软骨发生 | 第15-18页 |
| ·生长因子NELL-1促进骨再生作用的研究进展 | 第18-27页 |
| ·NELL-1基因的鉴定 | 第18-20页 |
| ·NELL-1蛋白质的特性 | 第20-22页 |
| ·Nell-1缺陷型小鼠的特征 | 第22页 |
| ·NELL-1/Nell-1在实验动物模型中的功能验证 | 第22-23页 |
| ·NELL-1/Nell-1促进骨再生的分子机制 | 第23-25页 |
| ·展望 | 第25-27页 |
| ·转录因子NFATs在骨和关节重建中的调节作用 | 第27-31页 |
| ·CaN-NFATs信号通路 | 第27-28页 |
| ·NFATs在骨和软骨组织病理生理活动的作用 | 第28-29页 |
| ·NFATs在骨重塑中的作用 | 第29-30页 |
| ·NFATs在关节重建中的作用 | 第30-31页 |
| ·转录因子Runx2在骨骼发育中的作用 | 第31-33页 |
| ·Runx2是参与骨形成的主要调节基因 | 第32-33页 |
| ·Runx2在软骨形成中作用 | 第33页 |
| ·干细胞与骨软骨的修复和再生 | 第33-38页 |
| ·干细胞的分类和特征 | 第33-35页 |
| ·干细胞在骨组织工程中的应用 | 第35-36页 |
| ·干细胞在软骨组织工程中的应用 | 第36-38页 |
| 2 NELL-1初级响应基因的鉴定 | 第38-68页 |
| ·引言 | 第38-39页 |
| ·材料与方法 | 第39-48页 |
| ·NELL-1重组蛋白 | 第39页 |
| ·细胞培养 | 第39-42页 |
| ·细胞形态的观察 | 第42-43页 |
| ·NELL-1初级响应基因的筛选和鉴定 | 第43-46页 |
| ·蛋白质的提取和Western-Blot分析 | 第46-47页 |
| ·免疫细胞化学分析 | 第47-48页 |
| ·数据统计 | 第48页 |
| ·实验结果 | 第48-64页 |
| ·ATDC5细胞和小鼠原代肋软骨细胞的形态观察 | 第48-50页 |
| ·NELL-1蛋白诱导基因的转录谱分析 | 第50-58页 |
| ·NELL-1诱导NFATs和Runx1转录水平上调 | 第58-59页 |
| ·NELL-1诱导Nfatc2和Runx1具有时间和剂量依赖性且不依赖新蛋白合成 | 第59-63页 |
| ·NELL-1诱导Nfatc2蛋白质的合成 | 第63-64页 |
| ·讨论与小结 | 第64-68页 |
| 3 NELL-1对小鼠ATDC5细胞软骨分化的调节作用 | 第68-80页 |
| ·引言 | 第68页 |
| ·材料与方法 | 第68-72页 |
| ·细胞培养 | 第68-69页 |
| ·细胞增殖检测 | 第69-70页 |
| ·阿尔新蓝染色 | 第70-71页 |
| ·siRNA实验 | 第71页 |
| ·数据统计 | 第71-72页 |
| ·实验结果 | 第72-77页 |
| ·NELL-1对ATDC5细胞软骨分化的影响 | 第72-75页 |
| ·Nfatc2参与NELL-1对ATDC5细胞软骨分化的抑制作用 | 第75-77页 |
| ·讨论与小结 | 第77-80页 |
| 4 NELL-1、Nfatc2以及Runx2之间的相互作用关系 | 第80-94页 |
| ·引言 | 第80页 |
| ·材料与方法 | 第80-84页 |
| ·细胞转染 | 第80-81页 |
| ·RNA的提取和实时荧光定量PCR | 第81页 |
| ·免疫共沉淀 | 第81-82页 |
| ·免疫组织化学实验 | 第82-84页 |
| ·数据统计 | 第84页 |
| ·实验结果 | 第84-91页 |
| ·NELL-1对Nfatc2的诱导作用需要Runx2 | 第84页 |
| ·NELL-1无法诱导Runx2的丝氨酸磷酸化 | 第84-86页 |
| ·Nell-1、Nfatc2以及Runx2在野生型和Nell-1缺陷型小鼠股骨中的分布 | 第86-90页 |
| ·Nell-1、Runx2以及NFATs在野生型和Nell-1缺陷型小鼠颅骨中的表达 | 第90-91页 |
| ·讨论与小结 | 第91-94页 |
| 5 NELL-1对人血管周细胞成骨分化的影响 | 第94-108页 |
| ·引言 | 第94-98页 |
| ·材料与方法 | 第98-100页 |
| ·人胎儿胰腺血管周细胞的纯化 | 第98页 |
| ·细胞形态的观察 | 第98页 |
| ·细胞增殖检测 | 第98页 |
| ·RNA的提取和实时荧光定量PCR | 第98-99页 |
| ·茜素红染色 | 第99页 |
| ·数据统计 | 第99-100页 |
| ·实验结果 | 第100-105页 |
| ·人胎儿胰腺血管周细胞的形态观察 | 第100页 |
| ·NELL-1促进入胎儿胰腺血管周细胞增殖 | 第100-101页 |
| ·NELL-1促进人胎儿胰腺血管周细胞矿化 | 第101-102页 |
| ·NELL-1促进人胎儿胰腺血管周细胞成骨分化 | 第102-103页 |
| ·NELL-1促进入胎儿胰腺血管周细胞的血管生成作用 | 第103-105页 |
| ·讨论与小结 | 第105-108页 |
| 6 全文总结 | 第108-110页 |
| 参考文献 | 第110-134页 |
| 作者简历及科研成果 | 第134页 |
